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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王 颖 朱彤霞
采用201强碱性阳离子粉末树脂为净化介质,以萘二醛(NDA)为衍生试剂进行腐马素(fumonisinB1)FB1的 HPLC检测。方法回收率平均为 92.3%,仪器检测限为 9.7×10-11g,方法检测限为 60ng·g-1。该方法灵敏度高,适于低含量样品中FB1的定性及定量检测。共检测了23份林县井头村玉米样品(19份口粮玉米和4份霉玉米),均证实受到了镰刀菌的严重侵染。经 HPLC检测,只在 2份口粮玉米中检出了FB1,其污染水平皆在121 ng·g-1和 2 560 ng·g-1范围内,阳性率分别为10.5%和 50.0%。此外,还检测了由口粮玉米中分出的镰刀菌的培养物共9份,阳性率为...
关键词：
高效液相色谱(HPLC) 腐马素FB1
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王 颖 朱彤霞
经1994-1996连续3年调查食管癌高发区林县井头村口粮玉米样品的真茵区系发现,镰刀菌属、青霉属、交链孢霉属、芽枝霉属、曲霉属及毛霉属是当地常见的玉米污染真菌类群。其中镰刀菌属真菌的污染最为严重,并以串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)和F.proliferatum为主。3年间,口粮玉米中镰刀菌属的污染程度虽有逐年下降的趋势,但其污染水平在常见的真菌中为最高(>50%),且贮藏过程进一步加重了镰刀菌对玉米的污染。此外,通过病区和对照区北京的比较还发现,两地间玉米样品的真菌区系分析差异不显著。
关键词：
食管癌 真菌区系分析 镰刀菌
[期刊] 中国卫生经济
[作者]
周英智 尹畅 王鲁军 雷复华 刁玉涛 马清 崔佳 李会庆 周瑞雪 孟庆跃
目的:分析肥城市自愿参加碘染色内镜食管疾病普查和全人群高应答率普查两类资料,为进一步探讨在食管癌高发区开展碘染色内镜普查可滚动持续发展的模式提供基础。方法:自愿参加普查组普查免费、治疗自费,高应答率普查组普查费和治疗费用全免,分析两组人群的食管疾病检出率和成本效益比率。结果:自愿参加普查组总应答率22.10%,高应答率普查组为79.99%;自愿参加普查组食管疾病的检出率显著高于高应答率普查组,自愿参加普查组的成本效益比率为1.0∶5.7,高应答率普查组为1.0∶1.43。结论:自愿参加普查组成本效益比率远远高于高应答率普查组,如何筛选需要进行内镜普查的高危险性个体是需要解决的关键问题。
关键词：
食管癌 内镜普查 效益评估 高发区
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孙秀兰 张银志 汤坚 朱瑜
为了扩大金标免疫层析试条(GICA)检测食品和饲料中黄曲霉毒素B1的应用范围,研究了样品基质对试剂条信号强度的影响,探讨了GICA测定饲料和各种发酵类食品样品时,提取液中NaCl、金属离子(Fe3+,Cu2+,Pb2+,As3+)和脂肪含量对检测结果的影响,并研究了消除影响的方法。结果表明,3种阴性样品(大米、玉米和小麦粉)均存在不同程度的非特异性干扰,大米的影响最小,其次为玉米和小麦粉,大米的最佳稀释倍数为10倍,玉米和小麦粉为30倍;随NaCl质量浓度增加,检测结果有偏向假阳性的趋势;4种金属离子对检测结果的影响程度依次为Fe3+>Cu2+>Pb2+>As3+;随着样品中油脂含量的增高,用...
