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[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李海兵 宋晓玲 韦嵩 刘君 李赟
分析了克氏原螯虾Procambarus clarkia人工感染白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)后,其血细胞吞噬(Phagocytosis)活性,肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)活性的变化规律,其目的是为WSSV感染与螯虾的免疫防御反应等研究提供依据。分析结果显示,随着WSSV感染克氏原螯虾时间的延长,血细胞吞噬活性、肝胰腺酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性也随之改变,其中血细胞吞噬活性的变化规律性比较明显,可作为WSSV感染的敏感指标,也可以用作间接指示克氏原螯虾健康状况的指标。而在不同的感染时间,克氏原螯虾肝胰腺ACP...
[期刊] 水产学报
[作者]
陶易凡 强俊 王辉 徐跑 马昕羽 赵文强
研究了高ｐＨ胁迫对克氏原螯虾鳃、肝胰腺中酶活性的变化，以及对鳃、肝胰腺组织结构的影响。在得出９６ Ｈ Ｌ Ｃ＿（５０）的基础上，设置对照（ｐＨ７．６）和实验（ｐＨ１０．２）２个ｐＨ处理组，进行９６ Ｈ高ｐＨ胁迫，于胁迫后０、２、８、２４和９６ Ｈ测定鳃Ｎａ～＋－Ｋ～＋－ａＴｐ酶、乳酸脱氢酶（ＬａＣＴａＴｅ ｄｅＨｙｄｒｏｇｅＮａｓｅ，ＬｄＨ）、延胡索酸还原酶（ｆｕｍａｒａＴｅ ｒｅｄｕＣＴａｓｅ，ｆｒｄ）、肝胰腺超氧化物歧化酶（ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ｄｉｓｍｕＴａｓｅ，ｓｏｄ）、过氧化氢酶（ＣａＴａＬａｓｅ，ＣａＴ）的活性以及丙二醛（ｍａＬｏＮｄｉａＬｄｅＨｙｄｅ，ｍｄａ）的含量，并采集完整的．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
徐进 魏开金 卢建超
为探明高温应激对克氏原螯虾(Procambarus clarkia)抗病力的影响,分别采用30℃和35℃水温进行高温应激试验,应激前和应激后3、6、12、24和48 h分别采集血淋巴样本,测定总超氧化物歧化酶(T-SOD)、多酚氧化酶(PPO)、溶菌酶(LYZ)、酸性磷酸酶(ACP)以及碱性磷酸酶(ALP)等免疫相关酶类指标。并在上述高温应激下开展白斑综合征病毒(WSSV)人工感染实验,同时设置25℃为阳性和阴性对照组,于感染后3、6、12、24、48、72 h取鳃组织定量测定WSSV在组织中的载量,同时记录克氏原螯虾的发病和死亡情况,统计累积死亡率。结果显示,克氏原螯虾血淋巴中的T-SOD与LYZ含量在高温应激后都出现了显著性降低,而PPO、ACP和ALP的变化差异不大。在35℃饲养条件下,WSSV在克氏原螯虾体内的增殖受到抑制,实验虾发病慢,累积死亡率相对较低,但在30℃饲养条件下,WSSV在克氏原螯虾体内的增殖较常温(25℃)下更活跃,发病和死亡更快。结果表明,高温应激能导致克氏原螯虾机体非特异性免疫力降低,30℃时能加快克氏原螯虾感染WSSV的发病进程,而35℃时因病毒复制被抑制而导致疾病的发展受阻。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陶易凡 强俊 王辉 徐跑 马昕羽 赵文强
