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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 聂王星  於丙军  
以栽培大豆品种‘Jackson’为试材,用萌发5 d的子叶节作外植体,接种于不同激素配比的萌发培养基和诱导培养基中,分析和比较TDZ(噻二唑苯基脲)和6-BA(6-苄基腺嘌呤)单独和复配使用时对大豆子叶节再生体系中丛生芽的诱导效应,并对其优化组合进行了筛选。结果表明:在种子萌发培养基中,0.5 mg·L-16-BA或TDZ单独使用时,前者能使丛生芽诱导率达到75.56%,诱导效应好于后者,但每个子叶节出芽数低于后者。在诱导培养基中,0.5 mg·L-16-BA和1.0 mg·L-1TDZ复配使用时,丛生芽诱导率最高且每个子叶节出芽数最多,分别为84.75%和3.04。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 杨微  覃金花  唐兴富  孙祖东  
为建立一个大豆子叶节高效再生体系用于大豆的遗传转化,以桂春豆1号、桂早2号、桂夏1号和桂夏豆2号4个大豆品种为材料,子叶节为外植体诱导丛生芽,再生完整植株。实验研究了大豆种子的消毒方法,基因型以及培养过程中植物激素的浓度等影响大豆子叶节再生的因素。结果表明在适宜的条件下,4个大豆品种的丛生芽分化率都可达到90%,丛生芽数基本都在4~6个范围内,4个大豆品种均为子叶节器官发生途径的理想基因型。最适合的种子灭菌方法是双氧水灭菌法;桂春豆1号和桂早2号的适宜芽诱导培养基为B5+6-BA 1.6 mg/L+IBA 0.2 mg/L,桂夏1号和桂夏豆2号为B5+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.2...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 张杰  李和平  廖玉才  瞿波  
为了筛选不受季节限制的小麦遗传转化受体,研究了3个小麦栽培品种在3种萌发培养基、4种诱导培养基、3种不同诱导时间和3种生根培养基下从茎尖直接诱导丛生芽的最佳条件和方法。结果表明,MB5基本培养基不添加任何激素最适于小麦成熟胚萌发;而在MB5培养基中添加1.0 mg/L TDZ和0.5 mg/L IBA,小麦茎尖丛生芽诱导率最高;单个茎尖形成丛生芽的数目,随诱导时间延长而增加,诱导时间以不超过30 d为宜;品种间的丛生芽诱导率及丛生芽形成数目没有差异;最佳生根培养基为1/2 MS基本培养基添加1.0 mg/LIBA。由丛生芽诱导再生发育形成的植株开花结实正常。这些研究结果为建立基于小麦丛生芽的再...
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 舒必超  刘卫东  杨水莲  马涛  刘瑞峰  赵坤  
以湖南野生假俭草为材料,采用幼嫩的带芽茎段为外植体诱导丛生芽,继而诱导生根,建立其植株再生体系.结果表明:用75%酒精消毒45 s,再用0.1%升汞消毒10 min,褐化率与污染率都较低,丛生芽的诱导率较高;假俭草茎段丛生芽的最佳诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.4 mg/L;在丛生芽的增殖培养中,添加1.0 mg/L 6-BA与0.2 mg/L IBA的MS培养基增殖效果最佳;1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.5 mg/L诱导丛生芽生根的效果最佳.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 顾地周  陆爽  巴春影  李媛媛  
【目的】建立烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽诱导和植株再生体系,为烈香杜鹃工厂化育苗奠定技术基础。【方法】以烈香杜鹃嫩茎为外植体,应用均匀设计法对影响烈香杜鹃腋芽丛生芽诱导和生根的各主要植物生长调节剂及其水平的作用进行探讨。【结果】适宜的烈香杜鹃嫩茎段腋芽丛生芽诱导培养基为:1/2DR+TDZ 2.80mg/L+IAA 0.01mg/L+GA31.85mg/L,诱导率为99.8%;生根培养基为:1/2DR+IAA 0.07mg/L+NAA 0.02mg/L,生根率达99.7%。在生根培养基中添加GA32.00mg/L,再生植株茎节在35d的培养周期内,每段增殖倍数平均达5以上,植株再生率为97.0%。...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李文霞  宁海龙  吕文河  李文滨  
