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[期刊] 淡水渔业
[作者]
殷宁 赵清良 顾曙余 赵强
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张继平 郭照良 唐冬生 陈建酬 贺顺莲
为了探明 pH 值、温度及矿物质离子对暗纹东方鲀胃蛋白酶活性的影响效果,用暗纹东方鲀的胃为材料,经柠檬酸缓冲液抽提,硫酸铵分级沉淀,CM-纤维素离子交换柱、Sephedex G75 层析柱纯化,获得比活为 7.13μmol/(min·mg)的胃蛋白酶.酶经聚丙烯酰胺电泳,表现为单一蛋白带,经 SDS-PAGE 测得酶的亚基相对分子质量为18 600.酶水解酪蛋白的最适温度为50 ℃,在pH2.5, ℃下酶催化酪蛋白水解的Km值为0.715 mmol/L;pH5.0, 3737 ℃下酶...
关键词：
暗纹东方鲀 胃蛋白酶 纯化 性质
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张家源 张洪才 陈舜胜
以暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)精巢组织为原料，采用酸提法提取鱼精蛋白。以得率为指标，通过正交实验，确定了最佳的提取参数。结果显示，提取鱼精蛋白的影响因素重要性依次为：提取次数>硫酸用量>硫酸浓度>95%乙醇用量；最佳提取工艺条件为：硫酸浓度0.2 mol/L、硫酸用量为2.5倍、提取次数为2次、95%乙醇用量为2.5倍，在此工艺条件下，暗纹东方鲀鱼精蛋白的得率为3.82%，蛋白含量达89.01%。通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)可知，提取的粗鱼精蛋白有2个条带，分子量分别在25 kDa和20 kDa附近。分析其氨酸酸组成发现暗纹东方鲀鱼精蛋白属于双鱼精蛋白，其中精氨酸和丙氨酸含量相对较高，分别占31.40%和17.39%。
关键词：
暗纹东方鲀 鱼精蛋白 提取 工艺优化
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
钟国防 周洪琪 华雪铭
研究了暗纹东方鲀肠、胃和肝胰脏等不同消化器官的消化酶活性,以及不同水平的玉米蛋白粉(0%、5%、10%、15%、20%)对暗纹东方鲀(41. 06±1. 98) g胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A、羧肽酶B、胃蛋白酶、氨肽酶以及脂肪酶、淀粉酶活性的影响。结果表明:(1)暗纹东方鲀肠组织中除胃蛋白酶活性显著低于胃组织,其他消化酶活性均显著高于胃和肝胰脏组织(P
[期刊] 水产学报
[作者]
周瑞 李若男 周丽莎 邱婷婷 王静玉 谭啸 陈舜胜
为增加暗纹东方鲀附加值，考察不同处理方法对提取暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白的影响，本研究以暗纹东方鲀鱼皮为研究对象，通过热水法、酸法和胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶处理鱼皮提取 胶原蛋白。通过对不同胶原蛋白的提取率、氨基酸组成、傅里叶红外光谱（FTIR）、紫外光谱(UV)、扫描电镜、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的研究，对暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白特性进行表征和比较。结果显示，用胃蛋白酶得到的胶原蛋白提取率最高；氨基酸组成相似但含量不同；3种酶制备的胶原蛋白中脯氨酸含量显著低于酸和热水制备的胶原蛋白；FTIR扫描结果表明，5种处理方法得到的胶原蛋白都存在Amide A、Amide B、Amide Ⅰ、Amide Ⅱ和Ⅲ，均保持了胶原蛋白三螺旋结构；紫外光谱显示在235 nm左右有强吸收峰，结合FTIR确定其为典型的胶原蛋白，经过SDS-PAGE分析确定暗纹东方鲀皮中的胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白，酸法和胃蛋白酶较好的保留了蛋白结构，木瓜蛋白酶作用化学键广泛，得到小分子量的胶原蛋白分子；扫描电镜结果显示，酸法提取的胶原蛋白最适合应用在生物医学材料上运载药物。由此可见，不同处理方法提取的胶原蛋白理化特性存在一定差异，不同的酶制备胶原蛋白分子量分布会产生明显差别，可根据研究需要选用不同处理方法开发胶原蛋白产品。