采用石蜡切片技术，结合生物酶的测定，以体重（２５．８８±４．４０）ｇ的克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓ ｃｌａｒｋｉｉ）为研究对象，研究了低ＰＨ胁迫对克氏原螯虾鳃和肝胰腺生理代谢与组织结构的影响。在得出９６ Ｈ ｌｃ５０的基础上，将克氏原螯虾暴露于半致死浓度ＰＨ水体中９６ Ｈ，以ＰＨ７．６作为对照，并于胁迫后０ Ｈ、２ Ｈ、８ Ｈ、２４ Ｈ、９６ Ｈ采集鳃和肝胰腺样品，测定鳃部分代谢酶和肝胰腺主要抗氧化指标，并对鳃和肝胰腺组织进行切片观察。实验结果表明，ＰＨ ９６ Ｈ ｌｃ５０为３．６７５。低ＰＨ暴露后，实验组鳃Ｎａ～＋－ｋ～＋－ａＴＰ酶和乳酸脱氢酶（ｌａｃＴａＴｅ ｄｅＨｙｄｒｏｇｅＮａｓ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
陈再忠 王武 成永旭
采用磷酸苯二钠法在520nm波长测定了未成熟、早熟和正常成熟中华绒螯蟹肝胰腺与性腺中的酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(ALP)。结果表明:(1)各组蟹肝胰腺ACP和ALP活性都显著高于性腺;(2)早熟蟹肝胰腺中ACP活性都显著高于未成熟蟹而低于正常成熟蟹,在各发育阶段没有性别差异,但是,早熟雌蟹和正常成熟雌蟹卵巢中ACP活性都较早熟雄蟹和正常雄蟹精巢低,早熟与正常成熟个体没有差异;(3)早熟雌蟹肝胰腺ALP活性显著高于未成熟和正常成熟雌蟹,而与三组雄蟹处于同一水平,但是,早熟和正常成熟雌雄蟹的性腺中ALP活性没有显著差异。由此得出结论:(1)性腺发育所需营养物质的动员或合成主要与肝胰腺ACP...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
成勇钢 吴志新 陈孝煊 周聪 李丽鹃
选用60 g左右健康正常的鲤540尾,随机平均分为6组,每组设3个重复。试验设6种处理,即基础饲料中分别添加甲基盐霉素0(对照组)、10、20、40、80、160 mg/kg。研究了甲基盐霉素对鲤白细胞吞噬活性和溶菌酶活性的影响。试验结果表明,饲料中添加10 mg/kg甲基盐霉素对鲤白细胞吞噬活性和溶菌酶活性影响不显著,而添加20~160 mg/kg甲基盐霉素对鲤白细胞吞噬活性和溶菌酶活性有一个从促进到抑制的转变,剂量越高,这个转变越快,并且随饲喂时间的延长,其抑制作用越来越强。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
宋昕昊 杨丹 季春雷 王佩蓉 张静静 彭麟 高修歌 季辉 江善祥
[目的]旨在探究马度米星铵对克氏原鳌虾肝胰腺药物代谢酶的影响。[方法]将192尾成年雄性克氏原鳌虾（体质量21 g左右）随机分为四组（每组48尾）。除对照组外，各处理组的克氏原螯虾分别采用低剂量（0.7 mg·L~(-1)）、中剂量（3.5 mg·L~(-1)）和高剂量（7 mg·L~(-1)）的马度米星铵连续药浴给药28 d。分别在给药后7、14、21和28 d各处死12尾克氏原鳌虾，取其肝胰腺，制备微粒体后，测定细胞色素P450（CYP_(450)）、细胞色素b5（CYP b5）含量，I相药物代谢酶红霉素-N-脱甲基酶（ERND）活性、氨基比林-N-脱甲基酶（APND）活性和苯胺-4-羟化酶（AH）活性以及II相药物代谢酶谷胱甘肽S-转移酶（GSTs）、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶（UGTs）、N-乙酰基转移酶（NATs）的活性，并采用实时荧光定量PCR方法测定了CYP_(450)、gst、CYP b5基因的mRNA的表达水平。[结果]在28 d内，7 mg·L~(-1)处理组各时间段CYP_(450)含量与对照组相比显著增高（P < 0.05），CYP b5无显著变化（P > 0.05）；与对照组相比，7 mg·L~(-1)处理组的I相药物代谢酶ERND、APND、AH活性和II相药物代谢酶GSTs、UGTs和NATs活性均显著升高（P < 0.05），3.5 mg·L~(-1)处理组的ERND、UGTs和NATs活性显著升高（P < 0.05），0.7 mg·L~(-1)处理组ERND活性显著升高（P < 0.05）；马度米星铵对肝药酶相关的gst、CYP_(450)基因表达均显著上调（P < 0.05），CYP b5基因除第7 天显著上调（P < 0.05），其余时间无显著变化（P > 0.05）。