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[期刊] 渔业科学进展
[作者]
徐永江 柳学周 石莹 王滨 史宝 张凯 蓝功岗
为深入认识半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生殖调控机制,研究了生长轴(GH/IGF-Ⅰaxis)对半滑舌鳎卵巢发育调控的作用及可能机制;分析了卵巢不同发育时期垂体中的生长激素(GH),脑、性腺和肝脏中的类胰岛素生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA的表达水平变化;检测了卵巢不同发育期,血清GH、IGF-Ⅰ、雌二醇(E2)、睾酮(T)的表达水平变化,并分析了生长因子与性腺指数(GSI)、E2和T表达变化的关系。结果显示,垂体GH mRNA表达水平在Ⅳ期卵巢时显著升高,至Ⅴ期时达峰值,随后(
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
徐永江 柳学周 张凯 武宁宁 刘芝亮 李春广
为在蛋白水平认识半滑舌鳎类胰岛素生长因子Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）的生理功能，将ＩＧＦ－Ⅱ成熟肽序列克隆到原核表达载体ｐ ＥＴ－２８ａ中，成功构建了重组半滑舌鳎ＩＧＦ－Ⅱ／ｐ ＥＴ２８ａ质粒，导入到Ｅ．ｃｏｌＩ Ｂｌ２１（ＤＥ３）菌株后经ＩｐＴＧ诱导，获得了大小为１１．４ ｋ Ｄａ的重组ＩＧＦ－Ⅱ蛋白，Ｎ端含６个组氨酸，可特异性地被６×ＨＩｓ抗体识别。重组ＩＧＦ－Ⅱ蛋白在最优诱导条件３７℃诱导２ Ｈ，目的蛋白表达量占重组表达菌总蛋白的４３．７％，重组蛋白主要以包涵体存在。将获得的重组蛋白包涵体经变性、纯化和复性后，获得了纯化的ＩＧＦ－Ⅱ重组蛋白，其可在体外显著促进人乳腺癌ＭＤａ２３１细胞的增殖，表明ＩＧ．．．
关键词：
半滑舌鳎 IGF-Ⅱ 原核表达 生物活性
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
徐永江 柳学周 张凯 武宁宁 刘芝亮 李春广
为在蛋白水平认识半滑舌鳎类胰岛素生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的生理功能,将IGF-Ⅱ成熟肽序列克隆到原核表达载体p ET-28a中,成功构建了重组半滑舌鳎IGF-Ⅱ/p ET28a质粒,导入到E.coli BL21(DE3)菌株后经IPTG诱导,获得了大小为11.4 k Da的重组IGF-Ⅱ蛋白,N端含6个组氨酸,可特异性地被6×His抗体识别。重组IGF-Ⅱ蛋白在最优诱导条件37℃诱导2 h,目的蛋白表达量占重组表达菌总蛋白的43.7%,重组蛋白主要以包涵体存在。将获得的重组蛋白包涵体经变性、纯化和复性后,获得了纯化的IGF-Ⅱ重组蛋白,其可在体外显著促进人乳腺癌MDA231细胞的增殖,表明IG...
关键词：
半滑舌鳎 IGF-Ⅱ 原核表达 生物活性
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张雅星 王滨 柳学周 徐永江 史宝 姜燕 崔爱君
为深入了解生长轴(GH/IGF axis)对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生长发育的调控作用,采用定量PCR方法研究了GH/IGF轴5个关键生长因子(GH、GHR1、GHR2、IGF-I、IGF-II)在配子、胚胎发育和仔稚幼鱼生长过程中的差异表达调控特性。结果显示,这5个生长因子都具有亲本遗传的特性,除GH外,精子中其他4个生长因子转录表达水平均显著高于卵子。在胚胎发育阶段, GH mRNA在胚胎发育各时期均有表达,且在细胞分裂初期和孵化期表达水平较高。GHR1和GHR2mRNA在胚胎发育各时期呈现相似的表达水平变化趋势,除囊胚期和原肠胚期外, GHR1 mRNA的表达量均高于GHR2。IGF-I和IGF-II mRNA在胚胎发育各时期均表达, IGF-I在孵化期表达水平最高, IGF-II在胚体下包2/3期和孵化期表达水平最高。除64细胞期和128细胞期外, IGF-II mRNA的表达量均显著高于IGF-I (P
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
柳学周 徐永江 刘乃真 曲建忠 倪娜 赵明
采用组织学方法系统研究了人工养殖条件下半滑舌鳎亲鱼卵巢的组织发育周年变化特征。结果表明,卵母细胞发育可分为6个时相,卵巢发育分为6期。卵巢不同发育时期都由不同类型的卵母细胞组成,半滑舌鳎为非同步分批多次产卵类型。周年发育过程中,6月龄前的鱼卵巢发育处于第Ⅰ期;9～12月龄卵巢可发育至第Ⅱ期;12月龄半滑舌鳎性腺可发育达到Ⅲ期,并一直保持至24月龄。3龄雌鱼达到性成熟,卵巢可发育至第Ⅳ期;随着水温和光周期的调控,卵巢发育进入成熟期(Ⅴ期),发生水合现象是卵母细胞成熟并准备排卵的信号;产卵结束后卵巢退化至第Ⅵ期,排出的卵母细胞退化吸收,以Ⅲ期卵巢越冬后,卵巢退化至Ⅱ期并持续至下一个繁殖周期。人工养...
