【目的】β-半乳糖苷酶是一类参与细胞壁降解的糖苷酶,在植物的生长发育和果实成熟软化过程中发挥重要作用。通过对猕猴桃2个β-半乳糖苷酶基因的鉴定及其表达模式研究,明确它们在猕猴桃果实软化中的作用,丰富猕猴桃的后熟软化机理研究。【方法】以‘米良1号’猕猴桃为试材,采用RT-PCR法扩增果实的β-半乳糖苷酶基因,利用在线数据库分析其编码蛋白的特性、功能结构域、系统进化关系、基因结构和调控miRNA,应用qPCR研究其在不同组织部位、果实的不同软化时期、不同贮藏温度和ABA处理后的表达特征,并结合酶活性变化,阐释这2个β-半乳糖苷酶基因在猕猴桃果实软化中的作用。【结果】克隆得到2个猕猴桃β-半乳糖苷酶基因(Adβgal-1和Adβgal-2),登录号分别为MH319788和MH319789。Adβgal-1的开放阅读框为2 280 bp,编码759个氨基酸;Adβgal-2的开放阅读框为2 025 bp,编码674个氨基酸。结构域分析显示,Adβgal-1和Adβgal-2均含有植物糖苷水解酶家族35的功能结构域(Glyco_hydro_35)。基因结构分析表明,Adβgal-1由18个外显子和17个内含子组成,而Adβgal-2由17个外显子和16个内含子组成。进化树分析显示它们位于两个不同的进化分支中,且序列差异较大,可能源自不同的基因祖先。qPCR分析结果表明,Adβgal-1和Adβgal-2在猕猴桃的各组织部位(根、茎、叶、花、幼果、成熟果)均有表达,但表达水平不同;它们均在果实软化初期上调表达,随着果实硬度的下降,表达量持续增加;在25℃贮藏过程中,它们均在3 d时上调表达,随着时间的推移,表达量增加;而在4℃贮藏过程中,Adβgal-1的表达受到抑制,Adβgal-2的表达呈波浪式;ABA处理诱导Adβgal-1和Adβgal-2的表达。酶活性测定结果显示,β-半乳糖苷酶活性在果实软化初期略有降低,随着果实硬度的下降逐渐升高。【结论】Adβgal-1和Adβgal-2均参与猕猴桃果实的软化进程。不同贮藏温度和ABA处理对猕猴桃果实软化的影响可能是通过改变β-半乳糖苷酶基因的表达而实现的。

为探讨MYB基因在‘红阳’(Actinidia chinesis‘Hongyang’)猕猴桃果实着色过程中的重要作用,利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)结合快速扩增cDNA末端(RACE)技术克隆了‘红阳’猕猴桃的一个MYB转录因子基因。该基因的cDNA全长962bp,序列包含一个666bp的开放阅读框(ORF),编码221个氨基酸残基的蛋白质,其N端具有2个典型的MYBDNA结合域。同源性分析显示,该酶的氨基酸序列与矮牵牛、葡萄、番茄、金鱼草等植物中花青素途径相关的MYB转录因子基因的相似性都达到80%以上。实时荧光定量PCR分析结果显示,AcMYB在‘红阳’猕猴桃中的表达量与花青素含...

为了提高ＭＤＣＫ细胞表面禽流感病毒（ＡＩＶ）受体的水平，以１２日龄的ＳＰＦ鸡胚为试材，通过反转录ＰＣＲ扩增唾液酸转移酶Ⅰ基因（Ｓｔ３ｇＡｌⅠ），并将回收的片段插入到ＰＭＤ１８－ｔ载体中。酶切ＰＭＤ１８－ｔ－Ｓｔ３ｇＡｌⅠ和ＰＣＩ－ｎｅｏ质粒，将目的片段进行连接，构建含有Ｓｔ３ｇＡｌⅠ基因的真核表达载体。利用脂质体介导法转染ＭＤＣＫ细胞，在ｇ４１８的筛选下，获得具有抗性的转基因细胞系。通过细胞克隆化培养和ＰＣＲ检测，筛选可稳定表达Ｓｔ３ｇＡｌⅠ基因的细胞株。结果表明，从鸡胚中克隆的Ｓｔ３ｇＡｌⅠ基因成功的插入到ＰＣＩ－ｎｅｏ质粒，从而实现真核表达载体ＰＣＩ－ｎｅｏ－Ｓｔ３ｇＡｌⅠ的构建。在ｇ４１．．．