[期刊] 水产学报
[作者]
钟国防 钱曦 华雪铭 周洪琪
以初重为(41.26±1.09)g的暗纹东方鲀为实验鱼,配制5种玉米蛋白粉使用量为0%、5%、10%、15%、20%的实验饲料,玉米蛋白粉对饲料中鱼粉的替代水平分别为0%、7.4%、14.8%、22.2%和29.6%。用实验饲料饲养暗纹东方鲀60d,研究玉米蛋白粉替代鱼粉对暗纹东方鲀肝胰脏、头肾和脾脏组织的溶菌酶活性及其c-型溶菌酶mRNA相对表达量的影响。结果表明,(1)暗纹东方鲀肝胰脏、头肾和脾脏的溶菌酶比活力分别为9.14、42.12和40.49U/mgprot,头肾和脾脏组织中c-型溶菌酶mRNA相对表达量分别是肝胰脏的3.76和3.24倍。(2)玉米蛋白粉替代鱼粉显著影响暗纹东方鲀溶...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李加儿 张建强 许晓娟 区又君 陶启友 郭根喜
研究了温度和pH值对斜带髭鲷Hapalogenys nitens蛋白酶、淀粉酶活力的影响。结果表明,斜带髭鲷胃内pH值范围为4.9～5.4;肝胰脏pH值为5.8～6.2;肠道pH值为6.5～6.9。蛋白酶活性随温度的上升而增加,在40℃达最大,40℃以上酶活性随温度的上升而下降。在不同消化器官中,蛋白酶活性大小顺序为:胃>前肠>幽门盲囊>后肠>肝胰脏。在15～50℃范围内,斜带髭鲷消化道不同部位淀粉酶活性的最适温度均为35℃,淀粉酶活性由高到低顺序为:肝胰脏>幽门盲囊>前肠>后肠>胃。在pH值为2.2～7.6范围内,胃蛋白酶活性的最适pH值为2.8;在pH值为4.8～8.0范围内,其他消化器官...
[期刊] 水产学报
[作者]
廖玉英 叶超霞 尹嘉琪 吴映霞 王安利
为深入了解心型脂肪酸结合蛋白(heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)的结构与功能,采用RACE技术克隆得到暗纹东方鲀H-FABP的全长cDNA序列,共772 bp,开放阅读框为402 bp,编码133个氨基酸。生物信息学分析表明,暗纹东方鲀H-FABP基因具有一个脂质转运蛋白家族保守结构域和多个蛋白激酶磷酸化位点。NJ法系统进化分析显示,暗纹东方鲀与红鳍东方鲀亲缘关系最近,其次是鲈形目。经荧光定量PCR检测,H-FABP基因在暗纹东方鲀所有被检测的组织中都有表达,其中肝脏中的表达量最高,其次为肌肉和心脏,预示H-FABP主要参与脂肪酸氧化分解...
[期刊] 水产学报
[作者]
杨蕙萍 童圣英 王子臣
利用分光光度计比色法测定了2－3cm的皱纹盘鲍（HaliotisdiscushannaiIno）的蛋白消化酶的最适温度、最适pH以及11种金属离子对其的影响。结果表明：在最适温度50℃下的活化能为4．89×10~4J／mol；最适pH为2．60和5．00。对其最适pH值的分析表明：皱纹盘鲍存在有胃蛋白酶，且活性颇高。在11种离子中，Cu~(2+)、Hg~(2+)、Ag~+对蛋白酶活性具有显著的抑制作用，而Fe~(3+)。Mg~(2+)则具有一定的促进作用。
关键词：
皱纹盘鲍 蛋白酶
[期刊] 水产学报
[作者]
刘襄河 叶超霞 郑丽勉 欧成成 王安利
配制等蛋白质(42%),等脂肪(9%),糊精水平分别为10%、15%、20%、25%、30%的5组饲料,饲养暗纹东方鲀幼鱼[初始体质量为(10.25±0.51)g]60 d,考察饲料中不同糊精水平对其生长、消化酶活性和血液生化指标的影响。结果发现,随着饲料糊精水平的升高,暗纹东方鲀幼鱼的特定生长率和饲料效率先增加后降低,25%组最高,并显著高于10%和15%组。30%组鱼的脏体比和肝体比显著高于10%组,同时其肝脂肪含量也显著高于其他组。10%组的肝糖原和血浆总氨基酸含量显著低于其他组。10%和15%组鱼的肝胰脏和肠道中淀粉酶活性显著低于其他实验组,而其肝胰脏中胰蛋白酶活性显著高于30%组。2...
