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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
申奔龙 陈晓佳 黄小红 张伟妮
探究PUGNAc对罗非鱼肝脏N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)的抑制作用.通过建立PUGNAc对NAGase的抑制动力学模型,表明PUGNAc对NAGase的抑制是一种缓慢的、可逆的反应,IC_(50)为0.18μmol·L~(-1),抑制类型为混合性;与自由酶结合的抑制平衡常数K_I为0.110μmol·L~(-1),K_(IS)为0.827μmol·L~(-1);微观速率常数k_(+0)大于k′_(+0),表明游离酶分子比抑制剂存在下的酶—底物复合物更脆弱,从而推测底物的存在对PUGNAc抑制下的NAGase起着保护作用.
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘睿 刘亮 谢笔钧
通过采用酶抑制动力学方程的方法,研究了高粱原花青素(SPC)对小曲酒酿造中β-淀粉酶的影响。结果表明,高粱原花青素对β-淀粉酶具有明显的抑制作用。抑制的机理是通过可逆的竞争性抑制来实现的,其抑制常数Ki是1.28 mg/mL。
关键词：
高粱原花青素 β-淀粉酶 抑制动力学方程
[期刊] 西南农业学报
[作者]
朱佳杰 沈夏霜 付强 周宇 谭芸 甘西
以吉富罗非鱼为研究对象,通过对其肝脏蛋白质的提取方法、等电聚焦程序和IPG胶条pH选择这几个关键环节的优化探索,建立了吉富罗非鱼肝脏蛋白质组双向电泳技术体系。结果表明:①采用液氮研磨法比匀浆器匀浆法提取蛋白质的效果更好;②聚焦时延长除盐时间至10 h,同时升高电压至8000 V,可获得清晰的电泳图谱;③通过双向电泳检测到吉富罗非鱼肝脏的蛋白点主要分布于pH值4.0~7.0之间。该技术体系的建立为今后开展罗非鱼蛋白质组学的进一步研究奠定了基础。
关键词：
吉富罗非鱼 肝脏 蛋白质组学 双向电泳
[期刊] 中国水产科学
[作者]
杭虞杰 李学英 杨宪时 迟海 郭全友
为了探讨大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对南极磷虾(Euphausia superba)类胰蛋白酶的抑制动力学,采用邹氏不可逆抑制动力学法,测定了STI对该酶的微观速度常数。结果表明:南极磷虾类胰蛋白酶的Km和Vmax分别为0.155 mmol/L,8.44μmol/(L.min)。酶活力随着STI溶液浓度增大而减小,其IC50约为2.8μg/mL;低浓度的STI溶液对酶的抑制作用为竞争性慢可逆抑制。正向微观速度常数k+0为0.184 mmol/(L.min),逆向微观速度常数k-0为0.039 4 min-1,随着STI溶液浓度的逐渐增大,该酶最终将完全失活。本研究旨为该酶的抑制技术研究提供实验...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
马细兰 张勇 刘晓春 林浩然
选取同一批30日龄的尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)鱼苗置于水泥池中自然饲养,分别于30、60、80、110、140日龄取样测定不同发育阶段雄鱼的特定生长率。用实时荧光定量PCR方法检测雄鱼肝脏中两种生长激素受体(GHR1和GHR2)的mRNA丰度。结果表明,30～110日龄,雄鱼特定生长率呈不断上升趋势,至80～110日龄达到最高,之后开始下降;雄鱼肝脏中2种GHR基因表达的发育性变化趋势不相同,30～110日龄,GHR1mRNA表达逐渐上升,110日龄达到最高,随后开始下降,其发育性变化与特定生长率显著正相关(R=0.96,P<0.01);GHR2mRNA表达在60...