本文综述了猕猴桃中的PME，PG在果实软化中的作用、分离提纯、性质和活力测定方法，以及这两种酶的抑制因子等方面的研究进展。PME与猕猴桃果实的软化无直接关系，可能是通过为PG准备作用底物而起间接的促进软化的作用。猕猴桃果实内PME的抑制因子是一种糖蛋白，仅对PME有专一性的抑制作用。猕猴桃采后PG活性的上升促进果胶物质的水解是导致猕猴桃果实软化的重要原因。猕猴桃果实中存在一种专一性的猕猴桃蛋白酶（Actinidin），能抑制PG的活性，该蛋白酶可被巯基乙醇和DTT等所激活，也可被leupeptin和PCMB所抑制。

盛花后３周以４０ｍｇ／Ｌ的ＣＰＰＵ水溶液喷洒６年生软毛猕猴桃的幼果，果实的直线增长期延长约２周；在整个试验期中，处理果的生长速度比对照果大；收获时处理果比对照果重５４％，纵径增加１５．９％，横径增加１８．３％；处理果与对照果的可溶性固形物含量无显著差异。还对ＣＰＰＵ在软猕猴桃生产中的应用前景作了讨论。

克隆猕猴桃果实L-半乳糖内酯脱氢酶(GalLDH)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)基因,可为揭示猕猴桃高抗坏血酸(AsA)含量的分子机制奠定基础。研究以猕猴桃果实为材料提取总RNA,采用RT-PCR法,克隆出L-GalLDH基因的cDNA片段857 bp和DHAR基因的cDNA片段594 bp并测序,根据测序结果推测其氨基酸序列,并与刺梨、拟南芥、花椰菜、甘薯和草莓等植物的GalLDH基因和DHAR基因氨基酸序列进行亲缘分析。结果表明,猕猴桃GalLDH基因氨基酸序列和核苷酸序列与刺梨的相似性高达88%,其在同源基因进化关系树中单独聚为一类;DHAR基因氨基酸序列和核苷酸序列与苹果的相似性高达...

【目的】探讨1-甲基环丙烯(1-MCP)处理对‘徐香’猕猴桃0℃贮藏期间冷害和贮藏品质的影响,为猕猴桃的采后贮藏保鲜研究提供参考。【方法】以‘徐香’猕猴桃果实为材料,用0.5μL/L的1-MCP在20℃下处理果实24h,以蒸馏水处理的果实为对照,然后将其置于0℃下贮藏90d,每隔10d取样测定冷害指数、冷害率、呼吸速率、乙烯释放速率、细胞膜透性、MDA含量、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、质量损失率和腐烂率,分析1-MCP处理对猕猴桃冷藏冷害及果实品质的影响。【结果】0.5μL/L的1-MCP处理显著延缓并减轻了猕猴桃冷害的发生,1-MCP处理的果实较对照晚20d发生冷害,0℃贮藏90d...

【目的】探讨高、低淀粉积累型猕猴桃果实发育过程中淀粉积累差异、糖代谢特性及与相关酶活性的关系,为提高猕猴桃果实糖含量和风味等关键品质提供理论依据。【方法】以高淀粉积累型品种‘红阳’和低淀粉积累型品种‘华特’为试材,测定果实发育过程中的相对生长速率、碳水化合物(淀粉、葡萄糖、果糖和蔗糖)含量、干物质含量以及碳水化合物代谢相关酶活性的变化。【结果】果实碳水化合物含量与果实生长速率呈负相关,其含量随淀粉积累而不断增加;淀粉含量与果糖、葡萄糖、蔗糖等可溶性糖含量及干物质含量均呈正相关,当达峰值时,其在‘华特’和‘红阳’果实碳水化合物含量中所占比例分别为87.1%和84.1%。‘红阳’果实淀粉积累增速快...

