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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 陈林军  刘省段  杨晓野  王瑞  李莹莹  李军燕  罗晓平  
【目的】探究捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans冻干制剂厚壁孢子的批量培养方法及其对线虫幼虫的毒杀剂量。【方法】通过玉米粒或大麦粒培养基的单步培养法,以及先在含有0.05%琼脂粉的沙氏葡萄糖肉汤培养基中培养7d后继而转接到玉米粒或大麦粒培养基的双步培养法,以培养35周后洗脱的每克固体培养基中的厚壁孢子数为依据,对D.flagrans的最优培养方法进行筛选;然后使用最优培养法培养D.flagrans厚壁孢子并将其冻干后用于体外杀线虫幼虫试验,研究D.flagrans冻干制剂的杀线虫幼虫剂
[期刊] 西南农业学报  [作者] 韩雨璇   张亚萍   李柠杏   张嘉华   李能秀   焦健   才学鹏   乔军   孟庆玲  
【目的】探究捕食线虫性真菌Duddingtonia flagrans几丁质酶的生物学特性与亲缘关系。【方法】对捕食线虫性真菌D. flagrans几丁质酶CTS3和CTS4基因进行克隆和测序,并对其编码蛋白的信号肽、亲/疏水性、催化结构域、保守序列、二级与三级结构等分子特征进行预测以及其他真菌几丁质酶的亲缘关系进行分析。【结果】几丁质酶CTS3和CTS4含有几丁质酶催化结构域的2个高度保守序列(SIGG和DGFDLDXE)及一个典型的(α/β)_(8)桶状结构域,属于糖苷水解酶18家族(GH18)。CTS3和CTS4几丁质酶均为分泌型蛋白,在N端的第1~25和1~18个氨基酸分别为其信号肽序列,C端均含有糖苷水解酶18家族结构域。分子结构分析表明,几丁质酶CTS3和CTS4三级结构具有(α/β)_(8)的TIM桶形结构, 中心部分为平行的β-折叠组成的内桶,外桶由α_(1)~α_(8)组成;底物结合区域位于保守序列β_(3)和β_(4)链形成的环状裂隙。亲缘关系分析表明,CTS3 和CTS4与昆虫致病真菌几丁质酶同源性较高,它们聚为一支,推测在侵染宿主的过程中具有相似的生物学功能。【结论】2个几丁质酶基因分子特征与亲缘关系的阐明,为研发新型家畜消化道线虫病生防制剂奠定了基础。
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