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[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘贝贝 张霄 谢雅晶 焦凌霞 刘媛 张存政 赵岩岩 武爱华 刘贤金
【目的】分析定位Ｂｔ Ｃｒｙ１类毒素Ｃｒｙ１ＡＢ、Ｃｒｙ１ＡＣ、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｃ、Ｃｒｙ１Ｆ的共性结构域，克隆并表达共性结构域蛋白，为筛选Ｂｔ毒素广谱抗体及建立广谱检测方法打下基础。【方法】利用生物信息学和分子模拟技术，通过ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ同源建模分别对５种Ｃｒｙ１类毒素进行三维建模，并结合ｒＡＭＡＣｈＡｎＤｒＡｎ ｐＬＯｔ、ＥｒｒＡｔ和ＶＥｒＩＦｙ３Ｄ方法评价模型构象的合理性。通过分析比对５种Ｃｒｙ１类毒素的三维结构，确定ＤＯＭＡＩｎⅠ区域作为５种Ｃｒｙ１毒素的共性结构域。以含Ｃｒｙ１ＡＣ基因的苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种为模板设计引物，ｐＣｒ扩增获得共性结构域ＤＯＭＡＩｎⅠ基因，．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张留圈 张霄 刘媛 徐重新 张存政 谢雅晶 寇莉萍 刘贤金
【目的】通过设计并优化生物素-亲和素标记磁珠筛选策略,建立针对Cry1Ac毒素的新型双抗夹心ELISA检测方法,为研究灵敏、快速的Bt毒素的检测方法建立一种新的检测模式。【方法】采用磁珠液相正负筛选方法,经过4轮筛选后,对每轮筛选后抗Cry1Ac毒素特异性结合噬菌体抗体的富集效果进行鉴定,通过单克隆ELISA方法从第4轮筛选得到的次级库中获得特异性结合Cry1Ac的阳性克隆,并对其进行PCR鉴定和DNA测序,确定有完整插入的scFv片段后进行后期相关试验。将相对结合活性最好的阳性克隆scFv-A12替换宿主菌HB2151中进行可溶性诱导表达并纯化。利用纯化后的scFv-A12作为"捕获抗体",...
[期刊] 财会通讯
[作者]
曹琦
作为BOT投资模式的一种演变形式，BT投资是政府利用非政府资金来进行基础非经营性设施建设项目的一种融资模式，其对缓解政府基础设施建设资金紧张问题、优化资源配置等方面均具有诸多积极影响。由于我国会计准则未对BT项目会计处理进行明确规定，进而导致不同企业的会计处理方式存在明显差异。随着BT业务的逐渐增多，出台专业会计准则、规范BT项目会计处理逐渐成为社会各界共同关注的问题。基于上述原因，在明确BT项目特点、分类及会计处理现状的基础上，本文结合案例对不同类型BT项目的会计处理方式进行深入分析，总结会计处理过程中存在的问题，并从会计准则规范、实务操作细节、会计人员培训等方面提出针对性的改进建议。
[期刊] 技术经济
[作者]
沈其明
本文给出了BT项目的概念、界定了BT项目各方、简要地分析了BT项目各方的合同关系、法律关系、经济关系和工作关系并给出了相应的关系图示。
关键词：
“BT”项目 各方 关系
[期刊] 西南农业学报
[作者]
常丽娟 宋君 刘文娟 张富丽 王东 尹全 雷绍荣
【目的】研究转Bt基因抗虫棉外源Bt蛋白表达的时空规律,明确Bt蛋白表达量和转Bt基因抗虫棉抗性的内在联系,更加有效降低靶标害虫危害。【方法】采用ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay)蛋白定量检测方法,以转Bt基因抗虫棉鄂抗虫棉1号(GK19)为研究材料,对转Bt基因抗虫棉不同组织器官、不同生长时期主茎功能叶和不同生长时期主茎不同叶位叶片的Bt蛋白含量进行检测。【结果】转Bt基因抗虫棉不同组织器官Bt蛋白含量存在差异,苗期叶片最高,花、蕾、铃次之,根、茎较低;不同
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘兴龙 程林友 李天龙 李长友 李国勋
根据已知Btcry8类基因的全长序列设计一对特异性引物JJX5和JJX3,以Bt菌株B-DLL的质粒DNA为模板扩增出3.5 kb大小的片段;将该片段插入大肠杆菌表达载体pET-21b中,并完成了该片段的全序列测定。该基因编码区为3 495 bp,编码的蛋白质由1 164个氨基酸残基组成,相对分子质量为131.8 kDa,等电点为pH 4.71,为弱酸性蛋白。该基因(GenBank:EU047597)编码的氨基酸序列与Cry8Ea1的氨基酸序列同源性高达99.31%,被国际Bt基因命名委员会正式命名为cry8Ea2。经IPTG诱导后该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中能够正常表达130 kDa...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周晓梅 沈晋良 高聪芬
用EnvirologixCry1Ab/Cry1Ac平板试剂盒检测了两种转Cry1Ac基因的棉花品系 (NUCOTN33B、NUCOTN99B) 以及常规对照品系 (苏棉 12) 不同生育期主茎嫩叶、侧枝嫩叶、蕾及蕾的苞叶中杀虫蛋白Cry1Ac的含量。结果表明, 两种转Bt基因棉主茎嫩叶杀虫蛋白Cry1Ac的含量随生育期的推移呈明显下降趋势, 花铃期 (NUCOTN33B和NUCOTN99B分别为 4 43和 2 93μg·g-1 ) 和吐絮期 (3 87和 2 86μg·g-1 ) 的含量分别降至苗期第 6叶 (7 64和 8 38μg·g-1 )的 58%、35%和 51%、34%; 相同时...
