- 年份
- 2024(252)
- 2023(366)
- 2022(360)
- 2021(352)
- 2020(370)
- 2019(777)
- 2018(835)
- 2017(1468)
- 2016(976)
- 2015(1027)
- 2014(919)
- 2013(926)
- 2012(928)
- 2011(794)
- 2010(794)
- 2009(709)
- 2008(707)
- 2007(668)
- 2006(453)
- 2005(437)
- 学科
- 稻(2122)
- 学(1563)
- 贸(1427)
- 贸易(1427)
- 易(1418)
- 电子(1259)
- 网上(1237)
- 网上贸易(1237)
- 水产(788)
- 济(730)
- 经济(730)
- 动物(707)
- 业(648)
- 农(619)
- 管理(588)
- 动物学(577)
- 虫(529)
- 害(514)
- 物(469)
- 及其(449)
- 生物(448)
- 防(419)
- 虫害(412)
- 植(398)
- 防治(390)
- 植物(387)
- 治(387)
- 环境(342)
- 企(327)
- 企业(327)
- 机构
- 学院(12496)
- 大学(12414)
- 农(9471)
- 农业(8266)
- 科学(6735)
- 研究(6707)
- 业大(6118)
- 农业大学(5428)
- 所(5083)
- 研究所(4885)
- 业(4825)
- 室(4605)
- 实验(4550)
- 实验室(4385)
- 重点(4197)
- 省(4010)
- 中国(3775)
- 科学院(3175)
- 京(3133)
- 技术(3116)
- 中心(2683)
- 江(2657)
- 生物(2502)
- 部(2421)
- 农业科学(2398)
- 工程(2230)
- 家(2006)
- 南(1894)
- 国家(1853)
- 资源(1817)
共检索到17136条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 华北农学报
[作者]
王晓静 孙林静 孙玥 张融雪 李军玲 闫双勇 苏京平
为研究水稻水孔蛋白OsPIP2;7基因在非生物胁迫中的生物学功能,根据OsPIP2;7基因序列设计特异性引物,以水稻品种中花11的三叶龄叶片RNA反转录的cDNA第一链为模板,克隆OsPIP2;7。采用嵌套PCR的方法,将3×HA标签的碱基序列连接在去除终止子OsPIP2;7基因序列的3′端,然后将此核酸片段插入到植物双元表达载体pHB中,构建pHB-OsPIP2;7-3×HA载体。以中花11成熟胚愈伤组织为材料,采用农杆菌介导的方法进行遗传转化,经过在含有潮霉素的培养基上筛选和分化,获得阳性转化子。提取转基因植株的DNA,进行潮霉素阳性植株的筛选。将阳性植株进行RNA表达检测,获得OsPIP2;7基因表达量上升的转基因阳性植株。为了检测转基因植株中OsPIP2;7蛋白的表达情况,提取OsPIP2;7基因表达上升的转基因植株膜蛋白后,用HA抗体进行杂交的Western-blot检测结果显示,OsPIP2;7-HA蛋白在转基因阳性植株体内过量表达。获得的过表达OsPIP2;7转基因新材料,将为研究OsPIP2;7基因的生物学新功能提供试验基础。
关键词：
水稻 水孔蛋白 HA标签 蛋白表达
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李嵘 牛向丽 苗雁文 熊方杰 刘永胜
【目的】分析水稻过表达OsPIP2;6在逆境胁迫条件下的表型差异,探讨水通道蛋白基因在水稻逆境应答中的作用。【方法】构建水稻水通道蛋白OsPIP2;6的过表达载体,通过农杆菌介导将其导入水稻日本晴的愈伤中,经遗传转化,阳性鉴定,得到转基因植株。通过逆境胁迫下转基因植株的表型分析来探讨OsPIP2;6的功能。【结果】Real-time PCR结果显示,OsPIP2;6受GA、ABA调控。转基因植株的OsPIP2;6表达量显著提高。正常条件下,转基因植株与野生型植株生长发育情况并无显著差异。在逆境胁迫条件下,转基因植株的耐受能力均显著强于野生型植株。【结论】过表达水稻水通道蛋白基因OsPIP2;6...
