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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵娟 沈佳 李海梅 娄群峰 李季 陈劲枫
[目的]MTG(Mito Tracker Green)是一种线粒体特异绿色荧光探针,但是目前还没有研究将MTG应用于细胞的树脂半薄切片中线粒体的荧光染色。分子生物学研究证明黄瓜线粒体是父系遗传但是还没有在细胞学观察中得到进一步证实,因此我们选择MTG和DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚)2种染料建立适用于黄瓜花粉细胞的树脂半薄切片荧光双染色技术。[方法]树脂半薄切片厚度为0.3μm,切片首先经20 nmol·L-1的MTG染色液处理30 min,然后用0.1μg·m L-1的DAPI溶液染色6 min,即可在荧光显微镜下清楚地显示出线粒体结构及DNA的存在情况。[结果]观察显示:黄瓜贴壁...
[期刊] 华北农学报
[作者]
栾生 于元杰 张玉喜 丁斌
将λDNA导入中国春后,在当代花粉母细胞(PMC)减数分裂过程中,观察到了单价体、染色体落后、染色体桥、微核、细胞多极分裂等异常现象,发生异常现象的PMC约占观察总PMC的25 54%。这些染色体异常可能是异源DNA整合到受体染色体,进行染色体重排所引起的复杂细胞学反应。后代植株在茎秆硬度、株高,穗长、穗形、小穗数、穗粒数、麦芒有无、结实率、成熟期等形态性状方面发生了明显的变异。发生变异的可能机制是异源遗传物质进入细胞核以后,通过重排整合到了受体的染色体上,从而激活受体本身的一些沉默基因,或者抑制了一些基因的表达;导入的异源基因直接表达,改变了受体后代的表现型;异源DNA导入受体后引起了染色体...
关键词：
中国春 花粉母细胞 减数分裂 异常现象
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李凤兰 张志毅
用细胞荧光测定方法测量经秋水仙碱处理诱导的未减数成熟花粉中营养核和生殖核DNA相对含量,并以正常的花粉为对照.测定结果表明:未减数的大花粉中核DNA含量是正常花粉的二倍,它确实是一种二倍体花粉.
关键词：
未减数2n花粉 DNA含量 细胞荧光测定
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
鲍大鹏 王南 谭琦 潘迎捷
运用荧光染色方法对 4株不同地域来源的柱状田头菇子实体的担子和担孢子进行了观察。结果显示 ,来自欧洲希腊的Ag8、中国四川省的Ag10和台湾省的AgT菌株的有性繁殖结构特征是 4孢双核 ;而来自贵州省的Ag9菌株的有性繁殖结构特征是双孢 4核。这种 4核现象首次在蕈菌中观察到
关键词：
柱状田头菇 担子 担孢子 荧光染色
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张国军 王高学 潘厚军 石存斌 吴淑勤
研究了酸性α-醋酸萘酯酶染色法在鳜细胞免疫水平检测中应用的可行性。用不同比重的淋巴细胞分离液对鳜外周血中的淋巴细胞进行分离,结果表明比重为1.080的分离液可最大程度地将鳜外周血中的淋巴细胞分离出来。用酸性α-醋酸萘酯酶染色法对分离出的淋巴细胞进行染色,结果显示最佳的染色条件为在pH6.0~6.5的孵育液中37℃孵育90 m in,然后2%甲基绿37℃复染10 m in,酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞胞核被染成绿色而胞浆被染成红色,阴性细胞胞核和胞浆都被绿染。对正常未免疫鳜与嗜水气单胞菌脂多糖和鳜病毒主要衣壳蛋白免疫一周后的鳜外周血淋巴细胞染色计数,结果酸性α-醋酸萘酯酶阳性细胞所占的比例分别为1...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王瑞庆 马书尚 张继澍
【目的】建立一种可靠、易于推广的科学判断苹果成熟度的方法,用于指导苹果规范采收。【方法】以"嘎拉"、"秦冠"和"富士"苹果为试材,于其成熟期内每周采样1次,测定果实生理指标,并将果实横切后用碘液染色,选取有代表性的苹果染色切面照相。【结果】随着果实的成熟,其硬度下降,可溶性固形物含量(SSC)升高,可滴定酸含量(TA)呈下降趋势,着色率和淀粉指数(SI)升高,后期发生乙烯跃变。根据果实切面淀粉染色程度由深至浅分为8级,制作了3个苹果品种的淀粉染色图谱,依照该图谱,"嘎拉"、"秦冠"和"富士"苹果分别在淀粉指数为4.5,6.0和7.7时,达到园艺成熟度,此时为适宜的采收期。【结论】苹果果实的淀粉...
