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[期刊] 西南农业学报
[作者]
范源洪 蔡青 宿兵 张亚平
甘蔗植物组织内的多酚类、色素类等物质是干扰ＲＡＰＤ扩增反应的主要成分。本研究以ＣＴＡＢ法和ＳＤＳ法为基础，着重对抗氧化剂（ＰＶＰ等）、酶（蛋白酶Ｋ、ＲＮａｓｅＡ）和酚抽提等因素对提取ＤＮＡ的质量及其ＲＡＰＤ的影响进行了比较筛选。结果表明：①甘蔗ＤＮＡ提取质量和纯度与ＲＮａｓｅＡ、抗氧化剂等处理直接相关，蛋白酶Ｋ、ＣＴＡＢ和ＳＤＳ的处理无明显差异；②对于甘蔗ＲＡＰＤ反应，模板ＤＮＡ中含有一定量的ＲＮＡ和蛋白质，其扩增产物无明显差异，但模板ＤＮＡ的降解程度和含有酚类、色素等是干扰甘蔗ＲＡＰＤ反应的主要因子。进一步分析讨论了甘蔗ＲＡＰＤ扩增的有效的ＤＮＡ提纯方法和影响因子。
关键词：
DNA提纯 甘蔗亚族 RAPD
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谢如林 谭宏伟 黄美福 周柳强 黄金生 黄献华 曾艳 杨瑞青 董文斌 王磊
采集广西主要蔗区14个县(区)32个土壤和甘蔗植株样品,将甘蔗样品分为蔗茎、蔗尾和青叶、枯叶、蔗蔸和根系4个部位,对高产甘蔗收获期的植物营养特征及收获后各种养分的去向进行了系统的研究。结果表明,大量元素N、P和K以青叶和蔗尾中的含量最高,中量元素Ca、Mg和S含量则以枯叶中的含量最高,Zn和Cu在青叶和蔗尾中的含量最高,Fe在蔗蔸和根系中的含量最高,Mn和B在枯叶中的含量最高;大量元素N、P、K主要积累于蔗茎、青叶和蔗尾,其中蔗茎的累积量约占60%左右,青叶和蔗尾的累计量约占总吸收量的20%~25%;中量元素Ca、Mg、S主要积累在蔗茎、枯叶、青叶和蔗尾几个部位,占总吸收量的90%以上;微量元...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蒋洪涛 黄梅燕 郭强 叶燕萍 张木清
采用盆栽模拟试验，研究３种植物生长调节剂对４个甘蔗品种（系）伸长初期叶片质膜透性和收获期经济性状的影响。结果表明，４个甘蔗品种（系）的抗旱能力不同，ＲＯＣ２２的抗旱能力最强，福桂１号和福桂３号的抗旱能力差别不大，而福桂２号属于干旱敏感型品种。３种植物生长调节剂对促进不同甘蔗品种（系）的抗旱作用不相同，与清水处理相比，壳寡糖处理能提高ＲＯＣ２２和福桂１号的抗旱能力，黄腐酸处理能提高福桂２号和福桂３号的抗旱能力，而生命素处理仅对提高福桂２号抗旱能力有一定作用。叶片质膜透性与抗旱系数呈极显著负相关，相关系数为－０．９０２。甘蔗伸长初期叶片质膜透性可作为甘蔗品种抗旱性评价的一个生理指标。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘昔辉 宋焕忠 张革民 张荣华 方位宽 区惠平 陆建勋 梁强 唐红琴
利用珠磨器和不锈钢珠,以甘蔗及其近缘属割手密、斑茅和河八王为材料提取基因组DNA,并对得到的DNA进行电泳检测、含量测定和SSR分析。结果表明,该方法能高效快速提取基因组DNA,所提取DNA中蛋白质、多糖类物质等去除较彻底,DNA纯度较高,完整性好;SSR分析条带清晰,多态性较丰富,能扩增出特异性谱带。该方法无需液氮研磨,简单、快速、高效,经济成本低、PCR扩增效果好,适用于大规模的样品检测,可用于甘蔗育种遗传多样性分析、种质鉴定及指纹图谱构建等。
关键词：
甘蔗 DNA提取 SSR
[期刊] 西南农业学报
[作者]
马艳芝 张玉星
中国梨属植物资源丰富,RAPD技术已广泛用于梨资源遗传多样性研究。通过对不同部位提取的DNA纯度进行测定,并进行RAPD扩增分析,为RAPD技术在梨属种质资源中的应用提供参考。以鸭梨和杜梨为试验材料,利用CTAB法对其幼叶、老叶及韧皮部等不同组织或同一组织的不同时期进行了基因组DNA的提取,并对其进行了RAPD反应的比较。所提取的鸭梨的幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部DNAOD260/OD280的比值分别为2.0、1.8、1.7;杜梨幼嫩叶片、成熟叶片、韧皮部DNAOD260/OD280的比值分别为1.9、1.8、1.6。二者都能成功进行RAPD扩增,且扩增结果基本一致。利用CTAB法从鸭梨和杜梨的...