关键词：
水稻 水通道蛋白 干旱 盐胁迫
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
林红梅 方长旬 林瑞余 何建宇 林伟伟 李颖哲 林文雄
以水稻根系ｃ ＤＮＡ为模板，ＰｃＲ扩增含Ｈｉｓ标签的Ｌｓｉ１基因开放阅读框，并将该基因克隆到巴斯德毕赤酵母表达载体Ｐ Ｐｉｃ９ｋ中，ＰｃＲ及测序验证重组质粒Ｐ Ｐｉｃ９ｋ－Ｌｓｉ１目的基因序列．将验证正确的重组质粒Ｐ Ｐｉｃ９ｋ－Ｌｓｉ１通过ｓＡｃⅠ酶切线性化，电转到毕赤酵母Ｇｓ１１５感受态细胞中，通过ＭＤ／ＭＭ板筛选出甲醇利用快型的酵母转化子，再通过不同浓度梯度的Ｇ４１８平板筛选多拷贝转化菌株．提取酵母基因组，ＰｃＲ验证正确的菌株即为工程菌（Ｇｓ１１５／Ｐ Ｐｉｃ９ｋ－Ｌｓｉ１）．用１％甲醇诱导该工程菌７２ Ｈ后，收集上清，经ｓＤｓ－ＰＡＧＥ检测到位于３２．８ ｋｕ处的目的蛋白即为ｓｉ转运蛋．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
王一鸣 汪湖 龙胜举 赵英鹏 陈延 贺忠群
为了揭示蒲公英在干旱胁迫下渗透调节和酶保护系统的作用机理以及质膜水孔蛋白PIP2-3基因的表达特征,采用盆栽控水试验,研究了不同干旱胁迫RWC=(90±5)%、RWC=(75±5)%、RWC=(50±5)%下蒲公英渗透调节物质、酶保护系统以及质膜水孔蛋白基因的相关表达。结果表明:随着干旱胁迫的加重,蒲公英叶片中的可溶性糖、可溶性蛋白、游离脯氨酸的含量显著增加,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性显著提高,在轻度胁迫(MS)中呈持续上升的趋势,重度胁迫(SS)中则呈现先
[期刊] 西南农业学报
[作者]
高利军 邓国富 高汉亮 高国庆 周萌 周维永 颜群 张晋 戴高兴
建立抗稻瘟病基因的分子标记对培育抗稻瘟病品种有重要意义。研究利用71个广西地方菌株检测地谷对稻瘟病菌的抗性,并利用地谷中Pi-d2基因与广恢998等位基因在基因组序列上一个碱基的差异,设计出以抗病基因本身序列为引物的基因标签M-Pid2,通过分析地谷与广恢998的F2群体的基因型与对稻瘟病抗感分离的吻合度来验证该标签的准确性,用M-Pid2扩增62份水稻种质验证该标签的特异性。结果表明,地谷能抗71个地方稻瘟病菌株中的59个菌株,抗性频率达83.1%。用M-Pid2扩增地谷与广恢998的F2群体的基因型与其对稻瘟病的抗感分离完全吻合;用M-Pid2扩增62份水稻种质,仅在地谷中扩增出629bp...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张燕 李娟 姚青 陈杰忠 胡又厘
【目的】克隆‘早钟6号'枇杷(Eriobotrya japonica‘Zaozhong 6')的一个质膜水孔蛋白(plasma membrane intrinsic protein,PIP)基因,分析其序列特征,研究接种丛枝菌根(Arbuscular mycorrhizal,AM)真菌对枇杷水分利用效率(water use efficiency,WUE)及对质膜水孔蛋白基因表达模式的影响。【方法】以‘早钟6号'枇杷实生苗为材料,通过盆栽试验,设置2个处理(AM和NM),5个重复,利用光合测定系统对叶片水平上水分利用效率进行测定;采用RT—PCR和RACE技术克隆该基因的cDNA全长,结合生物信...
关键词：
枇杷 丛枝菌根 水孔蛋白 克隆 表达分析
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
郑秀文 崔鹏 石嘉伟 杨静静 陈敏敏 郑瑶 许玲 刘宏波
CCHC型锌指结构蛋白Os ZFP参与调控水稻Oryza sativa侧根的生长发育,但其相关互作蛋白及调控机制未知。以水稻‘日本晴’‘Nipponbare’为试验材料,克隆了Os ZFP基因,利用Eco RI和Sal I酶切位点构建酵母双杂交钓饵表达载体p GBKT7+Os ZFP,验证该表达载体对酵母菌株Y2H无毒性及报告基因自激活现象;采用酵母双杂交技术,从已构建的水稻c DNA文库中筛选到1个阳性互作蛋白,经美国国家生物技术信息中心数据库(NCBI)同源性比对,鉴定为含有T-complex pol
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
郑璐平 林辰 吴祖建 谢联辉
通过RT-PCR克隆获得水稻条纹病毒(RSV)编码的蛋白NS2和拟南芥柯浩体蛋白Atcoilin的cDNA,将两者分别与表达载体pEarley102(带青色荧光蛋白,CFP)和pEarley101(带黄色荧光蛋白,YFP)同源重组.将构建好的重组载体分别转化到农杆菌EHA105中,通过农杆菌接种法将两者共同注射到本氏烟叶片表皮细胞中进行表达.在共聚焦显微镜下观察,NS2-CFP与Atcoilin-YFP能重叠在一起,表明RSV NS2定位于柯浩体.
