[目的]本文拟通过验证草莓bHLH（basic/helix-loop-helix）家族转录因子FabHLH37的功能，解析其调控草莓抗灰霉病的机理，为草莓的抗病育种提供新的基因资源。[方法]以栽培草莓品种‘红颜’为试验材料，提取灰霉菌侵染后的草莓果实总RNA并反转录为cDNA，克隆FabHLH37编码区序列，并使用在线软件对其进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR（Real-timeQuantitativePCR，qPCR）分别检测该基因在草莓不同组织及果实接种灰霉菌后的相对表达量；利用烟草瞬时表达系统研究该基因的亚细胞定位；通过草莓果实瞬时表达系统研究FabHLH37抗灰霉病功能。[结果] FabHLH37基因CDS全长789 bp，编码262个氨基酸，理论等电点（pI）为6.61，分子质量为2.9×10~(5)道尔顿；进化分析显示FabHLH37与月季、苹果等蔷薇科植物bHLH37蛋白同源关系较近；亚细 胞定位分析显示FabHLH37特异性地定位于细胞核；qPCR分析表明FabHLH37在草莓根中表达量最高，叶次之，灰霉病菌侵染可以显著诱导FabHLH37基因的表达；草莓果实瞬时表达结果显示，与对照相比，过表达FabHLH37的草莓果实接种灰霉菌后感病程度轻，而沉默FabHLH37的草莓果实相反；进一步的qPCR检测发现，在草莓果实瞬时表达体系中，FaPR1/4/5-1、FaBG2-1、FaCHI3-1、FaSOD、FaPAL等多个防卫基因的表达量与FabHLH37的表达量呈正相关，即过量表达FabHLH37可显著提高这些基因的表达量，而沉默FabHLH37则显著降低这些基因的表达量。[结论] FabHLH37可通过诱导防卫基因的表达而正向调控草莓灰霉病。

【目的】草莓灰霉病是一种世界范围分布的真菌病害,研究旨在探索湖北省设施草莓灰霉病的发生规律,分析不同流行因子与灰霉病发生的相关性,选择与果实发病率具有显著相关性因子建立模型,揭示不同因子与草莓灰霉病发生的关系,为湖北省设施草莓灰霉病防治提供理论依据。【方法】于2013—2015年在湖北省农业科学院草莓种植基地选取3个代表性草莓大棚,用5点取样法采集无症花、叶、果实,结合特异性PCR和保湿培养法检测组织上灰霉菌带菌率;选取其中两个大棚数据对草莓果实发病率与花朵发病率、叶片发病率、温度、相对湿度、果实带菌率、

【目的】明确衰老花瓣在草莓果实灰霉病中的作用以及草莓花瓣脱落早晚与果实灰霉病发病的关系,为果实灰霉病的防控和抗(耐)灰霉病品种选育提供理论依据。【方法】试验1:以草莓品种‘甜查理’为材料,进行田间试验,摘除至少2 000个果实表面的衰老花瓣,以不摘除花瓣的处理为对照。保持塑料棚内高湿度8 d后,调查不同处理草莓果实灰霉病发病率。试验2:分别在2013、2014和2015年3月草莓盛花期,对11个草莓品种的田间花瓣脱落动态进行调查,每个品种选择20朵刚现蕾的花,记录现蕾后第7、14、21和28天果实上残留的花瓣数量,计算花瓣脱落率;于果实灰霉病发病高峰期,调查不同草莓品种果实灰霉病的发病率,分析...

