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[期刊] 水产学报
[作者]
许青松 李兵 杨冰慧 马金龙 洋雯 曲琛
Akt作为PI3K-AKT 信号通路的核心分子，在细胞增殖、代谢、发育和存活等过程中发挥重要作用。本研究采用特异性引物及PCR技术，克隆获得了中华绒螯蟹Akt基因（EsAkt）并进行生物信息学分析，实时定量PCR技术检测了EsAkt在中华绒螯蟹不同组织和不同免疫刺激后的表达水平，免疫荧光技术检测了EsAkt蛋白的细胞定位，双链RNA干扰技术分析了EsAkt干扰后凋亡基因的变化。结果显示，EsAkt分子包含PH结构域、中心催化结构域（S＿TKc）和羧基端疏水结构域（S＿TK＿X）3个保守的结构域。EsAkt在所有被检测的组织中呈现组成型表达，且在免疫相关组织（如肝胰腺、鳃和血淋巴细胞）中的表达量显着高于胃和肠道（P < 0.01）。EsAkt蛋白主要以弥散状的形式分布在细胞质中。中华绒螯蟹注射脂多糖（LPS）和嗜水气单胞菌后，显著诱导EsAkt转绿本的表达，LPS免疫刺激12 h后，EsAkt响应达到峰值，为对照组的4.35倍（P < 0.01），刺激48 h后，EsAkt的mRNA表达水平有所降低，但仍是对照组2.62倍（P < 0.01）；嗜水气单胞菌免疫刺激6 h后，EsAkt响应达到峰值，为对照组的9.05倍（P < 0.01），刺激48 h后，EsAkt的mRNA表达水平回落到正常水平。双链RNA干扰EsAkt后，EsAkt的mRNA表达水平为对照组的0.38倍（P < 0.05），而凋亡相关基因EsCaspase-3-like表达水平显著上调，为对照组的2.69倍（P < 0.05）。本研究丰富了中华绒螯蟹PI3K-AKT信号通路研究的基本资料，为进一步研究甲壳动物免疫防御机制奠定了基础。
[期刊] 水产学报
[作者]
洪宇航 杨筱珍 成永旭 徐敏杰 黄根勇 杨志刚 黄毅
为了解中华绒螯蟹血细胞组成、分类及其在免疫应答过程中起到的重要作用,本研究通过细胞化学和细胞酶学分析,并结合细胞形态观察,对中华绒螯蟹血细胞的组成、分类进行了研究。同时,通过人工感染嗜水气单胞菌后血液的总血细胞数(THC)和不同类型血细胞数(DHC)的变化,研究不同类型血细胞在免疫应答过程中所发挥的作用。结果显示,依据本实验分类方法,中华绒螯蟹血细胞可以分为4类:大颗粒细胞(G)、中间型颗粒细胞(IG)、小颗粒细胞(SG)和透明细胞(H)。其中小颗粒细胞数量最多,约占33.54%±0.98%,中间型颗粒细
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
袁滢滢 吴朝霞 孙文涛 黄姗 范翠翠
分别用0.24、0.48、0.72、0.96、1.20g/L的尿素溶液饲养中华绒螯蟹幼蟹7d,测定幼蟹血清中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽-S转移酶(Glutathione-S transferase,GST)的活性和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的含量。结果表明,随着时间的延长,各浓度组中华绒螯蟹幼蟹血清中上述3种酶的活性逐渐下降,丙二醛含量逐渐上升;随着浓度的增加,3种酶活性有逐渐下降的趋势,但0.24g/L尿素浓度组中华绒螯蟹幼蟹血清中超氧化物歧化酶活性和0.96g/L浓度组中华绒螯蟹...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
马贵华 钟青 曹义虎 陈道印
研究了在自然状态下中华绒螯蟹成蟹血淋巴和大眼幼体组织匀浆上清液中溶菌酶的活性。结果表明,在中华绒螯蟹成蟹血淋巴中均检测出溶菌酶的活性,为(0.0286±0.0081)活力单位(n=30),而在中华绒螯蟹大眼幼体组织匀浆上清液中亦检测到溶菌酶的活性,为(0.0318±0.0073)活力单位(n=4)。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
马贵华 陈道印 刘六英 钟青