关键词：
半滑舌鳎 卵巢发育 组织学
[期刊] 中国水产科学
[作者]
柳学周 史宝 李晓晓 徐永江 王珊珊 李晓妮
为进一步提高半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)人工育苗技术水平,对半滑舌鳎新型膜孕激素受体(m PR-like)基因进行研究。采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)方法,获得全长为2 002 bp的半滑舌鳎新型膜孕激素受体的c DNA序列;二级结构分析表明,该蛋白存在7个跨膜区域;三级结构分析表明该蛋白有多个结合位点。使用MEGA4.0临位相联法和Clustal X方法对m PR-like的氨基酸序列进行聚类分析和序列相似度分析,发现半滑舌鳎m PR-like与青鳉(Oryzias latipes)和三刺鱼(Gasterosteus aculeayus)的...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
于朝磊 常青 吕云云
通过投喂经甘露寡糖强化的卤虫无节幼体,探索其对半滑舌鳎稚鱼(初始体长为1.4 cm左右)生长性能、肠道发育和非特异性免疫水平的影响。试验设两个处理组(对照组和甘露寡糖组),分别投喂经裂壶藻或甘露寡糖+裂壶藻强化的卤虫无节幼体。试验进行34 d,每17 d取样1次。结果显示,17 d时甘露寡糖组体长显著大于对照组(P0.05)。RNA/DNA和protein/DNA的比值在17 d时两组间均无显著性差异(P>0.05);34 d时甘露寡糖组的RNA/DNA和protein/DNA比值均大于对照组。甘露寡糖组17 d时淀粉酶比活力和34 d...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
赵敏 梁萌青 郑珂珂 肖登元 李庆华
研究了牛磺酸对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)亲鱼繁殖性能、抗氧化功能、卵子及仔鱼质量的影响。在基础饲料中分别添加0、0.5%、1.5%的牛磺酸,配制3组(对照组T-0、T-0.5、T-1.5)等氮等脂的配合饲料,在室内流水养殖系统进行为期63 d的养殖实验。研究结果显示,在饲料中添加0.5%牛磺酸,不仅能够提高半滑舌鳎亲鱼的相对产卵量,还能促进亲鱼体内睾酮和雌二醇的分泌(P<0.05);T-0.5组浮卵率、受精率、孵化率、卵径、油球直径、3日龄、7日龄仔鱼体长均显著高于对照组(P<0.05),T-0.5组和T-1.5组仔鱼畸形率显著低于对照组(P<0....
关键词：
牛磺酸 半滑舌鳎 亲鱼 繁殖性能
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘权 王滨 柳学周 徐永江 史宝 刘增新
本研究首次通过下丘脑离体孵育的方法研究促性腺激素抑制激素(Gonadotropin-inhibitory hormone,GnIH)多肽对半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)下丘脑中生殖相关基因的表达调控。研究结果显示,tsGnIH-1促进了gnrh2和gnih的表达,对gnrh3和kiss2的表达无影响;tsGnIH-2抑制了gnrh3的表达,对gnrh2、kiss2和gnih的表达无影响。GnIH多肽对生殖相关基因的不同调控表明同一前体蛋白编码的不同GnIH多肽在生殖调控中的作用不
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
徐永江 柳学周 史宝 翟介明
采用茜素络合物（ＡｌｉｚＡｒｉｎ Ｃｏｍｐｌｅｘｏｎｅ，ＡｌＣ）分别浸泡标记７０ ｄ和１７０ ｄ半滑舌鳎（Ｃｙｎｏｇｌｏｓｓｕｓ ｓｅｍｉｌＡｅｖｉｓ）苗种耳石，设置了５个浓度组和３个时间梯度组。结果显示，ＡｌＣ对半滑舌鳎７０–１７０ ｄ苗种的耳石染色效果明显。综合考虑存活率和标记效果，ＡｌＣ浸泡标记半滑舌鳎苗种耳石的适宜浓度为１００ ｍｇ／ｌ（３６ ｈ浸泡处理）和１５０ ｍｇ／ｌ（２４ ｈ浸泡处理）。相同浸泡时间下，随着ＡｌＣ浓度的增加，耳石上标记信号强度增加，但实验鱼死亡率升高；相同浸泡浓度下，随着时间的增加，耳石上标记信号强度增加，实验鱼死亡率也会升高。对标记的１７０ ｄ苗种进行养殖实验．．．
关键词：
茜素络合指示剂 半滑舌鳎 耳石 标记效果
[期刊] 水产学报
[作者]
汪娣 田永胜 陈松林
探讨了不同温度(19,21,23,25和27℃)对半滑舌鳎的性腺组织发育的影响。在受精后39～106 d对半滑舌鳎进行温度控制处理,通过石蜡组织切片,对半滑舌鳎早期性腺分化发育进行组织学观察。发现在19℃饲养条件下,受精后46 d(pfd46)半滑舌鳎性腺原始生殖细胞数量增加,有分化成卵巢的倾向;在该条件下,pfd82半滑舌鳎性腺开始分化为精巢。pfd82时,27℃条件下的幼鱼卵巢中卵原细胞数目大量增殖;精巢中精小叶多而密,结缔组织间隔清晰。pfd129时,27℃处理的幼鱼卵巢发育到Ⅱ期,其他温度处理组仍处于Ⅰ期卵巢,但随着温度的提高,卵巢中卵母细胞数目增多,且由散乱分布变为有序的排列在卵巢小...