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
章先 王继璇 程高钏 李可 张晓峰 孙孟娇 程昌勇 宋厚辉
【目的】真菌毒素可污染农产品和动物源性食品，其中黄曲霉毒素B_1(AFB_1)毒性强、危害大，建立AFB_1快速、高灵敏和便捷的检测方法对于监测相关产品中AFB_1污染水平，保障人和动物健康均具有重要意义。本研究基于侧向层析技术原理，采用竞争模式，优化建立免疫层析检测方法，以实现AFB_1的快速定性检测和定量分析。【方法】通过比较分析不同粒径金颗粒标记抗体效果，优化确定免疫层析各组分材料类型、相关缓冲液配方及最佳使用质量浓度，建立AFB_1高灵敏定性定量免疫层析检测方法。【结果】优化建立的AFB_1免疫层析检测法在实际样本中的定性和定量检测限分别为2.5和0.5μg·kg~(-1)，灵敏度高、特异性强，与其他常见真菌毒素无交叉反应，加标回收实验结果显示：该方法准确稳定，且对AFB_1天然污染样本的定量检测结果与商品化试剂盒及LC-MS/MS一致性较好。【结论】本研究制备的免疫层析检测法可用于样本中AFB_1污染的快速定性检测与定量分析，适合缺乏实验条件的基层检验检疫机构和农产品加工企业对大量样本进行快速筛查，样本检测结果疑似阳性再采用仪器法进行确认，可降低检测成本，提升检测效率，同时为建立其他病原微生物免疫层析检测方法提供参考。图9表2参26
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
赵燕英 王建和 顿新鹏 陈正望 陆婕
为研究豌豆胰岛素PA1b在植物生长发育中的作用,利用竞争抑制ELISA法,检测PA1b在豌豆、芋头、姜、西红柿、苦瓜、蒜头、洋葱、丝瓜、黄瓜等植物中的分布,以及PA1b在豌豆种子发芽过程中的含量变化。结果显示PA1b在豌豆中含量最高,且随着豌豆种子发芽时间的增加含量逐渐减少,PA1b可能对植物生长发育起调控作用。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
徐重新 杨晶祎 陆梦晓 仲建峰 张存政 张霄 何鑫 刘媛 刘贤金
免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,并建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析(CI-TRFIA)方法用于食品中Cry1C毒素的残留检测。经4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,采用饱和硫酸铵沉淀和ProteinA柱纯化,获得了浓度为3.86mg.ml-1的多克隆抗体,其效价为1:48000。通过制备Eu-N1标记的羊抗兔IgG作为检测抗体,建立Cry1C毒素的CI-TRFIA检测方法,其灵敏度(IC10)为0.074ng.ml-1,中抑制浓度(IC50)是60.16 ng.ml-1,线性检测范围(IC20 ~IC80)在0.96~1 633.60 ng.ml-1;对Cry1B、Cry...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
徐重新 杨晶祎 陆梦晓 仲建峰 张存政 张霄 何鑫 刘媛 刘贤金
利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析(CI-TRFIA)方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制备Eu-N1标记的羊抗兔IgG作为检测抗体,建立Cry1C毒素的CI-TRFIA检测方法,并进行抗原类似物的特异性分析和Cry1C毒素在稻米中的添加回收试验。结果表明:获得的多克隆抗体质量浓度为3.86 mg·mL-1,效价为1∶48 000;建立的CI-TRFIA检测方法,其灵敏度(IC10)为0.074 ng·mL-1,中抑制浓度(IC5...
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘树森 郭宁 孙华 马红霞 张海剑 石洁
麦根腐平脐蠕孢是玉米根腐病的重要病原菌之一，旨为建立一种基于环介导等温扩增技术(LAMP)的麦根腐平脐蠕孢快速检测方法。首先，根据麦根腐平脐蠕孢参与黑色素生物合成途径的Brn1基因部分序列设计了一套LAMP检测引物；然后，针对该引物组筛选了其最佳反应温度，检测了LAMP反应的特异性和灵敏度，并以人工接种麦根腐平脐蠕孢的玉米根腐病病株为样本评价了LAMP检测方法的效果。结果表明，本研究设计的引物组在61～68℃条件下均能实现对靶标基因的扩增，其中以66℃为最佳反应温度；在特异性检测中，引物组能从10种分离自玉米根腐病样本的主要病原真菌DNA中特异性地检测出麦根腐平脐蠕孢；在灵敏度检测中，对携带靶基因Brn1的质粒DNA最低检测限是10 copies/μL,在此检测限浓度下，25 min左右即可实现扩增；在对玉米根腐病样本检测中，在1 pg/μL的玉米根组织DNA中即可检测出麦根腐平脐蠕孢。建立的麦根腐平脐蠕孢LAMP检测方法具有较强的特异性和较高的灵敏度。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
余娇娇 赵雯 肖池贵 王婷 马兰 陶增