用α-苯基苯并吡喃作为饲料添加剂饲喂中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)10 d后,测定了其对中华绒螯蟹血淋巴细胞中相关免疫因子的影响。实验设3个α-苯基苯并吡喃添加重复组,分别为A组(2 mg/kg)、B组(4 mg/kg)、C组(6 mg/kg)和1个对照重复组(0 mg/kg)。结果表明:α-苯基苯并吡喃添加剂量为4 mg/kg(B组)可显著地提高中华绒螯蟹血淋巴细胞中酚氧化酶(PO)、溶菌酶(LSZ)和超氧化物歧化酶(SOD)的活力(P<0.05),说明具有生物活性的α-苯基苯并吡喃可刺激中华绒螯蟹机体免疫相关酶活性的提高。
[期刊] 水产学报
[作者]
李义 吴婷婷 谭夕东
为测定在饲料中添加左旋咪唑(LMS)对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的免疫调节作用,以0(对照)、100、200和300 mg·kg~(-1)干饲料的剂量将LMS添加于基础饲料中制成颗粒饲料,投喂中华绒螯蟹7 d,然后投喂不含LMS的对照组饲料。在投喂含LMS的饲料之前(0周)和投喂后2、4、6、8周,采样测定中华绒螯蟹的血细胞总量(THC)、不同血细胞数量(DHC)、吞噬活性、呼吸爆发(超氧阴离子的释放)、酚氧化酶(PO)活性和溶菌酶(LSZ)活性;并在投喂含LMS的饲料后的第4周,按1.2×10~7cfu·kg~(-1)体重的剂量,体腔注射接种中华绒螯蟹致病性嗜水气单胞...
[期刊] 水产学报
[作者]
王瑞芳 庄平 冯广朋 章龙珍 黄晓荣 贾小燕
采用逐步增盐法,结合生物酶学测定,研究了从淡水升高盐度到7、14、21、28和35对二秋龄雌、雄中华绒螯蟹血清总蛋白、氧合血蓝蛋白含量及碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)活力的影响。结果显示,随着盐度的升高,中华绒螯蟹的血清总蛋白、氧合血蓝蛋白含量逐渐降低;AKP活性先略升高,而后逐渐降低;与雄蟹的PO活力逐渐降低相比,雌蟹的PO活力先降低,当盐度高于21后维持稳定水平;SOD活性先略降低,盐度高于21被激活。除SOD外,雌蟹血清各测定指标均显著高于雄蟹(P<0.05)。研究结果表明,盐度接近或超过28将显著影响中华绒螯蟹3种免疫酶的活性及总蛋白和氧合血蓝蛋白的含...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
孙汉 李义 王玥 郭明凯 俞泉宇
测定了不同pH(4.5,6.0,7.5,9.0,10.5)胁迫1、4、7、10 d后中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血细胞呼吸爆发(RP)、血细胞破碎物上清液(HLS)酚氧化酶(PO)、血清溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)及碱性磷酸酶(ALP)活性的变化。结果表明:在pH胁迫后第1天,pH 4.5组的RP活性显著高于对照组(pH 7.8)和碱性胁迫的3个组,pH 6.0组的PO活性显著高于对照组、pH 7.5组和pH 9.0组,pH 10.5组的ACP活性显著高于对照组,pH 6.0组的ALP活性显著高于对照组和碱性胁迫的3个组(P<0.05);在pH胁迫后第7天,pH...
[期刊] 水产学报
[作者]
艾春香 陈立侨 刘晓玲 高露姣 温小波
通过在以鱼粉、豆粕、玉米粉和麦麸为主要原料配制而成的每100g基础饲料中分别添加0、250、500、1000、1500mg的VC(以VC多聚磷酸酯为VC源)配制5种试验饲料,对均重为(37.52±2.19)g的中华绒螯蟹进行为期60d的饲养试验,以酚氧化酶(PO)、抗菌力(Ua)、溶菌酶(UL)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)和酸性磷酸酶(ACP)等指标为判据,研究VC对中华绒螯蟹体液免疫因子的影响。结果表明,VC对中华绒螯蟹各组织器官中PO、Ua、UL、SOD、AKP和ACP等活性有显著或极显著的影响(P<0.05或P<0.01),在适宜范围内,随着VC添加量的增加,PO、U...
