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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杨丽娜  刘兴娜  卢宝慧  吴庠玉  白庆荣  王雪  高洁  
【目的】 将来源于大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae pv.glycinea)Psg12菌株的hrpZPsg12基因导入烟草“云烟87”,对转化植株进行烟草普通花叶病毒(TMV)、烟草马铃薯Y病毒病(PVY)和烟草野火病(Pseudomonas syringae pv.tabaci)的抗病性鉴定,为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,将hrpZPsg12基因转入烟草“云烟87”中,对T0和T1代转基因植株进行PCR检测、Southern杂交,并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrpZPsg12基因成功转入“云烟87”中,PCR检测表明共获...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杨丽娜  刘兴娜  卢宝慧  吴庠玉  白庆荣  王雪  高洁  
【目的】 将来源于大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae Pv.glycinea)Psg12菌株的hrPZPsg12基因导入烟草“云烟87”,对转化植株进行烟草普通花叶病毒(Tmv)、烟草马铃薯y病毒病(Pvy)和烟草野火病(Pseudomonas syringae Pv.Tabaci)的抗病性鉴定,为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,将hrPZPsg12基因转入烟草“云烟87”中,对T0和T1代转基因植株进行Pcr检测、souThern杂交,并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrPZPsg12基因成功转入“云烟87”中,Pcr检测表明共获...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杨丽娜  刘兴娜  卢宝慧  吴庠玉  白庆荣  王雪  高洁  
【目的】将来源于大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae pv.glycinea)Psg12菌株的hrpZPsg12基因导入烟草"云烟87",对转化植株进行烟草普通花叶病毒(TMV)、烟草马铃薯Y病毒(PVY)和烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)的抗病性鉴定,为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,将hrpZPsg12基因转入烟草"云烟87"中,对T0和T1代转基因植株进行PCR检测、Southern杂交,并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrpZPsg12基因成功转入"云烟87"中,PCR检测表明共获得...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杨丽娜  刘兴娜  卢宝慧  吴庠玉  白庆荣  王雪  高洁  
【目的】将来源于大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae Pv.glycinea)Psg12菌株的hrPZPsg12基因导入烟草"云烟87",对转化植株进行烟草普通花叶病毒(Tmv)、烟草马铃薯y病毒(Pvy)和烟草野火病菌(Pseudomonas syringae Pv.Tabaci)的抗病性鉴定,为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法,将hrPZPsg12基因转入烟草"云烟87"中,对T0和T1代转基因植株进行Pcr检测、souThern杂交,并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrPZPsg12基因成功转入"云烟87"中,Pcr检测表明共获得...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 方玉达  刘大钧  
通过根癌农杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)介导 ,将水稻几丁质酶基因导入烟草 (Nicotianatabacum)栽培品种中 ,并得到转基因植株。导入的 3个基因即nptⅡ、bar和几丁质酶基因在子一代以近 3∶1的比例分离。表达水稻几丁质酶的子一代转基因烟草表现出对烟草赤星病病原真菌 (A .alternata)的抗性。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 韩彦莎  鲁彦君  于瑞  赵瑞  沈昕  陈少良  
【目的】克隆胡杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,并研究该基因和植物抗Cd2+性之间的关系。【方法】利用RT-PCR方法从胡杨中克隆一个木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,将该基因的全长cDNA克隆到植物表达载体pGreen0029上,然后通过农杆菌介导法,将重组表达载体转入烟草,并对转基因烟草的抗Cd2+能力进行初步分析。【结果】PeXTH基因的开放阅读框(ORF)长867bp,含ATG起始密码子和TAG终止密码子,编码由288个氨基酸组成的蛋白;多重氨基酸序列比对结果显示,PeXTH蛋白含有木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTHs)的保守催化活性域DEIDFEFLG和N-糖基化位...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王雪  田佳  徐琳琳  卢宝慧  杨丽娜  高洁  
【目的】提高生防枯草芽孢杆菌JN209的稳定性及生防活性。【方法】利用基因工程技术,构建含hrpZPsg12基因的分泌表达载体,采用电转化方法将从大豆细菌性斑点病菌(Pseudomonas syringae pv.glycinea)中克隆到的hrpZPsg12基因转化至枯草芽孢杆菌JN209中,同时采用抑菌圈法测定宿主菌与基因工程菌抑菌活性的变化,评价其作为生物农药在田间对烟草病毒病的生防效果。【结果】成功构建了重组枯草芽孢杆菌基因工程菌JN209/pWB980hrpZPsg12。抑菌活性分析表明,基因工程菌株在保持原始宿主菌株抑菌活性的同时,对部分靶标菌的抑菌效果有明显提高。烟草病毒病田间小...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 崔红  慕平利  李雪君  刘梦林  
为研究fps基因在烟草发状根中的表达对发状根生长及物质代谢的影响,对fps转基因发状根株系k-3离体培养条件下的生长特性及抗菌性进行了研究.在摇瓶悬浮培养过程中,发状根生长呈现"S"型曲线,最初生长缓慢,到第10天开始迅速生长,25 d进入生长平台期;利用气升式内环流生物器,在25℃通气量为2 L/min,接种量为1 g的条件下培养25 d,发状根鲜重达94.7 g/L;以赤星病菌(Alternaria alternata)粗毒素为诱导子对发状根诱导培养,转基因发状根浸提液在黑胫病根刺接种试验中,能够明显提高烟草幼苗对黑胫病的抗性.