【目的】研究影响大豆(Glycine maxL.)子叶节外植体遗传转化的因素。【方法】以农杆菌转化系统为平台,用直接筛选法和延迟筛选法确定卡那霉素的筛选方法和浓度,以GUS基因的瞬时表达计算子叶节区GUS阳性率。【结果】延迟7d进行Km选择、筛选压力为75mg·L-1时选择效果最好;菌株培养阶段和侵染浓度分别在OD600为0.6和0.5时子叶节区GUS阳性率最高;黑农35、绥农14和合丰35为易感的大豆基因型;农杆菌菌株EHA101对大豆的转化能力好于LBA4404和AGL1;共培养培养基中添加的硫醇类化合物对T-DNA的转移有极强的影响效应。【结论】本实验方法可以优化农杆菌介导的大豆子叶节转...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 刘恒蔚  牛英  周瑞阳  
为获得红麻不定芽直接诱导的最佳方案,以MS培养基为基础,以其无菌苗子叶和真叶为外植体进行对比研究.结果表明,附加3.0~3.5mg/LTDZ和0.1mg/LNAA可直接诱导子叶和真叶形成不定芽,子叶诱导效果优于真叶,不同基因型来源的材料存在差异;附加0.1mg/L6-BA和0.01mg/LNAA对不定芽增殖培养后,1/2MS培养基上附加0.05mg/LNAA可诱导生根而形成植株.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 周玥玥  陈智勇  黄丽芳  邓果特  蒋建雄  易自力  
以五节芒(Miscanthus floridulus)幼穗为外植体,建立了五节芒的离体再生体系:幼穗的最佳愈伤诱导培养基为MS+4.0 mg/L 2,4–D+0.1 mg/L 6–BA,最佳分化培养基为MS+2.0 mg/L 6–BA,最佳生根培养基为MS+1.0mg/L IAA+0.1 mg/L IBA+1.0 mg/L CCC。比较不同浓度秋水仙碱溶液对五节芒愈伤组织诱变的效果,结果显示,以1 000 mg/L秋水仙碱处理愈伤组织72 h,诱导率可达12.48%,形态特征、DNA含量和染色体核型分析表明,诱导获得的再生植株为五节芒四倍体。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 易双双  陆顺教  冷青云  王存  杨光穗  
【目的】建立茎段诱导丛生芽途径的树兰快速繁殖技术体系,为树兰种苗生产及工厂化育苗奠定基础。【方法】以树兰当年生分蘖苗的带芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究不同质量浓度6-BA、NAA和IBA组合对树兰茎段丛生芽诱导、增殖及生根的影响。【结果】不同质量浓度6-BA和NAA组合对树兰茎段丛生芽的诱导与增殖均有显著影响,树兰茎段丛生芽诱导最适宜培养基为MS+1.0Mg/L 6-BA+0.5Mg/L NAA,诱导率最高达到73.13%;增殖最适宜培养基为MS+3.0Mg/L 6-BA+1.0Mg/L NAA,增殖系数最高达到5.2。不同质量浓度NAA和IBA组合对树兰组培苗生根有显著影响,生根最...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 董永鑫  卫其巍  洪浩  黄莹  赵延晓  冯明峰  窦道龙  徐毅  陶小荣  
【目的】在中国大豆品种上建立以苹果潜隐球形病毒(apple latent spherical virus,ALSV)为载体的基因沉默体系,为中国大豆品种的基因功能和遗传育种提供一种简便、省时、易操作的技术体系。【方法】构建以农杆菌介导接种的ALSV病毒侵染性克隆载体。从大豆品种威廉姆斯82(Williams 82)中特异扩增327 bp的八氢番茄红素脱氢酶(GmPDS)基因cDNA片段,插入病毒载体pALSV2。通过农杆菌浸润法将病毒载体导入模式植物本氏烟(Nicotiana benthamiana),17 d后富集病毒粒子,摩擦接种大豆第一轮真叶,以接种病毒空载作为对照组,持续观察测试大豆植株系统叶表型,并结合逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)或荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ALSV衣壳蛋白基因(CP)和GmPDS的表达水平。【结果】ALSV﹕GmPDS接种大豆品种威廉姆斯82和南农1138-2,20 d后,前者系统叶未见白化表型,而后者系统叶出现明显的白化表型;qRT-PCR检测结果表明,发生白化的南农1138-2植株中GmPDS的表达水平显著降低,未出现白化表型的威廉姆斯82中GmPDS的表达水平没有出现显著变化。在此基础上,采用相同的方法,测试了ALSV在其他9种大豆品种中诱导GmPDS的沉默效率,发现在南农47、安豆203、祥斗4号、中黄13、山宁29、齐黄34等大豆品种上接种ALSV﹕GmPDS后植株系统叶均产生白化表型,而菏豆12、中黄311和山宁16等3个品种的GmPDS均不能诱导有效沉默。【结论】构建了农杆菌介导的ALSV病毒载体,利用本氏烟扩繁富集ALSV病毒,将提纯的病毒粒体摩擦接种大豆真叶,在多个中国大豆品种上成功建立了基因沉默体系。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 宗晓秋  张东升  黄文坤  彭焕  彭德良  