关键词：
梨属 不同部位 基因组DNA RAPD
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谭芳 杨荣仲 李松 莫磊兴 李翔
为提高甘蔗育种的选择效率,摸索简便科学的甘蔗蔗糖分分析方法。采用几种甘蔗蔗糖分分析方法,对各方法的相关系数和离差偏差进行分析。结果显示,用一次蒸煮法测定甘蔗蔗糖分得到的结果和常规方法作比较,相关系数达0.99以上,离差偏差0.11左右;用二次推算法测定甘蔗蔗糖分,相关系数在0.99~0.98之间,离差偏差在0.18~0.19之间;用一次推算法测定甘蔗蔗糖分,其相关系数达0.98以上,离差偏差在0.23左右。对不同的试验要求采用不同的分析方法,可提高甘蔗蔗糖分分析效率及育种选择效率。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李维平 赵文明 雷萍
为了从植物组织中快速提取核酸,从多种DNA提取方法中遴选出2种基本方法。通过优化基本方法的操作步骤、试剂用量与作用时间,建立了一种改良的DNA快速提取方法。在此方法中,用氯仿代替液氮或提取液进行植物组织研磨,之后加入提取液抽提DNA,并用氯仿-异戊醇反复抽提,可显著降低蛋白质含量;通过应用RNA酶可获得纯度较高的DNA。该方法的特点是在室温下即可进行简便操作,快速(提取核酸的过程仅需30min),污染器皿少,实用性强,提取物产量高,纯度好。
关键词：
DNA 提取方法 植物组织
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴杨 傅华英 赵书环 陈如凯 张木清
在甘蔗外植体再生体系的基础上,在甘蔗愈伤组织继代、胚性愈伤组织芽分化以及幼芽生根阶段的培养基中附加甘露糖,研究甘露糖对甘蔗外植体再生的影响,以确定用于甘蔗遗传转化筛选的最适浓度.结果表明,甘露糖对甘蔗茎尖愈伤组织诱导、愈伤分化和幼芽根形成均产生抑制作用.愈伤组织生长、分化、生根3个阶段的抗性筛选浓度分别为3-5、4-5和3 g.L-1.
关键词：
甘蔗愈伤 甘露糖 筛选体系
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张今今 张莹 李文燕
以桑科榕属植物为研究对象,利用改进的CTAB法提取基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,筛选了模板、Mg2+、Taq酶、dNTPs和随机引物的浓度及用量,建立了榕属植物RAPD技术分析体系。反应体系总体积为25μL,各组分浓度为:10×Buffer 2．5μL,Mg2+ 2．5 mmol/L,Taq DNA polymerase 0．06 U/μL,dNTPs 0．2 mmol/L,Primer 0．2 μmol/L．Template DNA 1．2 ng/μL。PCR循环程序为:94 C预变性4 min;94 C循环变性 1 min,36 C退火1 min,72 C延伸2 min,40个...
关键词：
榕属植物 DNA提取 RAPD 体系优化
[期刊] 西南农业学报
[作者]
经艳芬 边芯 郎荣斌 桃联安 董立华 朱建荣 周清明 安汝东 杨李和 孙有芳
为科学评价云瑞系列创新亲本及组合的育种潜力，文章以云瑞甘蔗创新亲本选配的３２个杂交组合为研究材料，分别应用Ｒ软件分析、灰色接近度评估、同异分析、模糊综合评判４种方法对参试组合有性世代主要工、农艺性状进行综合分析，并比较４种方法对杂交组合优劣评价的准确度、区分度、以及评价等级与杂种圃材料入选率高低的吻合程度，４种方法得出较为一致的结果：除６号组合外的１～９号组合均为优级、较优级，２９～３２号组合为较差级、差级；除少数组合外，评价等级的优劣与其杂种圃入选率的高低基本吻合；灰色接近度评估对组合的区分度好，但准确度较差；同异分析、模糊综合评判对组合的区分度、准确度均为最优或优，可作为甘蔗杂交组合评价优．．．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李文凤 王哓燕 黄应昆 王明强 卢文洁 罗志明
利用国外引进的甘蔗主要病害标准抗原抗体,建立了甘蔗细菌和病毒病害系统的血清及PCR检测方法和实验技术体系,可为种传甘蔗病害的有效诊断和防控、温水脱毒种苗生产及推广应用、对外甘蔗品种/材料交换检疫检测提供技术支撑。
关键词：
甘蔗 种传病害 脱毒种苗 检测方法
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
王玲玲 叶青雷 王学英 石生林 李群 尹迎礼
为了获取高质量的栎属植物基因组DNA,采用经过改良的SDS法和CTAB法对几种常见栎属植物进行基因组DNA的提取。结果表明:改进的SDS法和CTAB法都较常规的方法好,所提出的DNA较纯净。改进的CTAB法与改进的SDS法比较,改进的CTAB效果较好,所获得的DNA经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测,纯度较高,OD260/OD280为1.75～1.80,运用SSR和RAPD进行分析时,可以获得较好的扩增片段,说明蛋白质、多糖、RNA等去除较干净。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周倩 李兰芝 朱宏建 高必达
改进DNA提取方法,利用含2%CTAB、1%SDS、2%PVP、100mmol/LTris-Cl(pH8.0)、20mmol/LEDTA(pH8.0)和1.4mol/LNaCl的DNA提取缓冲液,提取了不同种属12种植物的DNA,并对其进行了PCR检测.结果显示,所提取的DNA符合PCR试验要求,用真核生物ITS4/ITS5通用引物均能扩增出清晰的条带.该方法无需酚仿抽提,简单、高效、环保,特别适合大规模植物DNA的提取.
[期刊] 西南农业学报
[作者]
卢文洁 李文凤 黄应昆 罗志明 王明强 王晓燕
本研究利用尿素混合液直接从甘蔗黑穗病菌孢子提取基因组DNA进行PCR检测鉴定,经过反复试验,建立了一种简便、快速的检测鉴定方法。利用建立的方法对12个甘蔗黑穗病样品进行病菌基因组DNA提取,将甘蔗黑穗病菌特异性引物进行PCR检测,均扩增出大小为420 bp的预期DNA片段条带。PCR扩增产物经克隆测序,与GenBank数据库中的甘蔗黑穗病病原菌序列比对,同源性达99%。
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