[结论]马度米星铵可以诱导克氏原鳌虾肝胰腺药物代谢酶，其中ERND和GSTs对马度米星铵较敏感，可以作为早期马度米星铵污染水体的生物标记物。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
公洁 祝孟茹 占铭 席昌俊 神国卿 水燕 徐增洪 沈怀舜
细胞凋亡是由一系列相关基因严格调控的细胞程序性死亡，在抵御病原入侵、维持机体内环境稳态等方面有着重要意义。其中细胞色素c从线粒体释放到细胞质中是凋亡开始的关键一步。本研究利用RACE技术首次克隆获得了克氏原螯虾(Procambarus clarkii)细胞色素c基因(PcCytc)，全长897 bp，包括163 bp的5′-UTR、419 bp的3′-UTR和315 bp的开放阅读框，编码104个氨基酸。定量PCR检测结果显示，PcCytc基因在克氏原螯虾的各个组织中都有表达，其中在鳃、肠道和肌肉中表达高，在胃中表达最低。WSSV感染实验显示，检测的肝胰腺、肠道和肌肉组织中PcCytc在病毒感染后，表达水平均出现上调，并在24 h达最高值，约是此时PBS组表达量的2.65、2.07和2.20倍，均存在极显著性差异(P<0.01)。PcCytc基因干扰后，克氏原螯虾体内WSSV病毒拷贝数明显增加(P<0.05)，表明PcCytc能够抑制WSSV在克氏原螯虾体内的复制，延迟感染；同时凋亡相关基因bcl-2、bax和caspase-3的表达均发生显著上调或下调(P<0.05)。本研究表明，PcCytc可通过调节凋亡途径抑制WSSV感染，论文结果为克氏原螯虾对WSSV感染的免疫反应提供了新的见解。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
冼健安 王安利 苗玉涛
应用流式细胞术(FCM)对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)血细胞的分类、活性和免疫功能进行了研究。结果显示:血细胞可分为透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞三个亚群,组成比例分别为(26.25±5.29)%、(51.44±7.02)%和(11.20±1.82)%;螯虾血细胞的平均总凋亡率约为3.12%;血细胞对荧光大肠杆菌的吞噬活力显著(P<0.05)高于荧光微球,吞噬率分别为17.04%和14.57%;血细胞在自然生理状态下含有一定量的活性氧,其在两类颗粒细胞的含量显著(P<0.05)高于透明细胞,在大颗粒细胞中最高。结果表明,FCM能较好地应用于虾类的血细胞分类和功能研究。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
於叶兵 吕富 赵卫红 杨文平 王爱民 黄金田
研究分析了克氏原螯虾(Procambarus clarkii)雌性亲本在产卵和抱卵期间肝胰腺和肌肉生化组成的变化及能量变动。结果表明:(1)克氏原螯虾产卵前后肝胰腺与肌肉指数均无显著性变化(P>0.05),而卵巢指数由6.14%降到0.40%(P<0.01),产卵后至卵破膜阶段肝胰腺指数上升了13.29%,显著高于产卵前水平(P<0.05)。(2)克氏原螯虾产卵后肝胰腺和肌肉中3大营养物质均呈现下降趋势,其中肝胰腺中粗脂肪含量与肌肉中粗蛋白含量下降极显著(P<0.01),至卵破膜阶段,肝胰腺中的蛋白质和碳水化合物含量快速恢复且极显著超过产卵前水平(P<0.01)。产卵前后肝胰腺能值下降最大,抱...