[期刊] 水产学报
[作者]
祝璟琳 季桓涛 肖炜 李大宇 邹芝英 杨弘 李庆勇 朱德兴
为探讨池塘种植鱼腥草对无乳链球菌引起吉富罗非鱼肝脏损伤修复作用研究，在养殖池塘中分别种植0%（对照组）、5%、10%、15%比例池塘面积的鱼腥草，养殖90 d后进行无乳链球菌人工感染，分别在感染后0、24、48和72 h采集肝脏，进行肝脏生化、抗氧化性能、组织病理和HSP 70表达研究。结果显示，感染后48和72 h对照组肝脏ALT和AST活力最高，种植鱼腥草各组ALT活力在感染前后均无显著性变化，感染后72 h，10%组AST活力已恢复到感染前水平。抗氧化指标显示，种植鱼腥草能减缓链球菌感染引起吉富罗非鱼肝脏T-AOC下降，显著提高肝脏中SOD、GSH-PX、CAT和 NOS等抗氧化酶的活性，增加自由基清除能力，减少脂质过氧化MDA的产生。组织病理学观察显示，对照组罗非鱼感染后48 h 肝窦明显淤血，肝索排列紊乱，肝细胞脂肪变性，而各种植鱼腥草组罗非鱼在感染后仅表现为肝细胞明显嗜酸，肝窦轻度扩张。定量PCR结果显示，每组罗非鱼肝脏HSP 70表达量在感染后都显著性升高，感染后各时间点对照组的HSP 70表达量均显著高于鱼腥草种植组。研究表明，种植鱼腥草能显著改善链球菌感染所造成的吉富罗非鱼肝脏AST和ALT上升，提高抗氧化应激能力，减轻链球菌感染引起病理损伤；吉富罗非鱼通过肝脏HSP 70高表达促进受损蛋白质的早期修复与降解，种植鱼腥草具有抗炎作用和提高鱼体抵御病原菌的能力。
[期刊] 水产学报
[作者]
吴燕燕 李来好 郝志明 岑剑伟 陈胜军 周婉君 杨贤庆 刁石强
以奥尼罗非鱼肝脏为原料,研究加热法提取超氧化物歧化酶(SOD)的工艺条件,丙酮沉淀回收酶法和HitrapTMQ FF阴离子柱纯化Cu,Zn-SOD,并对其酶学性质进行分析。结果表明加热法提取SOD时,在缓冲液中加入10mmol.L-1CuCl2,调节pH为5.6,65℃进行加热处理,可以提高SOD粗酶的稳定性和得率,其得率为57%,粗酶比活为(2580±6)U.mg-1。对酶的酶学性质研究表明纯化后SOD比活为(4895±2)U.mg-1,SDS-PAGE电泳为单一蛋白酶带,分子量为36ku,最大紫外吸收波长为265nm。该酶在pH6.0~9.0具有较好的稳定性,在75℃以下稳定,具有较好的耐...
[期刊] 水产学报
[作者]
肖调义 葛熹凯 许宝红 苏建明 章怀云
采用抑制性消减杂交技术构建了三角帆蚌肝脏瘟病感染期抑制性消减cDNA文库。经检验,差异表达基因均被富集了210倍左右,证明构建的cDNA消减文库具有很强的消减效率。PCR鉴定发现,在随机挑取的阳性克隆中,95%的克隆均含有0.2~1.0 kb的插入片段,这些片段可能是三角帆蚌瘟病病毒感染后差异表达基因的cDNA片段。测序共获得214个有效cDNA序列,分别属于8大类,共98个基因。其中细胞分裂基因2个、细胞结构与运动基因9个、代谢基因10个、信号传导基因7个、细胞防疫基因10个、基因与蛋白表达基因20个、未知功能蛋白基因26个,GenBank中找不到任何同源序列的基因14个。结果说明,构建的差...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王丽平 陆承平
【目的】评价猪链球菌感染对小鼠肝脏药物代谢酶活性的影响。【方法】120只雄性ICR小鼠,随机分为对照组和2个感染组,后者分别人工感染猪链球菌2型强毒力株HA9801和弱毒力株SS2-H,于感染不同时间测定小鼠体内肝脏药物代谢酶活性的变化。【结果】感染HA9801菌株的小鼠,细胞色素P450(CytP450)、细胞色素b5(Cytb5)、NADP-细胞色素C还原酶(NCCD)活性从第3日开始极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)降低,第10日时降至最低(NCCD于第5天时最低),第15日时活性有所增强,但仍显著低于对照组;红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性从第5日开始极显著地降低(P<0...
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
刘振勇 谢友佺 林小金
采用石蜡切片和HE染色法,对不同生存条件下的大黄鱼以及肝脏病变的大黄鱼肝组织进行组织切片,在显微镜下进行组织病理学观察,采用酸水解法测定不同生存条件下以及患肝肿大的大黄鱼肝脏的脂肪含量,了解其变化情况。以野生大黄鱼的肝组织细胞结构为参照,初步探明了小网箱养殖大黄鱼的脂肪肝、肝肿大、肝胆汁淤积、肝淤血的组织病理变化情况,讨论了大黄鱼肝脏病变的原因和病变致死原因,并提出了防治措施。
关键词：
大黄鱼 肝脏 病变 组织病理学
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘坡 李凯彬 王芳 刘春 聂湘平 吴淑勤
以暴露于β-萘黄酮(beta-Naphthoflavone,β-NF)中的剑尾鱼(Xiphophorus helleri)为研究对象,采用SMARTTM(Switching Mechanism At 5' end of RNA Transcript)技术,成功构建了剑尾鱼肝脏cDNA文库。该文库约含有4.2×107个重组子,重组效率达l00%,插入片段多在0.6～2.5kb之间,平均插入片段长度约1.3kb,扩增后文库滴度为7.0×109CFU/mL。随机挑取200个重组子进行测序检验,共得到长度大于500bp的Expression sequence tag(EST)序列187个,对所测EST...
