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[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
任瑞芬 李泽迪 朱梦婷 刘燕 张孔英
目的】超低温保存后花粉生活力呈多种变化情况，已有研究表明活性氧（ROS）是超低温保存后花粉生活力变化的主要原因之一。因此，本研究探讨液氮冻存后花粉生活力与ROS诱导的氧化应激和细胞程序性死亡间的关系，以进一步揭示ROS在超低温保存后花粉生活力变化中的作用机制。【方法】以芍药‘粉玉奴’的花粉为材料，对比分析超低温保存不同时间长度后花粉生活力、ROS生成量、氧化应激以及细胞程序性死亡指标的变化情况。【结果】花粉超低温保存过程中，ROS成分超氧阴离子自由基（O_2·-）含量在液氮冻存1个和3个月后相对较高，过氧化氢（H_2O_2）含量随着保存时间的延长显著增加，羟自由基（·OH）含量在保存3个月后开始下降，且H_2O_2和·OH含量均与花粉生活力显著相关。其次，氧化损伤指标丙二醛（MDA）含量在保存3个月后显著升高，与花粉生活力、H_2O_2和·OH含量显著相关；细胞程序性死亡（PCD）指标caspase-3-like蛋白酶活性在液氮冻存1个月和3个月后均高于对照，细胞凋亡率在保存5个月和8个月后显著升高，且细胞凋亡率均与花粉生活力、H_2O_2和·OH含量均显著相关。此外，适宜浓度的外源抗氧化剂（抗坏血酸、谷胱甘肽）和类凋亡抑制剂（caspase-3抑制剂）显著提高了液氮冻存8个月后的花粉生活力。【结论】芍药‘粉玉奴’花粉超低温保存过程中，ROS对超低温保存后的花粉生活力产生了重要的影响，其成分H_2O_2和·OH的作用尤为突出，其诱发的氧化应激反应和细胞程序性死亡是液氮冻存后花粉生活力变化的重要原因。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李秉玲 尚晓倩 刘燕
为了探讨花粉长期保存的最佳方法,以及为芍药花粉库的建立提供依据,该文比较了冷冻保存(-20℃)和超低温保存(-196℃)芍药花粉的不同效果,检验了17个芍药品种花粉经超低温保存4年后的生活力。结果表明,超低温(-196℃)保存的花粉萌发率普遍高于冷冻保存和对照,而大部分品种花粉经冷冻保存(-20℃)4年后萌发率明显降低。离体萌发试验表明,超低温保存芍药花粉的效果因品种而异,但绝大部分品种(94.1%)花粉保存效果良好(相对保持率>50%)。初步人工授粉试验表明,超低温保存4年后的芍药花粉仍具有受精结实能力。
关键词：
芍药 花粉 超低温保存
[期刊] 华北农学报
[作者]
谭冬梅 许雪锋 李天忠 王忆 韩振海
用聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG6000)处理新疆野苹果(Malus sieversii(Ledeb)Roem.)幼苗。通过对其叶片及根系中各细胞器的超微结构分析发现,干旱胁迫能诱导新疆野苹果发生细胞程序性死亡,并具有以下特点:随着干旱处理时间的延长,根系中各细胞器形态结构发生变化的时间普遍早于叶片;同是叶片,海绵组织中各细胞器形态结构发生变化的时间早于栅栏组织;同是根系,皮层细胞中各细胞器形态结构变化的时间普遍早于中柱细胞。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
夏启中 张明菊 张献龙 郭小平
棉花悬浮细胞经高浓度细胞分裂素(2mg/LKT或4mg/LKT)处理后第4天大量死亡,培养物呈褐黑色;抽提总DNA,进行琼脂糖胶电泳,结果表明:2mg/LKT和4mg/LKT两处理中有明显的大小为140~180bp及其倍增量片段的DNA“梯”。进行PI和FDA染色显微观察可以看到:2mg/LKT处理中大部分细胞的细胞核较小,核质浓缩,呈棒形或弯月形;胞质浓缩,出现了不对称的质壁分离,且丧失了FDA染色活性。这些结果表明,由高浓度细胞分裂素处理引起的棉花悬浮细胞大规模死亡是一种细胞程序性死亡(PCD)。不同的生理状态(UCSA和BAE)和不同生长时期(指数增长期和静止期)的棉花悬浮细胞对高浓度细...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王秋举 鞠雪 罗莎 陈玉柯 董晓庆 刘洪键 张东鸣
［目的］本文旨在研究Ｌ－肉碱对氧化应激状态下胖头鱥肌肉细胞系（ｆａｔｈｅａｄ ｍｉｎｎｏｗ ｍｕｓｃＬｅ ｃｅＬＬ Ｌｉｎｅ，ｆｈｍ）细胞活力、脂质过氧化及抗氧化功能的影响。［方法］以ｆｈｍ细胞为研究对象，以ｈ＿２ｏ＿２为氧化应激因子，采用四甲基偶氮唑盐（ｍｔｔ）法测定不同浓度Ｌ－肉碱（０．００１、０．０１、０．１、０．５、１．０和５．０ ｍｍｏＬ·Ｌ～（－１））预处理６ ｈ分别对０．２和０．６ ｍｍｏＬ·Ｌ～（－１）ｈ＿２ｏ＿２诱导的细胞氧化应激活力的影响，并采用生物化学方法检测Ｌ－肉碱预处理对氧化应激ｆｈｍ细胞中脂质过氧化程度及抗氧化酶的变化。［结果］０．２和０．６ ｍｍｏＬ·Ｌ～（－１）．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈霜莹 常永健 赵艳华 张浡 刘瑜 章德明
将苹果、梨、桃、李和樱桃等树种的39个品种的花粉干燥至含水量10%～20%,直接投入液氮中(-196℃),经过一段时间保存后,再以40℃水浴快速化冻1min,然后鉴定其生活力和萌发力.结果表明,花粉的生活力没有明显变化,其离体萌发率与新鲜花粉相近.新鲜花粉含水量在60%左右,不宜用于液氮保存.花粉含水量是影响保存效果的关键因子之一,只要花粉含水量适宜,可以多次反复冷冻—化冻,生活力不受影响.此项技术可用于果树花粉的长期保存.