关键词：
苹果 淀粉染色 成熟度
[期刊] 林业科学
[作者]
王玉梅 李懋学 尤瑞麟
由于雌雄异株植物银杏的种子及幼苗无法区分性别 ,因而在研究其性别时不能用传统的种子萌发取根的方法来进行染色体制片 ,而从雌、雄成株上取根也不切实可行。为解决该问题 ,本文以银杏的幼小花药、叶、胚珠以及小孢子、雌配子体游离核为材料 ,主要采用放线菌酮 (Cycloheximide,1 0 0mg/kg)作预处理药物 ,常规制片均得到了优良的染色体标本。
关键词：
银杏 放线菌酮 染色体
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李代丽 商静 田菊 宋连君 刘春和 李迎春 康向阳 王君
【目的】本研究通过分析青黑杨杂种三倍体的花粉母细胞减数分裂特征和配子变异规律,为进一步利用三倍体种质作为中介材料进行杨树染色体工程育种奠定基础。【方法】本研究以雌配子染色体加倍来源的‘哲引3号杨’ב北京杨’杂种三倍体WT-21及杂种二倍体WD-2雄株为材料,基于醋酸洋红染色压片观察,比较分析了两者花粉母细胞减数分裂染色体行为及花粉形态变异。【结果】(1)无论是三倍体杂种WT-21还是二倍体杂种WD-2,其花粉母细胞减数分裂染色体行为均非常丰富,存在高频率的染色体提前分离、落后染色体、微核等异常现象,反映了亲本基因组间较强的异质性。(2)WT-21和WD-2花粉母细胞减数第二次分裂过程均存在平行纺锤体、融合纺锤体、三极纺锤体等异常定向,而且在WT-21中还发生胞质提前分裂,共同导致减数分裂产物中二分体、三分体等的产生。(3)三倍体WT-21的花粉空瘪率达44.55%,高于二倍体WD-2;WT-21饱满花粉的直径显著大于WD-2,从花粉直径分布可推测出WT-21能产生少量未减数花粉;WT-21的花粉生活力为(1.08±0.44)%,显著低于二倍体WD-2(28.67%±2.04%)。【结论】由于倍性效应和杂合性的双重影响,青黑杨杂种三倍体的花粉母细胞减数分裂存在复杂的染色体行为,并对配子发育造成影响;利用三倍体的花粉进行授粉,可能获得非整倍体和四倍体后代,为杨树染色体操作奠定基础。
关键词：
杨树 异源三倍体 减数分裂 花粉
[期刊] 海洋渔业
[作者]
常晓晴 王元 英娜 李楠英 黄倞 李新苍 周俊芳 房文红
病理检测是一种诊断病原及观察机体组织病理变化的重要方法,特殊染色是在病变组织中寻找病原体的前提手段,良好的染色有助于将病原体与组织区别,从而增加病原在组织切片中的检出率。为筛选出一种适用于虾肝肠胞虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)病理切片检测的最佳染色方法,使用苏木精-伊红(HE)染色法、Masson染色法、爱显蓝-雪夫(AB-PAS)染色法、甲苯胺蓝(TB)染色法、伟郝夫范吉森(EVG)染色法、劳克坚牢蓝(LFB)染色法、天狼猩红(Sirius red)染色和普鲁士蓝(PB)等8种染色方法对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)感染了虾肝肠胞虫的肝胰腺进行组织病理切片染色,并结合对EHP检出率的统计分析,比较了这些染色方法的优缺点。结果表明:HE染色法、AB-PAS染色法、TB染色法、EVG染色法、天狼猩红Sirius red染色法和PB染色法对孢子的染色效果较差,与背景颜色对比不明显,单个视野检出率较低; LFB染色法虽然使孢子易被识别,但是有孢子丢失现象,且组织染色效果差; Masson染色结果显示孢子呈现品红色,与组织颜色对比鲜明,孢子颗粒清晰可见,对组织细胞结构染色效果较好,且检出率也最高。综合分析染色效果及检出率,Masson染色法是一种非常适用于组织内的虾肝肠胞虫孢子染色的方法,本研究为微孢子虫病的组织病理研究提供一种有效的基础手段。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈龙正 娄群峰 张晓青 钱春桃 马云飞 陈劲枫
研究了野生种Cucum is hystrix(2n=2x=24)与栽培黄瓜C.sativusL.(2n=2x=14)种间杂种F1(2n=2x=19)及其双二倍体(2n=4x=38)自交S1~S4代的细胞遗传学特征及花粉育性。结果表明:减数分裂中期Ⅰ,杂种F1代花粉母细胞(pollen mother cell,PMC)染色体主要以单价体存在,染色体构型为:16.75Ⅰ+0.5Ⅱ+0.25Ⅲ+0.13Ⅳ;双二倍体染色体构型以二价体为主,伴随着自交,平均每个PMC所含二价体比例逐渐增加,非二价体配对比例减少。四分体时期,F1代不能形成正常的四分孢子,主要以多分孢子形态存在;双二倍体以四分孢子为主,并...
