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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 周艳琴  姚宝安  夏雪山  赵俊龙  孙明  喻子牛  
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 周艳琴  姚宝安  夏雪山  赵俊龙  孙明  喻子牛  
将人工感染日本血吸虫尾蚴 45d的家兔主动脉灌注冲虫获得成虫 ,经Earle’s液洗涤 ,加入细胞培养板内 ,用含 10 %牛血清的RPMI 16 40培养液于 37℃、5 %CO2 培养箱中培养 ,苏云金杆菌B 0 0 1、E 0 0 2提取的伴胞晶体毒素 ,以不同浓度加入到各孔中。 2 4h后成虫运动缓慢 ,并有部分死亡 ,随着伴胞晶体毒素作用时间的延长 ,成虫的死亡率也增加。当毒素总蛋白含量为 117.2 9μg/ml时 ,经菌株B 0 0 1晶体毒素作用的成虫死亡率在2 4h时为 87.74% ,48h时为 10 0 % ,LD50 分别为 2 1.42 μg/ml、9.77μg/ml...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 沈丽琳  陈伟华  史晓丽  包鸿俊  
采用放射受体分析方法测定日本血吸虫体内γ─氨基丁酸(GABA)受体.试验证实:日本血吸虫体内存在GABA受体,其最大结合容量(Bmax)为30.58±10.19fmol/mg蛋白,Kd值为10.72±6.26pmol;Scatchard图曲线下凹,说明GABA受体与配体GABA之间有较大结合容量和较高的亲和力,但其结合又可能存在不均一性和复杂性.
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 余祖功  包鸿俊  
用反相离子对色谱和同位素示踪技术研究了日本血吸虫体内5-HT的定量、合成与降解。结果表明:日本血吸虫体内5-HT的含量为2.92±0.29μg/g。雌、雄虫分别为2.57±0.35和3.32±0.19μg/g。用3H-Try培养虫体,由HPLC分离收集,经液闪测定,有3H-5-HTP、3H-5-HT、3H-HIAA生成;分别用3H-5-HTP和3H-5-HT培养虫体,则有3H-5-HT、3H-5-HIAA和3H-5-HIAA生成。异丙异烟肼能增加虫体内5-HT的含量和降低5-HIAA的水平,而对氯苯丙氨酸,反苯环丙胺,赛庚啶等对虫体5-HT含量均无影响。以上结果显示:日本血吸虫体内存在5-HT...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王祥  姚宝安  
苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体毒素对捻转血矛线虫第2期幼虫的毒力王祥,姚宝安(华中农业大学畜牧兽医学院,武汉430070)关键词苏云金芽胞杆菌,伴胞晶体毒素,捻转血矛线虫,第二期幼虫THETOXICITYOFBacillusthuringiensisCRY...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 姚利晓  林矫矫  傅志强  朱传刚  李浩  陆珂  刘金明  石耀军  沈阳  蔡幼民  
目的筛选克隆东方田鼠血清识别的日本血吸虫靶抗原基因,并研究其免疫保护效果。方法利用东方田鼠感染血清免疫筛选日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA表达文库获得阳性克隆,以5′RACE技术扩增获基因全长序列,构建含目的基因的核酸疫苗并研究在小鼠中的免疫保护效果。结果(1)获得4个日本血吸虫新的EST序列,即mfs-1(GenBank登录号BE974942)、mfs-3(GenBank登录号BE974944)、mfs-4(GenBank登录号BE974945)和mfs-5(GenBank登录号BE974946)。(2)mfs-5进行全长序列克隆,获得的日本血吸虫新基因SjPP(GenBank登录号AY...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 周智君  唐连飞  黄复深  曾宪芳  易新元  
为观察日本血吸虫合成表位多肽疫苗诱导的保护性免疫,将用日本血吸虫抗原免疫血清筛选噬菌体随机12肽库得到的、具有较好免疫保护性的4个模拟抗原表位短肽进行人工合成,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测它们的抗原性.将合成多肽分别与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)连接后免疫昆明小鼠,第3次免疫后收集血清,检测其针对各个多肽和可溶性成虫抗原(AWA)的IgG抗体滴度,以及补体介导的小鼠体外杀日本血吸虫童虫作用.结果显示,4个合成多肽均能被相应的抗体识别,具有良好的抗原性;能诱导产生特异性IgG抗体.这些抗体在补体参与下能在体外有效毒杀血吸虫童虫.与正常小鼠血清比较,4个合成多肽免疫血清的杀童虫率分别为31.7...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 吴佳  包鸿俊  
用高压液相色谱技术(HPLC)和同位素示踪技术确认日本血吸虫体内含有谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)和琥珀酸(SA)。GABA的含量为12.70±3.27μg/g(以虫湿重计)。虫体具有摄取外源性GABA的能力。虫体不能将3H-GIA转化为3H-GABA,也不能将3H-GABA转化为3H-SA。初步表明:虫体内GABA的合成和降解与哺乳动物体内由Glu→GABA→SA的代谢过程不同。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 郑新生  姚宝安  王艳蕊  段存争  
考察吡喹酮在不同溶媒中的溶解度、稳定性和对小鼠的刺激性,研制出了200 mg/mL的吡喹酮注射剂。用此注射剂对人工感染日本血吸虫22 d后的小鼠进行了肌肉注射治疗试验。结果表明:200 mg/mL吡喹酮注射剂对日本血吸虫病小鼠的治疗效果良好,减虫率可达100%。该注射剂在室温自然条件下避光保存8个月或在80℃恒温24 h,其颜色及吡喹酮的浓度均无变化。小鼠注射给药部位没有炎症和组织坏死变化。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 杨光友  底思军  
在中国家禽体内现已发现14科42属174种吸虫.其中,寄生于鸡的吸虫有11科22属61种;寄生于鸭的吸虫有14科41属共154种;寄生于鹅的吸虫有11科25种共69种.
