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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 周琳  张琪  梁帅  余关林  赵善廷  许信刚  
【目的】研究新城疫病毒(New Castle Disease Virus,NDV)、康莱特注射液(Kanglaite Injection,KLT)及NDV+KLT联用治疗肝癌肿瘤过程中,癌组织的病理变化以及肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在肿瘤组织中的表达情况,探究TNF-α在抗肿瘤过程中的作用,为应用生物素治疗肿瘤提供一定的理论依据。【方法】建立小鼠H22肝癌肿瘤模型,将96只荷瘤小鼠随机均分成生理盐水对照组(0.8mL/只)、NDV治疗组(0.8mL/只)、KLT治疗组(0.5mL/只)及NDV+KLT联合治疗组共4组,分别在治疗后的4...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李梅青  王康  夏善伟  周鑫  
【目的】研究绿豆活性肽对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用,为绿豆资源的综合利用提供参考。【方法】建立H22鼠肝癌荷瘤小鼠模型,研究不同剂量(400,800和1 600 mg/kg)绿豆活性肽对小鼠H22移植性肿瘤的抑制作用及对胸腺、脾脏指数和血液生化指标的影响;采用ELISA测定瘤组织TE端粒酶活性以及Bcl2、Bax的表达量,初步探究绿豆活性肽的作用机制。【结果】绿豆活性肽对荷瘤小鼠H22肿瘤的生长有明显的抑制作用,给药剂量为1 600 mg/kg时抑制率达32.6%;绿豆活性肽能增大荷瘤小鼠胸腺指数和脾
[期刊] 中国农业科学  [作者] 杨晓萍  吴谋成  
【目的】研究油菜花粉多糖(LBPP)对荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α的诱生及其mRNA表达的影响。【方法】通过动物抑制性肿瘤法制备肿瘤模型,采用双抗体夹心ELISA法检测IL-2、TNF-α含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-2、TNF-α mRNA的表达。【结果】LBPP有明显抗肿瘤作用,200mg·kg-1高剂量组抑瘤率可达51.26%,明显优于环磷酰胺46.22%;LBPP可显著促进荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α分泌(P<0.01),高剂量组提高率分别达56.37%、105.24%、1364%和12...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 张琪  杨鸣琦  赵勇  范光丽  
【目的】运用免疫组化SP法,测定新城疫病毒(NDV)和苦马豆素(SW)联合治疗肿瘤时IL-6在肿瘤组织中的表达,探究生物因素治疗肿瘤过程中细胞因子的作用。【方法】通过建立S37肿瘤模型鼠,将48只S37肿瘤模型鼠随机分成4组,即NDV治疗组、SW治疗组、NDV联合SW治疗组和对照组,从建立肿瘤模型当日起,于第4,8,12和16天取各组肿瘤制作石蜡切片,用HE染色法和免疫组化法观察荷瘤机体中肿瘤的组织形态学变化及IL-6分布的差异。【结果】各治疗组在肿瘤病理组织学和IL-6分布上与对照组差异显著。从病理组织学变化和IL-6阳性反应的强弱可知,NDV弱毒和SW联用组的阳性反应最强,其次是NDV治疗...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 葛唯佳  赵岩  图力古尔  李伟  郜玉钢  祝洪艳  李玉  包海鹰  
[期刊] 水产学报  [作者] 宋学宏  朱茂晓  王永玲  李义  曹萍  沈振华  
采用常规石蜡切片技术和透射电镜技术,对患有肝胰腺白化症的中华绒螯蟹病变组织和细胞进行观察。发现病蟹肝胰腺、鳃、肌肉等组织细胞发生了不同程度的病变,其病理特征为肝细胞水肿、变性、坏死,细胞中脂肪颗粒锐减,线粒体水肿、嵴消失、形成空泡,内质网、溶酶体解体成小泡。鳃组织增厚,上皮细胞微绒毛排列疏松、不规则,部分线粒体嵴消失,出现膜性退化。坏死的肝细胞和鳃上皮细胞中出现细菌颗粒。肌细胞的病变主要表现为细胞核固缩,肌丝松驰、水肿、断裂、肌质网溶解形成小泡。中华绒螯蟹具有重要生理功能的肝胰腺、鳃组织发生了严重病变,使其功能损伤,不耐运输;而肌肉的松驰、肝胰腺脂肪的锐减影响了中华绒螯蟹的品质。同时,病变组织...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 魏周文  孙超  姜东凤  侯增淼  刘春伟  