【目的】植物特异性转录因子NLPs（NIN-likeproteins）是硝酸盐响应顺式元件（NRE）的结合蛋白，在硝酸盐调控的下游基因表达中起转录激活作用。玉米转运蛋白ZmSTP1和ZmAAP2在植物碳氮产物的运输和卸载过程中发挥作用，且基因启动子区域均含有一个硝酸盐响应顺式元件。本研究旨在证实玉米ZmNLPs家族成员ZmNLP3、ZmNLP4是否为ZmSTP1和ZmAAP2基因启动子中NRE的结合蛋白。【方法】以玉米B73为试验材料，首次利用酵母单杂交技术检测ZmNLP3、ZmNLP4转录因子分别与ZmSTP1和ZmAAP2基因启动子区域的相互作用。【结果】在线预测网站Plantcare对ZmSTP1和ZmAAP2基因转录起始位点上游2000 bp序列分析表明，位于2个基因转录起始点上游-577～-589 bp和-909～-921 bp区域均包含一个序列长12 bp的NRE元件，结构分别为5'-ATTTAATACTCA-3'和5'-ATATATAAGTCA-3'；诱饵菌株AbA~(r)基因表达检测显示，能抑制诱饵菌株Y1H（pAbAi-ZmSTP1）和Y1H（pAbAi-ZmAAP2）本底表达的最低AbA浓度均为200 ng/mL；将pGADT7-ZmNLP3/4分别转化Y1H（pAbAi-ZmSTP1）和Y1H（pAbAi-ZmAAP2）菌株后，在对照培养基（SD/-Leu）和含AbA浓度为200 ng/mL的筛选培养基中Y1H[（pAbAi-ZmSTP1）/（pGADT7-ZmNLP3）]、Y1H[（pAbAi- ZmSTP1）/（pGADT7-ZmNLP4）]、Y1H[（pAbAi-ZmAAP2）/（pGADT7-ZmNLP3）]、Y1H[（pAbAi-ZmAAP2）/（pGADT7-ZmNLP4）]菌株均能正常生长。【结论】玉米转录因子ZmNLP3、ZmNLP4均能与ZmSTP1和ZmAAP2基因启动子区域相互作用，是靶基因ZmSTP1和ZmAAP2启动子区域NRE的结合蛋白。本研究为深入了解ZmNLPs家族成员参与的硝酸盐信号响应提供理论基础，也为玉米增产和氮素增效提供分子标记和理论依据。
关键词：
玉米 酵母单杂交 转运蛋白 ZmNLPs
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王莹 郑浩 何成华 张爱华 冯璐璐 皇超英 张海彬
【目的】真菌毒素可导致严重的食品安全问题。本试验旨在制备可用于检测伏马菌素B1的特异性单克隆抗体。【方法】制备伏马菌素B1人工抗原,杂交瘤细胞法筛选杂交瘤细胞株制备腹水型单克隆抗体,并对其特性进行鉴定。【结果】筛选得到杂交瘤细胞株F3,分泌的单克隆抗体亚类为IgG1,轻链类型为κ链;10%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示单抗蛋白重链分子质量约为50 kD,轻链分子质量约为25 kD;间接酶联免疫吸附法测定杂交瘤细胞F3细胞培养上清和腹水效价分别为1:3 200和1:51 200;亲和力常数为1.60×10-8 mol.L-1;IC50值可达3.589ng.mL-1;对其它真菌毒素不存在交叉反应;免疫...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨松杰 张晓科 何中虎 夏先春 周阳
目的明确矮秆基因在中国小麦中的分布,有助于改良小麦株高和提高产量潜力。方法选用中国主要麦区品种(系)239份,用STS标记检测矮秆基因Rht-B1b(Rht1)和Rht-D1b(Rht2)的分布规律,验证其PCR标记在分子标记辅助育种中的可用性。结果(1)Rht-B1b和Rht-D1b特异性STS标记可以准确检测小麦品种的Rht-B1b和Rht-D1b矮秆基因。(2)Rht-B1b基因在全国的平均分布频率为24.3%,新疆冬春麦区高达62.5%,长江中下游冬麦区为42.3%,黄淮冬麦区、北部冬麦区和西北春麦区分别为28%、25.8%和25%,北部春麦区和西南冬麦区分别为9.1%和8.3%,东北...
[期刊] 华北农学报
[作者]
易红梅 王凤格 赵久然 王璐 郭景伦 原亚萍
以192份玉米品种为材料,用7对SSR引物对毛细管电泳荧光检测和常规的变性PAGE银染检测两种SSR标记检测方法进行比较分析。结果表明,两种方法检测的SSR标记片段大小一致。毛细管电泳荧光检测法检测的结果更为精确、灵敏、高效,更适用于高通量材料的检测分析。对少量材料进行检测分析以及SSR标记的筛选时,使用常规的变性PAGE银染检测法更经济适用。
关键词：
玉米 SSR 毛细管电泳 银染
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
蒋向辉 徐玉平
该研究利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)探讨茯苓抗食管癌的潜在作用靶点，为食管癌的临床诊治开创新思路.首先在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库中筛选出茯苓的有效活性成分及对应靶点，运用Cytoscape软件中鉴定候选药物作用靶点，接着在癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因表达谱差异(GEO)数据库中下载肿瘤相关基因表达数据集，通过WGCNA鉴定出与食管癌紧密相关的基因，并将鉴定出的基因与茯苓的候选药物作用靶点进行比对，确定茯苓抗食管癌的潜在作用靶点，最后采用RT-PCR的方法对筛选出核心基因在人食管癌细胞中的表达量进行检测.结果共获得34种茯苓有效活性成分，及17个对应靶点，主要候选药物作用靶点为：CHRM1、NCOA2、PGR、ADRA1B、ADH1B、PTGS2.其中ADH1B为茯苓抗食管癌的潜在作用靶点.筛选出DLGAP5、MCM2、CCNA2、CDK1、TPX2、TRIP13、KIF23、KIF2C、CENPF、CHAF1A等10个核心基因，其中CHAF1A和MCM2的表达水平对食管癌患者的预后具有影响.RT-PCR结果显示，CDK1、CHAF1A、TPIP13和MCM2基因经不同浓度的茯苓水煎液处理后，表达量与对照存在显著差异(p<0.05),表明CDK1、CHAF1ATPIP13和MCM2是茯苓水煎液治疗食管癌的主要作用靶点.
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