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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孙健红 赵慧英 苏正元 尹宝英 张涌
应用免疫组织化学SP法检测γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)在不同生殖周期奶山羊卵巢中的表达情况,探讨IFN-γ的变化规律及其与生殖的关系。结果显示,在间情期三级卵泡颗粒细胞胞膜、发情期三级卵泡和成熟卵泡颗粒细胞、妊娠期卵泡颗粒细胞、妊娠7周粒黄体细胞、妊娠12,16和20周膜黄体细胞胞核中均有IFN-γ的表达;在三级卵泡和成熟卵泡的卵泡液中也有IFN-γ的表达;妊娠12,16和20周粒黄体细胞上IFN-γ表达量很低。IFN-γ可能在不同类型的细胞上发挥着不同的作用。
关键词：
山羊 IFN-γ 卵巢 颗粒细胞 黄体
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
何书海 赵慧英 乐涛 曾伟伟 李燕丽 周旭 张发
为了探索干扰素-γ受体(IFN-γR)和雌激素受体(ER)在大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中的相互关系,用免疫组化Max Vision双标法,对正常成年雌性SD大鼠下丘脑、垂体、卵巢中IFN-γR和ER共表达情况及分布特点进行了研究。结果表明,IFN-γR和ER双标记阳性细胞广泛存在于大鼠下丘脑多个核团中,并且也分布在垂体和卵巢组织中;IFN-γR阳性产物主要存在于细胞质中,少数为全细胞着色;ER阳性产物主要存在于整个细胞中,部分为核表达。推测γ-干扰素(IFN-γ)和雌激素在大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中,以其各自的受体为介导进行两种物质间的信息传递,以此共同参与机体的神经免疫内分泌调节。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张磊 王燕燕 周占琴 李广 付明哲 张锁良 尹海科 张胜刚 任宝华
【目的】探讨卵巢摘除对母山羊产肉性能,血清中生长激素(growth hormone,GH)水平以及背最长肌、股二头肌、肝脏、脂肪组织中生长激素受体基因(growth hormone receptor,GHR)表达的影响,揭示摘除母山羊卵巢提高其育肥效果的原因。【方法】将体重相近的5月龄布尔山羊杂种(布尔山羊♂×关中奶山羊♀)母羊40只作为研究对象。试验开始前一个月,对所有羊只进行驱虫和防疫工作。试验开始时将母羊随机分为处理组和对照组,每组20只,摘除处理组母羊的卵巢,对照组不摘除。在试验的第0,10,20,30,40和50天早晨8:00对所有试验羊进行空腹采血,立即分离血清,采用羊生长激素酶联...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王维民 胡庭溪 李发弟 马友记 樊红樱 潘香羽
【目的】分离鉴定绵羊视黄酸受体-γ(Retinoic acid receptor gamma,RARG)基因,分析该基因的分子特征,研究其在发情周期不同阶段卵巢中的表达差异。【方法】选取年龄和体况相近、健康的甘肃高山细毛羊周岁母羊8只,通过同期发情处理,根据卵巢生理状态,将其分为两组:黄体期组和卵泡期组,各4只,屠宰后,采集卵巢组织,以周岁母羊卵巢组织RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增绵羊RARG基因并克隆到pMD18-T载体中进行测序验证。利用ORF Finder和DNAStar等生物信息学软件分析绵羊RARG基因的理化性质、同源性和预测结构域和功能。利用Q-PCR技术,检测绵羊RARG...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
曹冶 赵素君 谢晶 王秋实 廖党金
【目的】本研究旨在搞清楚金堂黑山羊FSH信号调节机制的作用模式。【方法】将10只生殖周期相同的健康空怀的金堂黑山羊成年母羊随机分成2组,一组为对照组,一组为试验组。在发情后的第2天对试验组金堂黑山羊进行FSH肌肉注射100IU,并在注射24 h后,摘取金堂黑山羊的卵巢;对照组发情后的第3天摘取卵巢。分别提取它们的总RNA,进行表达谱测序。【结果】经测序分析:对照组和试验组分别得到有效序列30 906 038和27 763 272条;经统计分析后,得到归一化序列30 216 946和27 124882条,与