[期刊] 财会通讯
[作者]
孙丽丽 张娜
本文结合江阴芙蓉大道BT项目的实际案例,探讨了BT类项目在实际运作过程中存在的问题,并从内部审计的角度,构建了一套适合该类投资项目的审计体系及审计方法。本文的研究有助于发挥内部审计在BT类项目运作实施过程中的监督、风险控制作用,提高该类项目的运作水平。
关键词：
BT投资项目 内部审计 审计体系
[期刊] 财会通讯
[作者]
孙丽丽 张娜
本文结合江阴芙蓉大道BT项目的实际案例,探讨了BT类项目在实际运作过程中存在的问题,并从内部审计的角度,构建了一套适合该类投资项目的审计体系及审计方法。本文的研究有助于发挥内部审计在BT类项目运作实施过程中的监督、风险控制作用,提高该类项目的运作水平。
关键词：
BT投资项目 内部审计 审计体系
[期刊] 技术经济
[作者]
沈其明
根据实际采用的BT(建设-转让)项目模式情况,将其归纳为五种模式;对每种模式项目的建设参与各方的责任进行了简要概括;以有关的法律、法规为依据,对采用的BT项目模式的合规性进行了分析;可作为选择BT项目模式时参考。
[期刊] 建筑经济
[作者]
张丽 沈杰
资金成本是BT项目回购价款中的重要组成部分,对资金成本的管理是BT项目中项目管理的一个重点。本文阐述了BT项目中的资金成本涵义和其形成,分析了资金成本的影响因素和计算方法,并对加强资金成本管理提出一些建议。
[期刊] 建筑经济
[作者]
张桂萍 申玲
分析了进行BT项目投资控制的必要性,界定了BT项目投资成本的范围和阶段。根据BT项目的特点,把BT项目运行的过程分成项目决策阶段、项目准备阶段、项目招标阶段、项目实施阶段(设计阶段、施工阶段)、项目转让阶段,从全过程的角度探讨了BT项目的投资控制。
关键词：
BT项目 全过程控制 投资控制
[期刊] 中国农业科学
[作者]
朱莉 郎志宏 李桂英 何康来 岳同卿 张杰 黄大昉
【目的】建立一套高效、稳定的甜高粱农杆菌遗传转化体系,并在甜高粱中验证来源于苏云金芽胞杆菌新型杀虫基因cry1Ah表达产物的杀虫活性。【方法】以甜高粱幼穗愈伤组织为转化受体,通过农杆菌介导法将密码子优化过的Bt cry1Ah导入2个甜高粱品种"BABUSH"和"MN-3025"中。对获得的再生植株进行PCR检测、RT-PCR分析及除草剂抗性、目的蛋白表达水平和抗虫性鉴定分析。【结果】对336块幼穗愈伤组织块进行了农杆菌侵染,经双丙氨膦(Bialaphos)梯度筛选后共获得66株再生植株,PCR鉴定在8个转化事件中有22株为阳性植株,平均转化率为2.38%。RT-PCR检测结果表明,cry1Ah...
关键词：
甜高粱 cry1Ah 农杆菌转化 抗虫性
[期刊] 华北农学报
[作者]
安世恒 郭线茹 罗梅浩 蒋金炜 马继盛
利用RT-PCR技术扩增烟夜蛾(HelicoverpaassultaGuen啨e)幼虫中肠Bt毒素Cry1Ac受体蛋白APN(N-氨基肽酶,aminopeptidaseN,APN)基因片段,克隆和测序结果表明,测序得到的812bp的片段编码270个氨基酸残基,且该片段在阅读框内。通过同源性分析发现,其核苷酸序列与棉铃虫(H.armigera)、澳洲棉铃虫(H.punctiger a)、烟芽夜蛾(H.virescens)、舞毒蛾(Lymantriadispar)、小菜蛾(Plutellaxylostella)、印度谷螟(Plodiainterpunctella)RC688品系和HD198品系、烟...
关键词：
烟夜蛾 Bt 受体蛋白 cDNA 克隆
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
孙立洋 李静 袁虎威 姚景涵 李伟 陈晓阳
为探讨Bt-BADH-GA20ox-rolB多基因转化烟草中外源基因的表达情况及对转化植株的影响,对转多基因烟草及对照植株进行了生理生化试验,包括内源激素含量测定、耐盐性试验、Bt毒蛋白测定、移栽后植株生长的观测。结果表明:转基因植株生根能力强,根、茎、叶各部位内源激素(IAA、GA3)与对照差异明显;在低浓度NaCl下,转基因和对照植株生长差异不明显,当NaCl浓度达到300mmol/L时,对照生长受到抑制,转基因植株生长正常;在转基因植株的茎、叶中均检测到高浓度的Bt毒蛋白,以叶片饲喂斜纹夜蛾幼虫明显抑制其发育。移栽后的转基因植株高生长更加明显,苗高和地茎分别为对照的1.61和1.37倍。
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