关键词：
超低温保存种质 花粉 果树
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
张亚利 尚晓倩 刘燕
为满足种质资源保存和交换以及杂交育种工作的需求,花粉超低温保存研究日渐兴起并逐步深入,保存材料从农作物、果树逐渐扩展到药用植物、园林植物等各类植物花粉.花粉超低温保存研究最初主要集中在保存技术方面,随着研究工作的深入和完善,花粉超低温保存机理的研究也逐渐展开,超低温保存花粉效果的评价,也从花粉染色法、离体萌发法,逐渐发展到田间杂交育种的实际应用.该文对20世纪80年代以来成功进行了花粉超低温保存研究的植物材料进行了总结,重点介绍了花粉超低温保存技术程序,同时对保存效果的评价及超低温保存机理的研究进展进行了综述.
关键词：
花粉 超低温保存 种质资源
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
乔广行 丁平 李涛 王克荣
为了验证营养体不亲和性导致细胞凋亡的假说,对栗疫病菌融合细胞基因组DNA的降解物进行了琼脂糖凝胶电泳检测,观察了融合细胞的细胞核变化,测定了融合细胞的活性氧产生、脂肪粒积累以及进行了融合细胞死活鉴定。结果表明:不同亲和群菌株的孢子混合涂板,孵育后经历萌发、细胞融合,融合细胞基因组DNA经琼脂糖凝胶电泳可以检测到DNA梯状条带,这一特征为营养体不亲和性诱导的程序性细胞死亡提供了新的证据;细胞学上可观察到不亲和性菌株融合细胞细胞核降解、活性氧产生减少、脂肪粒积累增多及融合细胞死亡,这些特征与细胞凋亡的特征相似。
关键词：
栗疫病菌 营养体不亲和 程序性细胞死亡
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王霞 邬静
以原代分离培养仔猪睾丸支持细胞为模型,经含不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、80、160μmol/L)乙酸棉酚或40μmol/L乙酸棉酚加800μmol/L的乙酰半胱氨酸(NAC)的培养基培养24 h后,检测细胞增殖率、细胞内活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性、培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞凋亡情况,研究棉酚对仔猪睾丸支持细胞的氧化应激及细胞凋亡的影响。结果显示:棉酚呈浓度依赖性抑制仔猪睾丸支持细胞增殖率,棉酚浓度大于等于10μmol/L时,细胞增殖率极显著降低;棉酚造成细胞内ROS水平显著升高、SOD活性显著降低、MDA含量升高及培养基中LDH活性升高;NAC显著抑制棉酚诱导的细胞内ROS水平升高、细胞增殖抑制及细胞凋亡。表明棉酚能诱导仔猪睾丸支持细胞凋亡,这可能与过量ROS生成而造成细胞氧化应激有关。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨彩霞 杨敏 王根林 李亚南 雷智琦 李莲
[目的]本试验旨在探究TNF-α（肿瘤坏死因子-α）诱导对小鼠乳腺上皮细胞凋亡和程序性坏死的影响。[方法]体外培养小鼠乳腺上皮细胞系（HC-11细胞）并分为四个处理组，对照组（Ctrl），TNF-α组（T），TNF-α+CHX（环己酰亚胺）组（TC），TNF-α+CHX+Z-VAD-FMK（广谱caspase家族抑制剂）组（TCZ）；细胞加药浓度为TNF-α:（20、50、100 ng·mL~(-1)）、CHX: 4 μmol·L~(-1)、Z-VAD-FMK: 20 mmol·L~(-1)。[结果]与对照组相比，100 ng·mL~(-1) TNF-α（T-100）处理12 h后细胞活力显著降低（P<0.01），而TCZ组caspase-8的mRNA水平显著降低（P<0.001），但只有TCZ组程序性坏死标志蛋白RIP3、MLKL和p-MLKL的表达量显著上升（P<0.001），TCZ组的PGAM5蛋白表达水平显著上升（P<0.01），TC组和TCZ组的Drp1的mRNA和蛋白表达水平均显著上升（P
关键词：
小鼠 乳腺上皮细胞 凋亡 程序性坏死
[期刊] 中国农业科学
[作者]
徐静 余冰 陈代文
【目的】通过考察生长猪一次性腹腔注射diquat后不同时间点的生产性能和血清氧化与抗氧化指标的变化,探明氧化应激的持续时间和血清敏感指标,建立氧化应激模型。【方法】选用DLY生长猪8头,体重(36.00±2.50)kg,随机分为2组,每组4头猪。应激组按8 mg.kg-1体重一次性腹腔注射diquat溶液,对照组腹腔注射相同剂量的灭菌生理盐水。试验期35 d,在试验第0、1、2、3、7、14、21、28、35d空腹前腔静脉采血,检测血清中抗氧化能力、抗氧化酶活力以及代谢产物。【结果】Diquat极显著降低了试验前期和全期试猪的生产性能,显著或极显著降低第7、14、21、28天血清谷胱甘肽过氧化...