【目的】灰霉病是草莓生产过程中的一种重要病害,严重影响了其产量和品质。论文旨在明确四川省草莓灰霉病菌对咯菌腈的抗性频率以及抗性机制,为草莓灰霉病的药剂防治提供理论依据。【方法】2016—2017年从四川成都、德阳、眉山、乐山及雅安等地采集草莓灰霉病样本,并分离纯化得到188株草莓灰霉病菌菌株。采用区分计量法测定188株灰霉病菌对咯菌腈的敏感性水平,采用菌丝生长速率抑制法测定咯菌腈对代表性菌株的毒力和渗透压敏感性,采用甘油铜比色法测定经咯菌腈处理的抗性菌株和敏感菌株甘油含量,采用分段测序对抗性菌株和敏感菌株Ⅲ型组氨酸激酶基因BOS1(BC1G_00374)扩增测序,采用Swissmodle和I-TASSER预测和评价突变对BOS1的结构影响。【结果】188株灰霉病菌菌株中有8株表现为高抗,9株为中抗,43株为低抗,其余表现为敏感;咯菌腈对代表性菌株的EC50介于0.03—0.62μg·mL~(-1),代表性菌株的抗性倍数范围为2.2—45.9。NaCl浓度在1.25—10 g·L~(-1)可刺激敏感菌株生长,浓度在1.25—20 g·L~(-1)范围可刺激抗性菌株生长,但>40 g·L~(-1)时则抑制菌丝生长,尤其对抗性菌株,抗性越高抑制作用越强;在正常条件下各代表性菌株甘油含量介于0.0025—0.0148μg·mL~(-1),且菌株的甘油含量与咯菌腈抗性没有明显的关联性,但在使用咯菌腈处理(0.1μg·mL~(-1))抗性菌株和敏感菌株后,甘油含量均上升,且抗性菌株甘油含量上升幅度明显低于敏感菌株。低抗菌株YAHY-13、CDCZ-2以及中抗菌株CDCZ-42在TAR和HAMP区域均发生突变,中抗菌株CDCZ-20和高抗菌株MYFC-10、CDCZ-43在TAR和REC区域均有突变,但CDCZ-20菌株在TAR区域位点是I365N,而两株高抗菌株在TAR区域位点是I365S。不同突变位置对BOS1区域结构有不同程度的影响,其中F127S、I365N、I365S、V1136I、A1259T均处于BOS1区域结构的无规则卷曲,但TAR区域I365N和I365S使区域结构无规则卷曲发生整体偏移。【结论】四川省已有部分地区草莓灰霉病菌对咯菌腈产生了抗性;相比敏感菌株,田间抗性菌株对渗透压的耐受能力增加,但当浓度超过耐受范围后对渗透胁迫高度敏感,药剂胁迫下田间抗性菌株甘油含量增加量显著小于敏感菌株;组氨酸激酶BOS1突变的位置和方式与灰霉病菌菌株对咯菌腈的抗性水平存在必然联系。

[目的]利用敏感性基线、交互抗性、生物适合度等评价新药的抗药性风险水平。本研究评价了灰霉病菌对氟吡菌酰胺的抗药性风险水平,这对科学使用氟吡菌酰胺和可持续防治灰霉病具有重要意义。[方法]采用菌丝生长速率法,测定了100株江苏省草莓灰霉病菌对氟吡菌酰胺的毒力曲线,建立了敏感性基线,并通过交互抗性及相关生物学测定,评价了其潜在的抗性风险。[结果]建立的敏感性基线是一个单峰曲线,接近正态分布,平均EC50为(1.94±1.55)μg·m L-1;氟吡菌酰胺与其同类的啶酰菌胺及其他类型杀菌剂之间不存在交互抗性;氟吡菌酰胺抗性菌株的生物适合度显著低于敏感菌株。[结论]灰霉病菌对氟吡菌酰胺的抗性风险属于低至...

【目的】探索和优化检测条件,建立同时检测草莓灰霉病菌Botrytiscinerea,炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides和黄萎病菌Verticillium dahliae的三重PCR检测体系,为3种病害的早期快速诊断和鉴定提供技术和方法。【方法】选择可以组合的3种病原菌特异引物,研究多重PCR的影响因素,优化PCR退火温度,采用正交试验方法,以3个引物组、TaqDNA聚合酶、dNTP和Mg2+六因素三水平优化多重PCR体系。【结果】建立并验证适合上述草莓主要病原菌的三重PCR最佳检测体系,可分别扩增出729、539和450bp的特异条带,最适退火温度为50℃,2...

为研究钙对β－氨基丁酸（ＢＡＢＡ）诱导番茄抗病性的调控与防御酶活性的关系，本研究通过外源增钙和缺钙处理，系统探索β－氨基丁酸诱导的番茄抗病性和主要防御酶活性的变化。结果表明：用β－氨基丁酸处理番茄叶片后，处理叶片及其上位非处理叶片对灰霉病的抗性均显著增强，二者病情指数比对照分别降低３５．４％和２３．９％；外源ＣＡ２＋可以显著促进ＢＡＢＡ诱导的番茄抗病程度，用ＢＡＢＡ诱导同时外源喷施ＣＡ２＋，番茄诱导叶和非诱导叶的病情指数分别低于对照５３．６％和３４．４％；而ＥＧＴＡ（ＣＡ２＋螯合剂）和ＬＡ ＣＬ３（质膜钙通道抑制剂）则不同程度地抑制了ＢＡＢＡ诱导的抗病性。外源ＢＡＢＡ同样提高番茄处理叶片和非处．．．

