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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王瑞琴 杨雄 陈红英
【目的】合成、克隆HIV单克降抗体VRC01的单链抗体基因,在大肠杆菌中诱导表达并进行纯化。【方法】根据GenBank上公布的VRC01抗体可变区的氨基酸序列合成引物,运用基因从头合成和重叠延伸PCR方法,克隆抗体VRC01的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因;用15肽Linker(Gly4Ser)3将VH和VL基因相连,得到单链抗体基因scFv-VH-Linker-VL和scFv-VL-Linker-VH,并分别将两者克隆到原核表达载体pET28a中,构建重组质粒后转入大肠杆菌BL21(DE3+)中诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析;将重组蛋白进行...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨雄 刘秀侠 南昊 许晓东 陈红英
【目的】合成并克隆HIV-1单克隆抗体b12的单链抗体基因,在大肠杆菌中诱导表达,并分析表达产物的活性。【方法】以单抗b12的重链和轻链全基因为模板,分别扩增其可变区基因片段后,用重叠PCR的方法将二者拼接起来,形成scFv-VL-Linker-VH结构,并将其插入pET28a载体,构建原核表达载体pETb12-scFv。将pETb12-scFv转入大肠杆菌BL21StarTM(DE3),经IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析;用Ni-NTA金属螯合层析柱对表达产物进行分离纯化,用酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光显微镜和流式细胞仪(FCM)检测纯化蛋白与HIV-1gp120...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李伟 熊川男 王建华 郑永唐 金桥 佟长青 曲敏 刘洪伟 汪秋宽
分离提取海洋无脊椎动物贻贝(Crenomytilus grayanus)凝集素,考察其抗HIV活性。采用半乳糖-Sepharose 6B亲和层析和Sephacryl S-200层析分离提取贻贝凝集素(Crenomytilus grayanus lectin,CGL),以光镜检查合胞体抑制试验,以ELSA测定HIVp24抗原表达水平。从海洋无脊椎动物贻贝中分离出的凝集素(CGL),为N-乙酰半乳糖胺/半乳糖(GalNAc/Gal)特异性的凝集素。CGL在27.88mg.L-1浓度时,对HIV诱导细胞病变的抑制达50%;在45.70mg.L-1时,对HIV-1复制的抑制达50%;同时在35.12m...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李在留 李凤兰 郑永唐 邹坤 张兴杰 汪植
利用多种分离技术对文冠果种皮甲醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部分进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定结构,得到3个香豆素类化合物Ⅰ(臭矢菜素B)、Ⅱ(秦皮素)、Ⅲ(秦皮苷),其中化合物Ⅰ为首次从无患子科中分离得到,Ⅱ、Ⅲ为首次从文冠果种皮中分离得到.通过对HIV-1IIIB诱导感染C8166细胞致细胞病变的抑制试验及对HIV-1IIIB感染MT4细胞的保护试验进行抗HIV-1活性研究,结果表明,化合物Ⅰ具有较强的体外抗HIV-1活性,CC50>200μg/mL,EC50为8.61~12.76μg/mL,选择指数(SI)>15.67~23.23;对HIV-1IIIB感染的MT4细胞具有一定的...
[期刊] 开放教育研究
[作者]
刘邦祥
近年来中国高校组织的在线学习课程发展迅速,学生注册数达200万。中国社会非常关注这类在线的成人教育能否促进学习者的职业能力发展。基于参与中德合作开展HIV/AIDS医护人员在线培训项目的经验,本文总结了该在线培训课程的开发过程以及按照"实践共同体"教学模式组织贵州、四川两省60名在职医护人员在线学习该课程的试验教学经历,并从"学员学习能力"、"问题作为学习任务"和"成员间关系"三个角度分析了"实践共同体"的在线学习过程和效果。研究发现:密切关注职业实践问题,以及与专业辅导人员有效的平等交流被学习者视为决定在线学习效果的最为重要的因素。因此,笔者认为实践共同体在线学习是促进中国网络教育课程质量的...
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