关键词：
暗纹东方鲀 生长 消化酶 血浆生化指标
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
钟国防 韩斌 华雪铭 周洪琪
以鱼粉、豆粕和玉米蛋白粉为待测原料,分别与暗纹东方鲀基础饲料配制成3种试验饲料,其中含有70%的基础饲料和30%待测原料,研究暗纹东方鲀对3种蛋白质原料的消化率;用豆粕、玉米蛋白粉替代部分鱼粉配制基础饲料,分别在基础饲料中添加0.050%和0.075%的酶制剂,研究酶制剂对暗纹东方鲀配合饲料表观消化率的影响。实验结果表明:暗纹东方鲀对鱼粉、豆粕和玉米蛋白粉蛋白质和干物质的消化率都较高,蛋白质的消化率分别为93.40%、91.83%和94.97%;干物质的消化率分别为88.13%、85.73%和89.25%。饲料中添加酶制剂能显著提高暗纹东方鲀蛋白质和干物质的消化率,但0.050%和0.075%...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王喆 刘茜倩 庞博 张晓辉 鲍恩东
[目的]本研究旨在提供蛋白酶治疗奶牛乳房炎的参考数据,了解胰蛋白酶和糜蛋白酶的体外微生物敏感性。[方法]通过测定细菌的A600绘制不同细菌的生长曲线,探讨了0.5C浓度胰糜蛋白复合酶(胰、糜蛋白酶各0.08 mg·m L-1)、1C浓度胰糜蛋白复合酶(胰、糜蛋白酶各0.16 mg·m L-1)、2C浓度胰糜蛋白复合酶(胰、糜蛋白酶各0.32 mg·m L-1)及其与头孢噻呋钠、磷酸替米考星和硫氰酸红霉素联用对5种常见奶牛乳房炎致病菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、无乳链球菌、停乳链球菌)生长的影响。同时,采用电子显微镜扫描技术,观察胰糜蛋白复合酶与头孢噻呋钠协同对大肠杆菌超微结构的影响。...
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
董志国 李家乐 李晓英 程汉良 孟学平
研究了不同温度、不同pH值和摄食后不同时间条件下西施舌胃蛋白酶的活性变化。结果表明:在pH为3.0时,西施舌胃蛋白酶最适温度为50℃,明显高于生理温度,酶活力达到最大(290.18±20.11)U;在温度为50℃下,最适pH值为2.6,酶活力达到最高,为(426.59±30.80)U,远低于生理pH;西施舌在摄食后,胃蛋白酶的活力有明显的提高,摄食后0.5 h西施舌胃蛋白酶的活力达到最大值(96.04±30.02)U,其后活力降低,但在摄食后4 h时,活力又有回升,之后又趋于最低值(43.06±6.69)U。
关键词：
西施舌 胃蛋白酶 温度 pH值 摄食时间
[期刊] 淡水渔业
[作者]
华元渝 顾志峰 周昕 邹宏海 石黎军 李勤 吴剑峰 秦桂祥 朱永祥
在 1 994～ 2 0 0 1年间 ,进行了暗纹东方鱼屯全人工繁殖→苗种培育→商品鱼养殖全过程的控毒技术研究。在养殖全过程中 ,通过运行生态型再生式水循环养鱼系统来改善水体生态环境 ,通过投喂自繁淡水轮虫和自制无毒配合饲料等措施 ,从食物链环节控制河鱼屯毒素TTX的来源 ,达到控毒的目的。经控毒的家化暗纹东方鱼屯亲本 ,采用高效液相色谱仪和荧光分光光度计联合法随机抽样检验 ,结果表明 :其体内四种组织器官的TTX平均含量低于 2 μg/g,属基本无毒
关键词：
暗纹东方鱼屯 控毒技术 循环水系统 轮虫
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘炎 董晓芳 佟建明 高玉鹏 鲍延娥 崔耀明
【目的】研究蛋鸡饲粮中添加不同水平的碳酸氢钠对肠道内容物pH、消化蛋白酶活性和肠道菌群的影响,以探讨饲粮中添加碳酸氢钠对蛋鸡消化机能的影响。【方法】选取21周龄海兰褐壳蛋鸡450只,随机分为5组,每组6个重复,每重复15只鸡;对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂添加0.1%,0.5%,2.5%,5%NaHCO3的试验饲粮,试验期133d。试验期末采集各组肌胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠食糜及粪便,测定各段食糜和粪便的pH、肌胃食糜的胃蛋白酶活性、十二指肠食糜的胰蛋白酶和糜蛋白酶活性以及回肠和盲肠食糜中菌群的变性梯度凝胶电泳(DGGE)指纹图谱,并计算回肠、盲肠食糜的多样性指数和相似性指数。【结果...
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