关键词：
金堂黑山羊 FSH信号 卵巢 基因表达谱
[期刊] 中国农业科学
[作者]
耿建军 郭青云 庞亚妙 白俊明 贺俊平
【目的】研究生长分化因子9(growth differentiation facter9,GDF9)的潜在靶蛋白Claudin-11在成年羊驼卵巢中的表达与定位,探索Claudin-11对促进卵泡发育、调节排卵的作用机理。【方法】以成年雌性羊驼为研究对象,用RT-PCR技术分析潜在靶蛋白Claudin-11在成年羊驼卵巢中的表达,并使用实时荧光定量PCR技术分析其相对表达量,采用免疫组织化学法和western blotting法对Claudin-11在成年羊驼卵巢中的表达进行定位分析。【结果】荧光定量PCR结果显示,Claudin-11在羊驼卵巢的初级卵泡中弱表达于次级卵泡;westernbl...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
贾振伟
C型尿钠肽(C-type natriuretic peptide,Cnp)为尿钠肽家族成员之一,广泛分布于动物大脑、肾脏、心脏及血管等组织,具有维持心血管系统功能稳态、调控细胞增殖及促进骨骼生长等功能。普遍认为哺乳动物有3种钠尿肽受体(Natriuretic peptide receptor,NPR):NPR1,NPR2和NPR3。Cnp主要通过结合NPR2受体激活下游信号通路,发挥生物学作用。Cnp信号传导通路的组成成分主要包括:配体(Cnp)、跨膜受体(NPR2)及cGMP等。当Cnp分子与跨膜受体NPR2结合后,使受体的激酶同型区域(kinase homology domain,KHD)...
关键词：
C型尿钠肽 动物卵巢 表达 繁殖机能
[期刊] 淡水渔业
[作者]
祝远奎 陈鸿禄 魏怡飞 王卫民
foxl2是性腺分化、发育和维持等发育过程的转录调节因子，在一些哺乳动物和鱼类的卵巢发育中发挥了重要作用。本研究比较分析了性成熟前后罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)foxl2基因在肝胰腺与卵巢中的表达，并利用RNA干扰技术沉默MrFoxl2(M.rosenbergii foxl2)基因后分析其在卵巢成熟过程中的功能。荧光定量结果显示，MrFoxl2在卵巢组织中高表达，并且性成熟后MrFoxl2在卵巢中的表达较性成熟前显著提高。在注射MrFoxl2-dsRNA后MrFoxl2基因的表达显著下降，并且使用1μg/g的注射剂量对MrFoxl2基因的敲降效果最佳。此外，MrFoxl2基因沉默后，生殖相关基因VG与EcR的表达显著下调，CatL基因表达显著上调。研究结果表明，MrFoxl2在罗氏沼虾卵巢成熟过程中可能发挥了重要作用。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘超 于萌 朱海鲸 李明昭 华进联
【目的】用两种方法构建miR-34c的慢病毒表达载体,并包装成慢病毒颗粒,为经济、高效的进行miR-34c超表达提供方案,为进一步研究miR-34c的作用奠定基础。【方法】从小鼠基因组中扩增miR-34c前体,分别插入pLL3.7的CMV启动子起始的GFP之后或U6启动子后,构建成载体pLL3.7-CMV-34c及pLL3.7-U6-34c。将重组慢病毒载体和包装质粒混合物转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,测定病毒滴度。感染293T细胞与关中奶山羊雄性生殖干细胞,用293T细胞与奶山羊雄性生殖干细胞的GFP表达程度测定转染效率,用定量PCR方法测定miR-34c的表达效率。【结果】...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘淼 温海深 何峰 李吉方 胡建 张远青 马瑞芹 母伟杰 祁保霞
采用半定量PCR的方法,分别从时空表达、温度应激调控和血清雌二醇(Estradiol-17β,E2)水平3个方面,共同研究雌性黄颡鱼Sox9基因的功能。结果表明,Sox9a1基因在雌性黄颡鱼各组织中存在广泛的表达,而Sox9a2则在脑和卵巢中有高表达(脑>卵巢),胃中表达微弱。在卵巢年周期发育中,卵巢中Sox9a1在Ⅲ期时达到高峰,Sox9a2则在Ⅴ期时达到峰值;脑中Sox9a1和Sox9a2表达的最大值均在Ⅱ期,后随着卵巢的发育表达水平显著下降。在热应激调控试验中,卵巢中Sox9a1虽然对热应激存在响应,但并没有出现E2相一致的变化趋势,而Sox9a2的变化趋势与血浆中E2相同。虽然脑中So...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王璐 刘红改 于得水 李晶 刘慧 赵慧英