关键词：
中华绒螯蟹 维生素C 非特异性免疫
[期刊] 中国水产科学
[作者]
洪美玲 陈立侨 顾顺樟 刘超 龙章强 张伟
以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)为研究对象,蟹初始体质量为(71.25±1.13)g。设计对照组(不额外添加氨氮,水中本底氨氮质量浓度约为1 mg/L)、低浓度组(10 mg/L NH4Cl)、中浓度组(50 mg/L NH4Cl)、高浓度组(100 mg/L NH4Cl)4种不同的氨氮质量浓度,分别于胁迫的第1天、3天、5天、15天抽取血淋巴进行相关免疫指标测定,并观察氨氮胁迫15 d后对肝胰腺组织结构的影响。结果表明:(1)3个处理组的血细胞密度(DHC)在胁迫初期(第1天和第3天)均显著低于对照组(P<0.05);在胁迫第5天,各组血细胞密度均升至最高;但至第15天时...
关键词：
氨氮胁迫 中华绒螯蟹 免疫指标 B细胞
[期刊] 水产学报
[作者]
邱高峰 吴萍 楼允东
应用组织切片、组织化学、电镜及体外培养技术研究了中华绒螯蟹促雄腺的结构与功能。结果表明 ,中华绒螯蟹促雄腺 1对 ,呈不规则索状 ,位于近阴茎基部射精管的表面 ,由许多实心腺泡组成 ;腺体结构与个体精巢发育周期密切相关 ,可明显划分为增殖期、合成期和分泌期 3个发育时期 ;腺细胞以全浆方式分泌激素 ,茚三酮———Schiff反应、磷钼酸法反应呈阳性 ,推断分泌激素中主要含蛋白质和脂类 2种化学成分 ;体外共培养实验证明 ,促雄腺具有促进精子发生与排放及抑制卵母细胞成熟的功能。
关键词：
中华绒螯蟹 促雄腺 结构 功能
[期刊] 中国水产科学
[作者]
宣富君 鲍成满 付龙龙 张悦 王刚 王坤 张建光 唐伯平 管卫兵 成永旭
为增强对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)交配过程的认识，利用急速冷冻、扫描电镜、组织学等技术，对其交配系统的形态功能进行了观察研究。结果表明：中华绒螯蟹交配系统具有短尾派蟹类的典型特征，属于雄性G1长型。G1整体粗壮光滑，由链接腹部的原肢和内肢组成。内肢长而挺直，呈三角柱状，两侧边缘融合而成一缝合沟，内含输精管道，纵贯两端；基部背面近内侧开口比较大，外侧上覆盖1带羽状刚毛的肉状瓣膜，交配时阴茎可伸入(或通过瓣膜)开口的外侧部分；顶端含一类似火山口的通道，四周布满刚毛。G2整体细小，呈帆状，顶端内陷，上附4根透明状修长刚毛。G1/G2内肢管壁厚度不一，协作部分段近输精通道一侧均存在较薄管壁，具有一定收涨能力，交配时可封闭输精通道；G1内肢内部大部分中空，G2可深入部分以上存在含液滴的疏松结缔组织，且管壁内侧出现连接官腔的通道，可以推断此处精液和G1官腔积液可能存在某种形式的交流，而后半段出现肌肉组织。雌性阴门覆盖一光滑厚实的阴盖，可与所在胸节连接的关节左右摆动，由此控制阴门开合。阴道呈半月型，管壁较厚的一侧契入另一侧，且契入一侧附有厚实的肌肉束。由此可以推断，中华绒螯蟹交配时G1并没有直接插入雌蟹的生殖道内，而是与阴门及周边胸板直接契合，通过与G1共同进化出“对接状”的交配系统，以保障精荚精液等雄性产物成功通过阴道输入纳精囊内储存。本研究阐述了中华绒螯蟹交配系统潜在的内在协作机制，丰富蟹类授精生物学知识，可以为今后开展河蟹遗传育种及人工授精等相关工作提供理论和技术支持。
关键词：
中华绒螯蟹 交配系统 生殖肢 阴道
[期刊] 水产学报
[作者]
田志环 焦传珍 成永旭 吴旭干