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王丽平  史晓丽  沈丽琳  
采用肉眼观察法测定不同5-羟色胺(5-HT)受体拮抗剂对日本血吸虫运动性的影响。结果表明:(1)10-3mol/L和10-4mol/L的5-HT作用虫体30min后,虫体运动显著增强,而10-5mol/L时,虫体运动稍有增强。10-3mol/L色胺(tryptamine)也可显著增强虫体运动,但10-4mol/L、10-5mol/L时,作用则不显著。(2)用10-3mol/L赛庚啶(cyproheptadine)、曲拉唑酮(trazodone)、米安舍林(mianserin)、螺环哌啶酮(spiroperidol)、氟哌丁苯(haloperidol)作用虫体1h后,除haloperidol外,...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 刘金明  王美  叶萍  傅志强  蔡学忠  石耀军  陈永军  林矫矫  林邦发  施幅恢  
免疫刺激复合物(ISCOM)是 Morein 创立的一种疫苗免疫载体,其中的主要佐剂成分是 Quil A(皂素的一种成分).本研究首先用日本血吸虫中国大陆株成虫可溶性租抗原(SWA)作为免疫抗原,按改进方法结合皂素制备 ISCOM,对其在小鼠体内诱导的免疫保护力和 SWA 在 FCA/FIA、蜂胶二种佐剂条件下的免疫保护力进行了比较研究,然后对不同剂量 SWA-ISCOM 的免疫效果进行考察;最后对重组日本血吸虫中国大陆株28kD GST(rSj28GST)-ISCOM 在小鼠体内所诱导的免疫保护力进行观察.结果表明 IS-COM 在进一步应用于各种基因工程苗方面有研究价值。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 江善祥  包鸿俊  戎耀方  沈丽琳  
用 HPLC 及~3H-GA 和~3H-GABA 示踪技术,确认了肝片吸虫体内 GABA 及其前体 GA 和降解产物SA.其生物合成与降解的途径与哺乳动物相类似,酶的特性也与哺乳动物相应的酶相似.虫体内的 GABA来源除自身合成外,还能从周围环境中摄取。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 黄世乐  
应用间接免疫荧光技术,发现肝片形吸虫头部咽的两侧各有一强的5-羟色胺(5-HT)荧光集落(脑神经节),由其发出的神经干分布于虫体的背腹及两侧,神经干继续发出细小分支直至皮肌层和吸盘等.生殖系统(睾丸、卵巢、子宫、卵模和卵黄腺纵隔等)和消化系统(咽和肠管壁等)亦有5-HT 免疫反应分布.揭示肝片形吸虫体内不仅存在5-HT,而且存在色胺能神经系统,证明了5-HT 为肝片形吸虫的神经递质.
[期刊] 华北农学报  [作者] 付月君  杨仁佳  梁爱华  
利用SWISS-MODEL服务器对BmK IT毒素进行三维结构同源建模,结果表明,BmK IT三维构象与BmK IT-AP、Bj-xtr IT、BmKβIT在二级结构的排列顺序和空间结构上相似,并且这四者的C末端对于蝎昆虫神经毒素特异作用于昆虫钠离子通道至关重要。根据表面静电势分析,推断在果蝇的钠通道D2区的一个额外涉及兴奋性蝎抗昆虫毒素对该通道的选择性识别的区域应呈现正电势。接着,采用Hampton Research公司的晶体生长试剂盒中的50个缓冲液配方筛选BmK IT的结晶条件,在温度为28℃,缓冲液配方为0.1 mol/L磷酸二氢钾、0.1 mol/L一水合磷酸二氢钠、0.1 mol/...
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