【目的】探讨Ｇ蛋白耦联雌激素受体（Ｇ－ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｏｕｐｌｅｄ ｅｓｔｒｏＧｅｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，Ｇｐｅｒ）激动剂对卵巢表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ Ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｅＧｆｒ）表达的影响，为阐明Ｇｐｅｒ和ｅＧｆｒ在卵巢功能维持中的作用奠定基础。【方法】取间情期小鼠，将其分为４０，２００，１ ０００ｎＧ／只Ｇ－１腹腔注射组和对照组（腹腔注射等体积生理盐水），每组２０只，各组小鼠进行相应的处理。注射Ｇ－１后，依次取发情前期、发情期、发情后期和间情期小鼠各５只，脱颈处死，迅速取出卵巢，采用免疫组织化学ｓｐ法和实时定量ｒｔ－ｐｃｒ法，研究不同剂量Ｇｐｅｒ激．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
宁红梅 雷治海 张文龙 苏娟 贾翠萍 宋捷 贾晓庆
选取苏钟种母猪16头,在第2个发情期后,按发情前期、发情期、发情后期和间情期随机分成4组。用RT-PCR检测苏钟猪发情周期不同时期preproorexin和orexin 1受体(OX1R) m RNA在下丘脑-垂体-卵巢轴中的表达。结果显示:发情周期不同时期preproorexin m RNA在下丘脑、垂体和卵巢中变化趋势一致,preproorexin m RNA在猪的发情前期表达最高,随后其表达量开始下降,在发情后期其表达最少,在间情期时又开始上升。下丘脑中OX1R m RNA在发情前期开始上升,在发情后期达到最高,随后在间情期又开始下降。垂体和卵巢中OX1 R m RNA的变化与下丘脑中O...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
万露 彭方 张磊 周占琴 谢东淇 白前前 鲍文 张爱平 袁生宇
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
庞训胜 王子玉 应诗家 张艳丽 闫益波 吴勇聪 孟立 王锋
为了从单卵泡水平建立非闭锁大小卵泡颗粒细胞基因表达的消减文库,选择繁殖性能正常、空怀高繁殖力黄淮山羊2只,以氯前列烯醇处理40h后取卵巢,计数卵泡并测量卵泡直径,钝性分离采集卵泡颗粒细胞,置于液氮内保存,取样后的卵泡部分组织采用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行闭锁鉴定。选择直径6和4mm非闭锁卵泡,提取颗粒细胞mRNA,扩增cDNA,监测抑制消减杂交及其文库构建的试验环节。结果表明:消减文库的阳性克隆测序成功率100%,从正向文库中随机挑取96个克隆进行差异表达的筛选,发现12个全新表达序列标签;应用RT-PCR对已知序列的抑制素βA亚基基因(INHBA)和谷胱甘肽S-转移酶A1基因(GS...
关键词：
山羊 卵巢 颗粒细胞 基因表达 消减文库
[期刊] 中国农业科学
[作者]
娜日苏 刘广 向阳 赵海林 吴亭 赵金红 李凡 黄选洋 孙晓卫 郑姣 张家骅
【目的】探讨山羊卵巢中富集的miR-100及预测的靶基因与山羊卵巢功能及卵泡发育的潜在关系,为山羊繁殖机理研究提供数据。【方法】以山羊卵巢组织为材料,通过miRNA的分离、克隆及测序得到山羊卵巢中表达的miR-100,采用RT-qPCR进行表达检测,用生物信息学方法预测miR-100的靶基因及其功能。【结果】①山羊卵巢的测序结果中,一段成熟体为21nt的序列与果蝇dan-miR-100高度同源,将其命名为chi-miR-100f-5p,其前体位于基因组负(-)链上,长度为59 bp,定位于山羊CM000899.1:33 997 894—33 997 914序列;②chi-miR-100f-5p...
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