【目的】探讨二十二碳六烯酸(DHA)对小鼠脂肪组织和肝脏生脂相关基因过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白-1c基因(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶基因(FAS),及脂解相关基因激素敏感脂酶基因(HSL)和甘油三酯水解酶(TGH)时序表达的影响。【方法】用不同浓度DHA(6.25和12.5 g/kg)灌胃小鼠,分别于0,1,2,4,8,16和24 h处死,取脂肪组织和肝脏,提取总RNA,半定量(semi-quantitative,SQ)RT-PCR方法检测生脂及脂解基因PPARγ、SREBP-1c、FAS,及脂解相关基因HSL和TGH的时序表达规律。【结果】脂肪组织中...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 杨彩霞  杨敏  王根林  李亚南  雷智琦  李莲  
[目的]本试验旨在探究TNF-α(肿瘤坏死因子-α)诱导对小鼠乳腺上皮细胞凋亡和程序性坏死的影响。[方法]体外培养小鼠乳腺上皮细胞系(HC-11细胞)并分为四个处理组,对照组(Ctrl),TNF-α组(T),TNF-α+CHX(环己酰亚胺)组(TC),TNF-α+CHX+Z-VAD-FMK(广谱caspase家族抑制剂)组(TCZ);细胞加药浓度为TNF-α:(20、50、100 ng·mL~(-1))、CHX: 4 μmol·L~(-1)、Z-VAD-FMK: 20 mmol·L~(-1)。[结果]与对照组相比,100 ng·mL~(-1) TNF-α(T-100)处理12 h后细胞活力显著降低(P<0.01),而TCZ组caspase-8的mRNA水平显著降低(P<0.001),但只有TCZ组程序性坏死标志蛋白RIP3、MLKL和p-MLKL的表达量显著上升(P<0.001),TCZ组的PGAM5蛋白表达水平显著上升(P<0.01),TC组和TCZ组的Drp1的mRNA和蛋白表达水平均显著上升(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 马增友  秦歌  郑浩懿  卢郑坤  张文昌  彭辉  
[目的]研究TRIM8基因在小鼠组织和早期胚胎中的表达情况及其沉默后对早期胚胎体外发育的影响。[方法]采用RT-PCR、免疫印迹分别检测TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠不同组织(心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、肌肉、子宫、卵巢和睾丸)中的表达情况,采用免疫组化技术对TRIM8在卵巢中进行定位。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫印迹法检测TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠早期胚胎(1-细胞胚胎、2-细胞胚胎、4-细胞胚胎、8-细胞胚胎、桑葚胚和囊胚)中的表达规律,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术对TRIM8在早期胚胎中进行定位。利用RNA干扰技术沉默TRIM8基因,研究该基因沉默对小鼠早期胚胎体外发育的影响。[结果]TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠不同组织中均表达,但在子宫、卵巢和睾丸中表达水平相对较高。在卵巢中,TRIM8蛋白主要定位在不同发育阶段的卵母细胞中。TRIM8基因及其编码的蛋白在早期胚胎中均有表达,但其mRNA表达水平在1-细胞到4-细胞期胚胎中的表达水平显著高于8-细胞到囊胚期胚胎。TRIM8蛋白主要定位在不同时期胚胎的胞质中。TRIM8基因沉默组的囊胚率显著低于对照组(P<0.05)。[结论]TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠各组织及早期胚胎中均有表达,主要定位在早期胚胎的胞质中;沉默TRIM8基因会显著降低囊胚发育率。TRIM8可能参与调控小鼠早期胚胎的发育进程。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 蒋宗良  张明  付强  
采用RT-PCR和原位杂交的方法检测了小鼠GSE(gonad-specific expression gene)基因在性腺中的表达特征。RT-PCR分析表明,GSEmRNA在出生后第14天的小鼠的睾丸中和刚出生小鼠的卵巢中可检测到,这时间正是生殖细胞减数分裂发生的时期;原位杂交分析的结果揭示,GSEmRNA分布于精母细胞Ⅰ(粗线期)、圆形精细胞和伸长的精细胞中,这一结果与RT-PCR分析的结果相吻合。研究结果提示,GSE与配子发生过程中的减数分裂有关。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 杜学海  曹蕊  萧鹏  李伯江  吴望军  刘红林  