为研究Akt基因在中华绒螯蟹蜕壳前后肌肉生长过程中的功能,应用RACE技术克隆得到编码中华绒螯蟹Akt(命名为Es Akt)的全长为2 200 bp的c DNA序列,包括159 bp的5′非翻译区(5′-UTR)、496 bp的3′非翻译区(3′-UTR)和长度为1545 bp编码514个氨基酸的编码序列。蛋白质结构域分析显示Es Akt含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的3个特征性保守结构域。多序列比对和系统发育分析显示,Es Akt与中国明对虾、凡纳滨对虾的Akt序列一致性都为0.889,在系统发育树中节
[期刊] 水产学报
[作者]
许晨远 迟骋 郑肖川 刘佳岱 张彩燕 刘文斌 刘艳玲 闫亚楠 黄健 王胜
为研究发酵饲料配伍配合饲料投喂对中华绒螯蟹幼蟹生长性能、抗氧化、免疫机能和代谢的影响,实验分别制备了5组饲料:对照组以幼蟹配合饲料为基础饲料(F0),各实验组在配合饲料基础上额外添加日投喂量5%、10%、15%和20%发酵饲料,并依次命名为F5、F10、F15和F20。150只均重无显著差异的中华绒螯蟹随机分5组,每组设3个重复,每重复10只蟹,分别饲喂对应组饲料,每天饱食投喂1次,养殖周期59 d。在养殖结束后采集血淋巴和肝胰腺以测定抗氧化指标、免疫指标和蛋白代谢酶活性。结果发现,额外投喂发酵饲料后,各组幼蟹的增重率和特定生长率均较对照组显著升高。随着额外投喂发酵饲料量的增加,血淋巴中过氧化氢酶含量先上升后下降,其中F5、F10和F15组较对照组显著升高。各处理组酸性磷酸酶活性高于对照组,但差异不显著。各组总蛋白和球蛋白含量随着发酵饲料额外投喂量提高呈现先升高后降低的趋势,但是各组间差异不显著。此外,额外添加日投喂量20%比例以下的发酵饲料,可以提升肝胰腺中胰蛋白酶、胃蛋白酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶活性。研究表明,额外投喂发酵饲料可以促进中华绒螯蟹幼蟹的生长,还可以提高其抗氧化能力、免疫机能和蛋白代谢能力。
[期刊] 水产学报
[作者]
肖昌伦 孙云飞 鹿珍珍 成方舟 成永旭
为研究越冬期间投喂不同饵料对中华绒螯蟹扣蟹存活、营养组成、消化及免疫力的影响，实验比较了越冬期间不投喂(NF组)、投喂配合饲料(CF组)以及投喂冰鲜鱼(CTF组)对扣蟹存活率、营养组成、消化酶、抗氧化酶和免疫酶活性的影响。每个处理3个重复，实验周期为70 d。结果显示：(1)越冬过后，CF组和CTF组扣蟹的增重率和肝胰腺指数显著高于NF组，三组间存活率无显著差异。(2)越冬过后，CF组和CTF组扣蟹躯体和肝胰腺中脂肪和碳水化合物含量显著高于NF组，CF组扣蟹躯体和肝胰腺碳水化合物含量显著高于CTF组，NF组扣蟹肝胰腺水分显著高于CF组和CTF组。无论投喂与否，越冬过后躯体蛋白质含量显著下降，肝胰腺中蛋白质含量显著增加。(3)脂肪酸组成，CF组扣蟹躯体和肝胰腺中C18:2n6 (LA)含量显著高于NF组和CTF组，而CTF组C20:5n3(EPA)和C22:6n3 (DHA)含量显著高于NF组和CF组。(4)越冬过后，扣蟹CF组胃蛋白酶(pepsin)和α-淀粉酶(α-AMS)活性显著高于NF组和CTF组。(5)扣蟹抗氧化能力，肝胰腺和血淋巴中NF组超氧化物歧化酶(SOD)显著高于CF组和CTF组，CF组总抗氧化能力(T-AOC)活性显著高于NF组和CTF组，CTF组扣蟹血淋巴和雌性扣蟹肝胰腺丙二醛(MDA)含量显著高于NF组和CF组。(6)扣蟹免疫能力，CF组酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性显著高于NF组。研究表明，中华绒螯蟹扣蟹越冬期间应适量投喂饵料，投喂配合饲料组扣蟹的存活率、肝胰腺指数、增重率以及营养物质积累优于投喂冰鲜鱼组，且投喂配合饲料有利于扣蟹消化，增强扣蟹抗氧化和免疫能力。本研究为中华绒螯蟹扣蟹越冬饵料的合理投喂提供科学参考和理论基础。
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