关键词：
克氏原螯虾 生理阶段 生化组成 能值
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
王树芹 周洪琪
以壳聚糖为饲料添加剂,分5组(0％、0.3％、0.5％、1.0％、2.0％)对网箱养殖的异育银鲫(allogyogenetics silver crucian carp)进行不同添加剂量的饲养实验。经过2个月的饲养,分别从每组提取异育银鲫血清、脾脏和头肾上清液进行溶菌酶活性和白细胞吞噬活性实验,实验结果表明,添加0.5％或1.0％壳聚糖能有效地提高异育银鲫的溶菌酶活性(P<0.01)和白细胞的吞噬作用(P<0.01),该壳聚糖可被用作水产动物免疫增强剂,其在饲料中适宜添加量为0.5％。
关键词：
壳聚糖 异育银鲫 溶菌酶活力 吞噬作用
[期刊] 中国水产科学
[作者]
杜国儒 解伟 左佳俊 刘伟 王雪惠 隋丽英
为探究克氏原螯虾(Procambarus clarkii)免疫调节作用的分子机制,本研究分析了与3-羟基丁酸共培养的克氏原螯虾的血淋巴细胞转录组数据,发现细胞骨架基因呈显著的差异表达,推测其可能与克氏原螯虾的免疫调节相关。本研究对细胞骨架基因进行注释,并验证了其对细胞免疫调节的影响。注释结果显示,5个细胞骨架基因中4个为驱动蛋白超家族(kinesin family,KIF)基因,均含有KISc结构域,且编码氨基酸以谷氨酸、亮氨酸为主,蛋白质二级结构主要由α-螺旋组成。各物种中除kinesin-like protein的保守结构域及保守基序数量、种类和位置有所差别,其余KIFs基因大致相同。q RT-PCR结果表明,KIFs基因在克氏原螯虾的造血组织和鳃中表达量较高,在眼柄、肌肉等组织中表达较低(P<0.05)。RNAi结果证明,0.10μg/g体重剂量ds KIF11的敲降效果最佳,可将KIF11的表达量敲降至8.01%(P<0.05);与对照组相比,随着KIF11基因的敲降,血淋巴细胞对FITC标记的副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和红色荧光微球的吞噬率分别下降36.26%(P<0.01)和41.94%(P<0.01)。上述结果表明KIFs基因保守性较高,参与了血淋巴细胞的吞噬作用,这一结果为深入研究KIFs基因在先天免疫中的功能和机制提供了依据。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王宝杰 王雷
用ZymosanA对中国对虾(Penaeuschinensis)血细胞进行体外刺激,用NBT还原法测定血细胞吞噬活动中产生O-2的产生;不同浓度2的过程。结果表明,中国对虾血细胞在经刺激诱导的吞噬活动中有明显的呼吸爆发和O-的ZymosanA对血细胞产生O-2的影响不同。ZymosanA在0.25～1.0mg/mL时随质量浓度的增加,产生O-2的量也增加,但当ZymosanA质量浓度继续增加到1.5和2.0mg/mL时,产生O-2的量反而下降。用同一浓度的ZymosanA对不同密度血细胞进行刺激产生O-2的强度也不同,随着密度的增加,血细胞产生O-2的量增加。SOD、NEM和碘代乙酰胺(Iod...
[期刊] 水产学报
[作者]
陆剑锋 万全 吴旭干 杨筱珍 赵维信 成永旭
甲壳动物血细胞在宿主免疫应答中发挥着重要的作用,其中包括识别、吞噬、包囊黑色素形成、胞毒作用和胞间的信息传递。不同类型的血细胞其防御机制不同,因此血细胞的形态和分类是甲壳动物免疫学的基础。通常情况,十足目甲壳动物的血细胞类型主要依据细胞质中颗粒物质的有无和颗粒物质的相对大小进行分类。研究采用Giemsa染色法、H.E染色法和电子显微技术法对克氏原螯虾血细胞进行分类,观察到3类血细胞:透明细胞、小颗粒细胞、大颗粒细胞,它们所占的比例分别为19.9%,46.1%,34.1%。在电镜下,这3类血细胞的超微结构极为容易辨识。透明细胞通常在3类细胞中最小,核质(N/C)比最高,但无明显的颗粒;相比之下,...
关键词：
克氏原螯虾 血细胞 免疫 包囊
[期刊] 淡水渔业
[作者]
魏华 沙晓姣 陈阿琴 唐建清 夏爱军
为了研究5-HT与DA阳性物质在克氏原螯虾(Procambrus clarkii)不同发育时期的卵巢细胞和肝胰腺细胞中的分布特征,运用免疫组化法对卵巢发育4个不同时期的卵巢与肝胰腺进行观察。结果表明,各期卵巢卵细胞和肝胰腺细胞中均存在5-HT与DA阳性物质。Ⅰ期卵巢5-HT阳性物质分布于卵母细胞胞核,胞质未出现阳性;Ⅱ期～Ⅳ期5-HT阳性物质主要集中在卵母细胞胞质以及胞核。在发育各期的肝胰腺中5-HT的免疫物质均呈阳性。Ⅰ～Ⅳ期卵巢中,DA阳性物质主要分布于卵母细胞的胞核以及肝胰腺细胞,其强度呈递减趋势。结果提示5-HT具有促进卵巢发育作用,而DA则抑制卵巢发育。
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