[期刊] 华北农学报  [作者] 王国东  陈朝银  李金晶  普丽梅  关瑞攀  葛锋  刘迪秋  
为进一步研究JsWRKY1的生物学功能,构建JsWRKY1的植物超表达载体并转入烟草中过表达。再生的JsWRKY1转基因烟草与野生型烟草在表型上无明显差异。JsWRKY1过表达上调了转基因烟草体内几个防卫相关基因MnsOD、Cu/Zn sOD、Cn、nADPH OxiDAse和PR1的转录水平。与野生型烟草相比,JsWRKY1转基因烟草体内的超氧化物歧化酶、过氧化物酶和抗坏血酸过氧化物酶活性在正常生长以及胶孢炭疽菌接种后均显著增强。平板抑菌试验结果显示,JsWRKY1转基因烟草叶片总蛋白对病原真菌葡萄座腔菌、串珠状赤霉菌、胶孢炭疽菌和尖孢镰刀菌的菌丝生长具有不同程度的抑制作用。此外,用胶孢炭疽...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 常欣  庞磊  李叶云  魏艳丽  江昌俊  
【目的】通过转基因烟草验证茶树CsCBF1基因抗寒性功能,为发掘、筛选茶树重要功能基因提供理论依据。【方法】利用根癌农杆菌介导法将构建的表达载体pBI121-CsCBF1导入烟草,通过PCR、RT-PCR和GUS活性染色鉴定外源CsCBF1基因是否导入并整合到烟草基因组上转录表达。然后将转pBI121-CsCBF1型、转pBI121型和野生型烟草分别置于25,4和0℃下处理48h后,检测其膜质通透性、丙二醛(MDA)含量和叶绿素荧光参数Fv/Fm,并将0℃处理3d的转pBI121-CsCBF1型和野生型烟草置于25℃下培养1周后观测恢复表型和统计死亡率。【结果】成功构建表达载体pBI121-C...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 许石剑  肖炳光  高玉龙  李永平  
以含抗烟草花叶病毒(TMV)基因的烟草Ti245为抗病亲本,以K326为感病亲本,经杂交得到F1,F1自交得到F2群体,分析了Ti245抗TMV的遗传规律,并对抗性基因进行SSR标记定位。结果表明:Ti245对TMV的抗性由1对隐性基因控制;基因定位发现,Ti245抗TMV的位点位于LG9连锁群,标记*Tp217200距目的基因最近,遗传距离为3.3cM。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 周文丽  唐永红  陈耀锋  成巨龙  王会强  杨梅  
【目的】利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens,GV3101)介导法获得转芪合酶基因烟草,改良烟草对根黑腐病的抗性。【方法】以普通烟草品种"97204"叶片为受体,采用根癌农杆菌介导法,将芪合酶基因导入烟草基因组并进行分子检测,利用灌根法对4株转芪合酶基因烟草植株接种烟草根黑腐病菌,观察烟草地上部分和根部的变化,并测定苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性。【结果】通过根癌农杆菌介导、抗性选择和分子检测,获得32株转芪合酶基因烟草。从中选取长势一致的4株转基因烟草用于抗病性鉴定,结果表明,2株在灌根接种后生长正常,另外2株在接种第7天时出现轻微黄化,3株...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李慧平  王庆竹  汤纬玮  文晓鹏  
为探讨马尾松PmMYB169基因耐低磷胁迫功能,在前期克隆PmMYB169全长序列的基础上,构建pBWA(V)HS-PmMYB169-GLosgfp载体,在烟草中对PmMYB169基因进行亚细胞定位;通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,分析转基因植株对低磷胁迫的抗性。结果表明:PmMYB169基因在细胞核中行使功能;遗传转化获得22株转基因植株,对表达量较高的3个株系(Line-2、Line-11、Line-16)进行耐低磷分析显示,低磷胁迫下转基因烟草中磷含量、生物量、Apase活性、POD活性及SOD活性均显著高于野生型,而正常磷及高磷条件下两者并无明显差异,因此,超表达PmMYB169基因显著提高了植株的耐低磷能力。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 丁永乐  许自成  杨铁钊  闫新甫  刘学芝  叶红潮  张涵  陈贵岭  
对转基因抗虫烟草品系抗虫 931及其原受体品种NC89(对照 )两种烟叶香气基础物质、化学成分和农药残留量进行了测定和分析 ,结果表明 :抗虫 931和NC89品种烟叶中均测出了相同的 2 2种香气物质 ,两者香气物质含量和内在化学成分的差异均未达到显著水平 ,说明在这些品质性状方面二者具有等同的安全性 ;抗虫 931烟叶中农药残留量则较对照低 ,其中六六六的残留量显著低于对照
[期刊] 华北农学报  [作者] 时焦  韩锦峰  徐宜民  Cooper J I  刘华山  
采用荧光定量法对转几丁质酶基因烟草T2植株的几丁质酶活性进行了测定,结果表明,转基因烟草株系的几丁质酶活性明显高于未转基因烟草,同时发现,pH对转基因烟草中的几丁质酶活性有一定的影响。对转基因烟草接种烟草炭疽病菌进行抗病性鉴定。
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