关键词：
diquat 生长猪 氧化应激 模型
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
常维霞 姚小华 龙伟
为实现普通油茶花粉周年保存,对普通油茶3个无性系品种的花粉进行超低温保存研究。结果表明:花粉投放液氮前的含水量、预冻及解冻方式对超低温保存效果具有明显影响。3个品种花粉烘干(30℃)脱水2~5 h,花粉含水量达11.65%~15.70%时,超低温保存效果最佳;-26℃预冻(1 h)具有明显的预冻效果,液氮保存后花粉萌发率显著高于其他处理;超低温保存后的花粉采用38℃温水浴(3 min)快速解冻及-80℃(1 h)→-20℃(1 h)→4℃(1 h)逐级解冻,均能较好保持花粉活力。4℃低温干燥保存油茶花粉,能满足短期内(30 d)授粉的需要;超低温技术可以实现油茶花粉的周年保存,且保存一年的花粉较初始活力差异不显著。
关键词：
普通油茶 花粉 超低温保存
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李秉玲 王荷 刘燕
为解决杂交育种工作中的时空不遇,延长花粉寿命,本文对23个日本牡丹品种花粉进行了超低温保存研究。对新鲜花粉及超低温保存花粉离体萌发率测定结果表明:不同日本牡丹品种新鲜花粉生活力存在差异,23个品种中,‘大藤锦’花粉萌发率最高,达到60.89%,而‘岛大臣’最低,仅3.49%;室温条件下,日本牡丹品种花粉寿命仅15d左右,而超低温保存可以使日本牡丹品种花粉寿命至少延长至2年。经超低温保存2年,花粉仍然具有较高的萌发率,有的甚至超过保存前水平,因此超低温保存技术可用于日本牡丹品种花粉的长期保存。
关键词：
日本牡丹 花粉 萌发率 超低温保存
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
艾鹏飞 罗正荣
对柿品种‘禅寺丸’(DiospyroskakiThunb .cv .Zenjimaru)花粉进行了干燥脱水法 (Dehydration)和玻璃化法 (Vitrification)液氮超低温保存研究 ,结果表明 :0℃下硅胶干燥 8h或 (2 0± 1)℃下玻璃化液PVS2 处理4 0～ 6 0min后直接投入液氮保存 ,4 0℃解冻 70s后 ,相对存活率 (TTC检测 )和萌发率都在 90 %以上 ,且活力与保存时间长短无关。该结果为柿花粉的长期保存提供了技术支持。
关键词：
花粉 干燥法 玻璃化法 超低温保存 柿
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
刘燕 张亚利
该文对 2 6个不同类型梅花品种的花粉进行了超低温保存研究 ,检验了保存前后花粉的萌发率及授粉后的结实率 ,同时比较了花粉液氮罐 (- 1 96℃ )、冷冻室 (- 2 0℃ )及冷藏室 (5℃ ) 3种保存方法的保存效果。结果表明 :2 3个梅花品种的花粉都能实现超低温保存 ,但保存效果存在差异 ,有些品种花粉保存后离体萌发率降低 ,有些则升高。 5个品种的花粉保存 1年后 ,花粉萌发率仍保持在 34%到 73%。授粉实验表明 ,超低温保存后的花粉仍具有授粉结实能力 ,座果率高于新鲜花粉。花粉分别保存在液氮、冷藏室及冷冻室中 ,9个月后 ,冷藏室保存的花粉基本丧失萌发力 ,冷冻室保存的大部分...
关键词：
梅花 花粉 超低温 保存
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