关键词：
半滑舌鳎 水温 性腺发育
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李斌 柳学周 徐永江 史宝 朱学武
采用解剖学、组织切片、电镜观察和2种染色技术研究了半滑舌鳎(Cynoglossus semilavis)消化道的组织结构特征。半滑舌鳎消化道可分为口咽腔、食道、食道胃、前肠、后肠5部分,观察了各部分消化道的显微和超微结构,测定了消化道各部分的黏膜褶皱数、黏膜褶皱高度、肌肉层(纵肌和环肌)厚度、黏液细胞相对密度等指标。结果显示,半滑舌鳎不具备结构特征明显的胃,摄食后,食道后部与肠道连接部形成一个囊状膨大结构,称之为食道胃;食道前部开始出现杯状黏液细胞,整个食道以Ⅲ型黏液细胞为主,食道胃中黏液细胞以Ⅲ型为主,
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王滨 柳学周 刘权 赵明 徐永江 史宝
为了研究下丘脑神经肽促性腺激素释放激素(Gonadotropin-releasing hormone 2,GnRH2)在半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)卵巢成熟过程中的生理作用,本研究通过RT-PCR及RACE方法获得了半滑舌鳎GnRH2全长cDNA序列;通过实时荧光定量PCR(qPCR)对gnrh2 mRNA的组织分布以及卵巢成熟过程中的时空表达特性进行了分析。结果显示,半滑舌鳎GnRH2全长c DNA序列为538 bp(不包括polyA尾),其中,5'非编码区(Untransl
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
柳学周 徐永江 马爱军 姜言伟 翟介明
对半滑舌鳎 (CynoglossussemilaevisG櫣ｎｔｈｅｒ)胚胎发育与盐度、温度和光照的关系作了初步探讨 ,并提出胚胎孵化的优化技术以促进半滑舌鳎人工繁育工作的发展。实验表明 ,受精卵孵化的适宜盐度为 2 5～ 35 ,此盐度范围内孵化率都可达 88%以上 ,盐度低于 2 0或高于 4 0孵化率会明显降低 ,同时初孵仔鱼畸形率会随之升高。胚胎在 2 2～ 2 4℃范围内的孵化率最高 ,达 82 %以上 ,且畸形率最低。不同的光照节律和光照强度对胚胎的孵化率和初孵仔鱼畸形率影响不大 ,但是对胚胎发育速率和孵化时间具有明显的延滞或促进作用。综合胚胎发育与环境因子的关系 ,结合实际操作技...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
肖登元 梁萌青 王新星 郑珂珂 赵敏
在饲料中分别添加０、２００、１２００ ｍｇ／ｋｇ的维生素Ｅ（ＤＬ－α－生育酚乙酸脂形式）配制成Ｅｃ、ＥＬ和Ｅｈ三种试验饲料，饲喂３龄半滑舌鳎亲鱼（雌性１．５８±０．１９ ｋｇ／尾、雄性０．２０±０．０５ ｋｇ／尾）７０ Ｄ，探讨饲料中添加不同水平的维生素Ｅ对半滑舌鳎亲鱼繁殖性能的影响。结果显示，饲料中添加１２００ ｍｇ／ｋｇ的维生素Ｅ（Ｅｈ组）不仅可以促进亲鱼性腺的发育，提高亲鱼产卵量、浮卵率、受精率、孵化率以及初孵仔鱼长度，而且影响仔鱼质量，仔鱼的成活率、１２ Ｄ仔鱼长度、生存活力等方面均要高于对照组。而饲料中添加２００ ｍｇ／ｋｇ的维生素Ｅ（ＥＬ组）只对亲鱼性腺的发育和初孵仔鱼长度有一定的．．．
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