关键词：
剑尾鱼 肝脏 cDNA文库
[期刊] 水产学报
[作者]
冯涛 郑微云 洪万树 郭祥群
在实验生态条件下 ,采用碱解旋技术检测了暴露于BaP后大弹涂鱼肝脏的DNA单链断裂程度 ,结果发现DNA单链断裂程度同时受到曝污时间和曝污浓度的影响 ,并具有一定的时间—效应和剂量—效应特征 ;污染解除后DNA单链断裂程度未明显减轻 ,表明DNA损伤的修复能力较弱。以上这些结果表明DNA单链断裂适于作为BaP暴露后DNA损伤的检测指标。
关键词：
苯并(a)芘 大弹涂鱼 DNA损伤
[期刊] 淡水渔业
[作者]
强俊 孙意岚 黄永 徐跑 杨弘 袁庆华 何杰 朱志祥 苏田平
以吉富罗非鱼（ＯｒｅＯｃｈｒＯｍｉｓ ｎｉｌＯｔｉｃｕｓ）幼鱼为研究对象，探讨添加不同剂量的几丁聚糖对吉富罗非鱼幼鱼肝脏抗氧化力、血清生化与肌肉品质的影响。选择体重为（２．９７±０．０２）ｇ的健康吉富罗非鱼３７５尾，随机分为５组，每组３个重复，每个重复２５尾鱼，分别饲喂在基础日粮中添加０％（对照组）、１％、２％、３％和４％几丁聚糖溶液（有效成分为０．６％）。养殖６３ ｄ后，测定肝脏抗氧化性能、血清生化和激素水平以及肌肉中氨基酸与脂肪酸组成。结果显示，饲料中添加１％和２％几丁聚糖能显著提高血清ｃ３、ｔ３和ＰＯ水平，降低ｌａｃ与ｔ４水平（Ｐ＜０．０５）。同时，１％和２％添加组能显著降低肝脏ｍｄａ含．．．
[期刊] 海洋渔业
[作者]
孙鹏 尹飞 彭士明 施兆鸿
测定了不同盐度(8、18、28、38、48)处理后条石鲷幼鱼肝脏中SOD、CAT、GPX和GST 4种酶活力,探讨了盐度变化对条石鲷幼鱼肝脏抗氧化酶活力的影响。当用低盐度8和18处理时,幼鱼肝脏SOD活力无显著变化(P>0.05);当处理盐度升至38时,SOD活力增加并在24 h时达到最大,其水平显著高于对照组(P
关键词：
条石鲷 盐度 抗氧化酶 氧化压力
[期刊] 海洋渔业
[作者]
王永红 曾霖 吉群 谢正丽 黄伟卿 宋炜
为探讨盐度变化对大黄鱼(Larimichthys crocea)肝脏基因转录表达的影响，将体质量为(59.68±1.32) g的大黄鱼分别在盐度25（对照组）、盐度36（高盐组）、盐度10（低盐组）的水体中暴露24 h，采用Illumina Hiseq 2500对肝脏样本进行转录组测序。结果显示，从高盐vs.对照组(H vs. C)、低盐vs.对照组(L vs. C)和高盐vs.低盐(H vs. L)中分别筛选出71个、180个和438个差异基因(DEGs)。GO (Gene Ontology)和KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)分析发现，H vs. C中的DEGs显著富集在三羧酸循环、MAPK信号通路、内质网蛋白加工和Toll样受体信号通路等；L vs. C中的DEGs显著富集在FoxO信号通路、戊糖磷酸途径、mTOR信号通路、RNA降解、P53信号通路和内质网蛋白加工等，表明大黄鱼对高盐和低盐胁迫的响应均涉及到糖类代谢、内质网应激、细胞凋亡和自噬等生理功能。H vs. L中的DEGs显著富集在内质网蛋白加工、FoxO信号通路、甘油脂代谢、糖酵解/糖异生、吞噬体和P53信号通路等，表明大黄鱼在高盐和低盐适应过程中，内质网应激、脂类代谢、糖类代谢、细胞凋亡和自噬等生理功能存在差异。研究结果可为深入研究鱼类对盐度胁迫的响应机制奠定基础。
关键词：
大黄鱼 肝脏 盐度胁迫 转录组 差异基因
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