选取中国大豆品种中黄13、黑豆44和黑豆51的子叶为外植体材料,用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)K599菌株诱导3个大豆品种产生毛状根,通过β-葡聚糖苷酶(GUS)染色进行转化效率检测。结果表明:在25℃、12h/d黑暗培养条件下,黑豆44上诱导的毛状根数量最多,显著多于中黄13和黑豆51;黑豆44诱导的毛状根转化率最高,显著高于中黄13,但与黑豆51没有显著差异;光照或黑暗培养对中黄13产生毛状根的效率没有显著影响,但黑豆44和黑豆51在黑暗培养条件下子叶产生的毛状根数明显高于光照培养条件下产生的毛状根数;大豆孢囊线虫(Heterodera glycines ...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 范爱丽  孙艳  徐凌飞  梁东  邹志荣  
研究了TDZ和IBA浓度、苗态、外植体切割和接种方式及基因型对黄瓜子叶节再生体系建立的影响。结果表明,最佳芽诱导培养基为M S+0.005 m g/L TDZ+0.05 m g/L IBA;两片子叶脱离种壳且与下胚轴处于弯曲状态的子叶节再生频率最高;保留单片子叶、下胚轴纵切、切除此子叶的2/3且竖直插入为最佳切割和接种方式;农城3号为最佳基因型,每块外植体再生芽数可达1.89。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 高红兵  唐晓杰  孟庆繁  
研究了培养基中不同浓度6-BA对酸樱桃组培苗玻璃化率及内源激素含量的影响,利用酶联免疫吸附分析法测定正常苗与玻璃化苗愈伤组织和芽中IAA、GA3和ZR含量。结果表明:高浓度6-BA导致组培苗玻璃化,当培养基中6-BA浓度为0.5 mg.L-1时,组培苗未出现玻璃化苗;当培养基中6-BA浓度为3.0 mg.L-1时,组培苗玻璃化率高达95%。通过玻璃化苗和正常苗内源激素比较发现,玻璃化苗愈伤组织IAA和GA3含量明显高于正常苗愈伤组织中IAA和GA3含量,ZR含量基本相等;玻璃化苗芽中ZR含量远远低于正常苗中ZR含量,而IAA和GA3含量基本不变,高浓度6-BA导致组培苗内源激素比例失调发生玻璃...
[期刊] 林业科学  [作者] 郭长禄  陈力耕  何新华  Syed Asgar Tori  袁海英  
Embryonic axis and cotyledon of immature and mature embryos were induced as explants for embryogenesis in Ginkgo biloba. Results showed somatic embryos could be induced only through embryonic axis and cotyledon of immature embryos. MK + NAA 1 mg?L -1 + 6_BA 1 mg?L -1 was the best medium for so...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 裘珍飞  曾炳山  李湘阳  刘英  
The embryogenic callus induction and shoot regeneration were studied systematically in elite clone GL9 of Eucalyptus cultivated widely in south China.We investigated TDZ 0.02-0.05 mg·L-1 was the proper concentration.The callus induction rate was 92.9%—100%.When TDZ concentration was higher than 0.1 ...
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