【目的】检测果实甜菜红素含量，克隆HpCYP76AD1基因并分析其表达模式，分析基因表达与甜菜红素含量之间的关系，为研究红肉火龙果果实甜菜红素积累的分子机制和改良果实营养价值提供理论依据。【方法】利用比色法测量果实成熟期间甜菜红素的相对含量，基于果实转录组测序数据结合RT-PCR克隆获得HpCYP76AD1基因，分析该基因编码蛋白质的理化性质和系统进化关系，通过qRT-PCR检测HpCYP76AD1基因在果实成熟期间的表达模式。【结果】红肉火龙果果实成熟期间甜菜红素快速积累，成熟果实（授粉30 d）中的含量约是授粉20 d的150倍。HpCYP76AD1基因的开放读码框长度为1 521 bp，编码长度为 506个氨基酸的蛋白质序列。HpCYP76AD1蛋白的相对分子量为57.5 kDa，预测等电点为8.86。HpCYP76AD1氨基酸序列与梨果仙人掌OfCYP76AD8相似度最高，达89.96%。HpCYP76AD1与甜菜BvCYP76AD1、紫茉莉MjCYP76AD3和紫色苋菜花AcCYP76AD2属于CYP76AD1家族α类，HpCYP76AD1在果实甜菜红素积累的两个羟基化反应中均具有催化活性。HpCYP76AD1基因在果实成熟期间显著上调表达，与果实甜菜红素的积累模式正相关。【结论】红肉火龙果细胞色素P450家族成员HpCYP76AD1基因属于α类，可能在甜菜红素积累的两步羟基化反应中均具有催化活性；在果实成熟期间大幅上调表达，参与果实甜菜红素积累。

以果汁可溶性固形物（SS）含量为采收熟度指标，对当地几个猕猴桃品种的的果实成熟特征进行了比较，确定早熟品种的SS为5．5％，中晚熟品种SS为6．5％。采摘方法对果实商品质量有显著影响。用果剪行二剪法采摘，用小果篮盛装，果园分选，浅层包装存放，可以大大技少损伤率，有效地延长果实软化时间。

猕猴桃早熟品种黄皮果实采后在２０．０～３３．３℃高温下，７ｄ左右即达最佳食用状态，其时果实的糖酸比为１１．７６～１３．２３，固酸比为２５．００～２６．５０。在气温３３．３℃时出现呼吸高峰，二氧化碳值为７６．２５１２ｍｇ·ｋｇ－１·ｈ－１。此后可溶性固形物增速快于可溶性糖含量，而总酸量下降轻快。采后果实蛋白质和维生素Ｃ递降最快的气温条件是２８～３３℃，至最佳食用时蛋白质为１．５８％，维生素Ｃ５２５ｍｇ·ｋｇ－１。在室温贮藏下，多糖类保鲜液处理效果好于单糖类保鲜液。果体失重率达（５．５±０．５）％时是果皮开始皱缩的数量指标，对照样品３ｄ后果皮即皱缩，多糖类保鲜液处理的样品可保鲜１４ｄ。１～３℃低温...