关键词：
甜瓜属 种间杂交 细胞遗传学 花粉育性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
敬晓棋 雷安民 屈雷 窦忠英
【目的】通过对正常受精胚胎、山羊同克隆胚胎(山羊去核卵与布尔山羊耳皮肤成纤维细胞重组)以及牛-山羊异种克隆胚胎(山羊去核卵与布尔山羊耳皮肤成纤维细胞重组)中线粒体超微结构的观察与比对,从亚细胞水平揭示异种克隆胚胎出现异常的原因,为异种克隆技术的进一步研究提供新思路。【方法】利用透射电镜分别对山羊正常受精胚胎、山羊同种克隆胚胎及牛-山羊异种克隆胚胎的原核、2-细胞、4-细胞、8-细胞及桑椹胚阶段的早期胚胎进行线粒体超微结构观察。【结果】山羊自然受精胚胎、山羊同种克隆胚胎的线粒体均为帽状,随着胚胎的发育,线粒体由电子密度高、嵴少的未成熟状态发育为电子密度低、嵴丰富的成熟线粒体,而牛-山羊异种克隆胚...
关键词：
牛 山羊 异种克隆 超微结构 线粒体
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘焰 吴建国 肖成汉
对金银花花粉母细胞减数分裂的研究表明，细线期染色体呈典型的花束状排列。粗线期染色体上的染色粒粗大，非常明显。特别是在双线期一些二价体的２个同源染色体的一定对应位置上，出现向两侧伸出的深染突状结构，其直到终变期早期才消失。第一次减数分裂后，并没有进行胞质分裂，直到第二次减数分裂后才进行胞质分裂，即为同时型分裂
关键词：
金银花 花粉母细胞 减数分裂
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
杜玉娟 程志号 王沫 蔡明历 郝大翠 刘焰
应用压片法对药用植物半枝莲的花粉母细胞减数分裂过程和核型进行了研究,结果表明:半枝莲绝大多数花粉母细胞减数分裂过程中染色体的行为正常,终变期可形成13个二价体,其减数分裂为同时型;花粉粒育性为98.4%;半支莲的染色体数目为2n=2x=26,核型公式为K(2n)=2x=26=20m+4sm+2st,染色体长度范围为1.49~4.24μm,染色体相对长度组成为2n=8S+8M1+4M2+6L,其核型为"2B"型,从染色体水平证明半枝莲在系统演化上属于较进化的种类。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张明凤 曾错 陈寅山 赵云龙
取隆线溞[Daphnia(Ctenodaphnia)carinata]孤雌溞的生殖腺细胞进行染色体数量和核型分析,得到隆线溞染色体数目为n=10,2n=20,其核型公式为2n=20=6M+4SM。隆线溞染色体的数目与栉溞亚属[Daphnia(Ctenodaphnia)]中大多数种类一致,进一步验证了隆线溞的分类地位。在此基础上,取隆线溞孤雌溞的卵子(简称夏卵)、两性雌溞的卵子(简称冬卵)及雄溞的生殖腺,利用节肢动物染色体压片的方法,比较观察3种生殖状态的溞体在生殖细胞成熟分裂过程中染色体的组型变化。结果表明:隆线溞孤雌溞的卵子不需交配直接排入孵育囊,只经历1次成熟分裂,然后胚胎开始卵裂。两性雌...
关键词：
隆线溞 生殖细胞 染色体 组型
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵宝存 葛荣朝 沈银柱 黄占景
细胞质雄性不育在植物界普遍存在,其不育机理一直是人们研究的热点。采用花粉管通道法,利用T型细胞质雄性不育保持系75 3369B线粒体的基因文库,选取其中所载外源片段较大的重组子转化T型不育系小麦75 3369A,结果重组子ME252和ME317的转化后代变成可育,表明线粒体的部分片段可以使细胞质雄性不育系的育性发生转变。
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