为研究低氧诱导因子1α(HIF1α)及其下游基因胰岛素样生长因子2(IGF-2)和血管内皮生长因子(VEGF)在注射孕马血清促性腺激素(PMSG)(促排组)的促排卵巢与注射生理盐水(对照组)的普通卵巢组织中的mRNA转录水平,构建小鼠HIF1α基因真核表达载体,观察其转染的小鼠颗粒细胞中HIF1α基因的表达情况,以探讨HIF1α与小鼠卵泡发育的关系。用荧光定量PCR检测不同处理组织中HIF1α、VEGF及IGF-2 mRNA转录水平,免疫组化技术定位HIF1α在卵泡中的表达,基因重组技术构建HIF1α-pcDNA3.1真核表达载体并将其转染小鼠颗粒细胞,荧光定量PCR与Western blot...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 程金波  王加启  卜登攀  刘光磊  张春刚  董晓丽  魏宏阳  周凌云  刘开朗  
研究小鼠不同生理阶段以及免疫条件下,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化。选择120只健康昆明小白鼠,于分娩后4 d进行如下制剂处理:脂肪酶蛋白(Lipase)、空免疫刺激复合物(ISCOM)和Lipase。于分娩后8和12 d(即注射后4和8 d)用间接ELISA法测定乳中和血清中的特异性IgG含量,用Real Time PCR检测小鼠乳腺中乳铁蛋白基因的相对表达量。另外,正常生理状态乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量的变化分别是在分娩后1、4、8和12 d进行检测。结果表明,正常状态下,小鼠分娩后1 d时,乳腺内乳铁蛋白基因mRNA表达量相对较高,而在分娩后4、8和12 d时较低;免疫条件...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘笑然  李冬冬  钟友刚  史雅然  张超  张松  刘琳  高建明  
【目的】揭示小鼠卵泡膜细胞成熟过程中DNA甲基转移酶(Dnmts)表达的变化,并初步探讨其可能的机制。【方法】对新生昆明白小鼠第3、5及8天(days post parturition,dpp3、dpp5和dpp8)的卵巢进行切片,经H.E染色,分别观察原始、初级、次级卵泡膜细胞的形成情况,统计各级卵泡的比例并对卵泡外缘的膜细胞进行计数;半定量PCR检测成熟膜细胞特异性表达基因CYP17A1及Dnmts转录水平在dpp3、dpp5、dpp8卵巢中的变化;免疫组化观察Dnmt1蛋白在dpp3、dpp5、dpp8小鼠卵巢中的分布情况。【结果】小鼠dpp3卵巢中的初级卵泡外缘存在"梭形细胞";随出生...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 贾利云  周宏超  李文献  曹力  司丽芳  范光丽  
为了探讨流产大鼠下丘脑核团肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)的分布及变化,将12只孕SD大鼠随机分为流产组和妊娠组。流产组在妊娠第10,11天灌服米非司酮(RU486)3.75 mg/kg,妊娠组在妊娠第10,11天灌服等量生理盐水,所有大鼠均于妊娠第13天灌注取材。采用免疫组织化学SP法,对各组大鼠下丘脑TNF-α阳性细胞进行观察,探讨TNF-α在流产大鼠下丘脑的分布及变化。结果表明,妊娠组和流产组大鼠下丘脑视前大细胞核、视上核、室旁核、下丘脑室周核、弓状核均有TNF-α阳性细胞;与妊娠组相比,流产组大鼠各核团阳性细胞数量均极显著增加(P<0...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘子涵   滕亚迪   马梅香   吴俞霖   安礼友  
为探索囊胚孵化发育中关键基因的表达规律、进一步解析妊娠识别机制,以小鼠囊胚为模型,对孵化进程中不同时期的囊胚进行转录组分析,并对关键基因表达量进行qPCR检测,对关键蛋白表达模式进行免疫荧光染色。转录组分析发现小鼠囊胚从扩张、孵化到完成孵化的孵化过程,差异基因表达呈2种调控模式,对调控模式中的基因集进行GO分析、KEGG分析,发现其涉及免疫与炎症、细胞分化、凋亡过程等生物过程。qPCR结果显示Ptgs1、Lyz2、Il-1α、Cfb、Ccl9表达上调,Cd36表达下调,结果与转录组分析一致。免疫荧光染色分析发现Plac1、Cdx2、C3在小鼠囊胚孵化过程中表达下调,Lyz2、Il-1β则表达上调。以上研究结果表明小鼠囊胚在孵化进程中,基因表达呈特定的分化动态,异常基因表达将导致孵化停滞。
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