通过田间和大棚接种鉴定,研究了20个郁金香杂交F1代的644个植株对郁金香灰霉病的抗性及其遗传关系,并以病情指数评价了郁金香杂交F1代的抗病性。结果表明,在供试的杂交F1代中,Bellona×Flair Mutant分离出了10％的高抗植株,Bellow×(M．Miles×LW 76313—3k)分离出了41．7％的抗病植株,这为杂交选育抗病新品种提供了依据;杂交F1代群体的抗病性以Bellona×(LW×White Sail 75308—4k)较好,且其病情指数最低,为55;郁金香杂交F1代群体的抗病性存在差异,呈连续性分布,表现出数量性状遗传的特征,初步推断这可能受微效抗病多基因控制。

［目的］探讨转录因子ＡＢＩ４在草莓果实发育过程中的作用。［方法］以八倍体草莓品种‘甜查理’为试材，利用基因同源克隆技术获得了１个草莓转录因子ＦＡ ＡＢＩ４编码基因，运用ＣｌｕｓｔＡｌ Ｘ软件和ＭＥＧＡ ５软件分析了草莓中ＦＡ ＡＢＩ４与其他物种间的序列同源性和亲缘关系，并利用荧光定量ＰＣＲ技术分析了ＦＡ ＡＢＩ４基因随着草莓果实发育的表达模式。通过植物双元表达载体Ｐ ＢＩ１２１构建的基因瞬时表达系统对草莓果实中的ＦＡ ＡＢＩ４基因表达水平进行了调控，ＦＡ ＡＢＩ４基因表达量瞬时调控出现表型后，分别采取空载体Ｐ ＢＩ１２１和干扰载体Ｐ ＢＩ１２１－ＦＡ ＡＢＩ４侵染过的草莓果实并且去掉种子，分析．．．

流行学田间调查发现树莓灰霉病发生与生育期、温度、降雨量和种植方位有密切关系,另外植株不同部位病情指数存在差异。流行学研究证明多因子Logistic模型可以较好地反映树莓灰霉病流行动态。树莓青果期不易发病,果实采收盛期发病较重并且增长较快,即病害流行逻辑斯蒂期(0.05～0.95)为产果期16～33d,积温达409～877℃,累积降雨量达53～159mm。

为了对加工型草莓新品种石莓10号营养品质进行分析及评价,以石莓10号为试验材料,并以当前主栽加工品种达赛莱克特为对照,测定了石莓10号和达赛莱克特的一般营养成分、活性营养成分、色泽、质构以及芳香成分。结果表明,石莓10号的灰分、可溶性固形物、固酸比分别为0.68%±0.21%,7.53%±0.06%,9.41±0.23,显著高于达赛莱克特(P0.05);石莓10号的花色苷含量显著高于达赛莱克特(P<0.05)。石莓10号的硬度、弹性以及咀嚼性显著高于达赛莱克特(P<0.05),质构特性表现优异。检测的7种

草莓灰霉病菌(Botrytis Ciennea Persoon)在 21～25℃下 pH 3～4的霉菌生长培养基中培养产生毒素,致使草莓愈伤组织细胞的活性丧失。产生毒素的高峰期在静置培养20 d,培养滤液用氯仿萃取,所得粗提物稀释90倍后仍有毒性存在,30倍稀释的毒素溶液处理愈伤组织,用荧光法观察,1.0h细胞致死率达86％,2.5 h细胞致死率高达99.9％。

【目的】研究水杨酸(SA)处理后苹果灰霉病发生情况及与抗病性相关指标的变化,以探明SA对苹果灰霉病的抗性诱导机理,为苹果采后病害的防治提供参考。【方法】用150mg/L水杨酸(SA)浸泡苹果果实20min,以清水浸泡作为对照,20℃下放置2d后接种灰霉病菌灰葡萄孢,接种后19d,调查灰霉病的发病率和病斑直径,测定过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、几丁质酶(CHI)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)活性及总酚、类黄酮、丙二醛(MDA)含量。【结果】与对照相比,采后SA处理可