关键词：
水稻条纹病毒 NS2 柯浩体 细胞定位
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张皓 刘雪莹 钱铭 高鸿儒 汤超 张华 王鹏 张绍铃 吴巨友
[目的]本文旨在建立一种快速添加或替换蛋白标签的新方法——多标签重组连接酶法,为进一步研究目的基因的功能奠定基础。[方法]利用同源重组连接酶反应,将目的基因、蛋白标签和酶切的表达载体同时进行连接,建立一种快速添加或替换目的基因蛋白标签的新方法。[结果]多标签重组连接酶法在用时和步骤上比融合PCR法和T_4 DNA连接酶法具有一定的优势。以梨S_7-RNase为目的基因,基于同源重组连接酶反应,成功将S_7-RNase和GFP蛋白标签构建到pCold-TF载体上,并在15℃和IPTG终浓度为0.5 mmol·L~(-1)时,对重组质粒S_7-RNase-GFP-pCold-TF进行原核表达并成功表达出了重组蛋白。同时,将p1300-35S-GFP载体中的GFP蛋白标签成功替换为mCherry蛋白标签,并将重组质粒p1300-35S-S_7-RNase-mCherry在烟草细胞中成功表达。[结论]多标签重组连接酶法具有快速、简单和高效等特点,并且适用于构建多个蛋白标签或替换某个蛋白标签的表达载体,是一种可靠的高效获得目的基因所需蛋白标签的新方法。
关键词：
目的基因 蛋白标签 重组酶 添加 替换
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
黄骥 张红生 曹雅君 王东 王建飞 杨金水
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
宋文敏 孙嫚嫚 蒋明义
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
胡挺帅 郑梦琪 郑嘉琪 罗心怡 张志友 潘伟槐 郭天荣 莫亿伟
以转OsPIN1a的基因水稻‘中花11’为材料,设置3个处理:适温处理(CK),昼夜温度为30℃/28℃;高温处理(TR1),昼夜温度为38℃/33℃;复合处理(TR2),昼夜温度为38℃/33℃,配以0.1 mmol/L HgCl_2处理,研究高温胁迫和水通道蛋白抑制剂(HgCl_2)对水稻花期生理特性、水通道蛋白基因表达、稻穗和剑叶相对含水量及淀粉粒发育的影响。结果表明:与适温处理相比,高温与HgCl_2胁迫均能降低稻穗和剑叶相对含水量,降低结实率和千粒质量,降低柱头上花粉粒数量及柱头和花粉粒的线粒体活性,抑制OsTIPs和OsPIPs家族多个基因的表达,使稻穗水分供给减少,导致胚乳淀粉粒发育不良,形成不规则圆球形,以高温与HgCl_2复合处理时影响最大。水通道蛋白基因家族表达受抑制后,加重了高温胁迫对水稻植株花期生长发育的伤害,致使花粉粒和柱头活性下降,导致结实率降低和籽粒充实不良。
[期刊] 湖南农业大学学报
[作者]
洪亚辉 萧浪涛 董延瑜
以蛋白质含量高为育种目标之一 ,采用浸胚法将高蛋白玉米马齿黄的总 DNA导入优质早籼稻 91- L 中 ,通过连续 6年的选择 ,从变异后代中选育出 DH早 1,DH早 5 ,DH早 6 ,DH早 8,DH早 9等 5个高蛋白稻新品系 .大田试验表明 ,这些品系能保持原受体较高的产量和抗性等优良性状 .米质分析表明 ,这些品系的绝大多数米质指标达到部颁优质米一级或二级标准 ,平均蛋白质含量达到 13.6 5 % ,其中 DH早 9高达 14.9% .
关键词：
玉米 水稻 脱氧核糖核酸 导入 蛋白质
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
江绍玫 朱速松 沈文飚 郑天清 王益华 江玲 王春明 徐朗莱 万建民
根据水稻种子及其贮藏蛋白特性 ,结合普通实验室条件 ,对分离水稻种子全蛋白及其各蛋白组分的方法进行改进 ,建立了筛选水稻种子贮藏蛋白突变体的新方法。讨论了抽提水稻种子全蛋白时试剂加入的最佳方式以及各蛋白组分分级分离时的最佳条件。新方法简便易行 ,快速高效 ,重复性好。将该法用于种子资源库筛选 ,得到了较满意的结果。
关键词：
水稻 贮藏蛋白 突变体 筛选方法
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