【目的】研究猕猴桃疏果("疏花疏果"中丢弃的果实)在羊肉冷藏中的作用,为延长冷藏山羊肉的货架期,保持山羊肉品质,延缓山羊肉氧化提供参考。【方法】以蒸馏水处理为空白组,分别用1 mg·mL~(-1)的猕猴桃疏果多酚、表儿茶素、山梨酸钾溶液对山羊肉喷淋,自封袋包装,置于冰箱4℃冷藏。在8 d货架期内分别测定山羊肉显微结构、物性指标、pH、脂肪酸含量、硫代巴比妥酸反应物值(TBARS)以及挥发性盐基氮(TVB-N)。【结果】随着时间延长,4组山羊肉均变得不紧致、形状离散,其肌纤维排列逐渐疏松、结构松弛。在冷藏期间4组山羊肉的硬度均呈现降低趋势,前3 d的硬度值排序为:山梨酸钾组>表儿茶素组>空白组>疏果多酚组,5 d后各组硬度值逐渐接近;在冷藏结束时疏果多酚组、表儿茶素组、山梨酸钾组和空白组的硬度分别较初始值降低了50.52%、41.73%、39.63%和51.56%。4组山羊肉的弹性均呈先降低后稳定的趋势,其中,前3 d疏果多酚组的弹性值均低于其余3组;在冷藏结束时疏果多酚组、表儿茶素组、山梨酸钾组及空白组的弹性分别较初始值降低了45.23%、33.34%、44.64%和41.31%。4组山羊肉的咀嚼性整体上呈降低趋势,且在冷藏结束时疏果多酚组、表儿茶素组、山梨酸钾组及空白组的咀嚼性分别较初始值降低72.06%、61.46%、62.00%和67.37%。疏果多酚组的内聚性和回复性较为稳定,山梨酸钾组的内聚性较为稳定。随着时间的延长,疏果多酚组多不饱和脂肪酸(PUFA)含量较为稳定,表儿茶素与山梨酸钾组的PUFA含量在第6天出现峰值,空白组PUFA含量呈下降趋势;在冷藏结束时,疏果多酚组的PUFA含量分别为表儿茶素、山梨酸钾及空白组的1.11、1.40和1.86倍。疏果多酚组单不饱和脂肪酸(MUFA)含量先上升后降低且在第4天达到最高值,其余3组的MUFA含量呈下降趋势;在冷藏结束时,疏果多酚的MUFA含量分别为表儿茶素、山梨酸钾及空白组的1.10、1.17和1.21倍。疏果多酚、表儿茶素和空白组的饱和脂肪酸(SFA)及总脂肪酸(TFA)含量呈下降趋势,山梨酸钾组含量先下降然后趋于稳定;第2—4天疏果多酚组的TFA含量高于其余3组,第4—8天疏果多酚组与表儿茶素组的TFA含量高于其他两组。4组山羊肉的TBARS值在贮藏期内先减小后增加,第3天后其值排序为:疏果多酚组<表儿茶素组<空白组

以“秦美”和“海沃德”猕猴桃为试材,研究了100 nL/L 1-甲基环丙烯(1-M CP)处理对采后果实的呼吸速率、乙烯释放速率、果肉硬度、可滴定酸含量及可溶性固形物含量的影响。结果表明,100 nL/L 1-M CP可抑制0℃贮藏期内猕猴桃的呼吸速率和乙烯释放速率,有效延缓0℃贮藏期及货架期果肉硬度和可滴定酸含量的下降,抑制可溶性固形物含量增加;“海沃德”猕猴桃果实的软化进程比“秦美”慢,可溶性固形物含量也较“秦美”高,表现出了良好的贮藏性和食用品质。

以美味猕猴桃“秦美”果实为试材,研究了充N2包装对其鲜切后果实呼吸速率、乙烯释放速率、丙二醛(MDA)含量等生理指标和果实硬度、可溶性固形物(TSS)含量、维生素C含量、可滴定酸含量等品质指标的影响。结果表明,充N2处理后,果实的呼吸速率和乙烯释放速率受到抑制,呼吸速率高峰比对照延迟了4 d,乙烯释放速率高峰比对照推迟了8 d;充N2包装降低了鲜切猕猴桃果实丙二醛(MDA)的含量,抑制了Vc的降解,但对果实可滴定酸含量没有明显影响;充N2包装可以抑制鲜切猕猴桃果实硬度的下降速度,推迟果实的软化,同时TSS含量的上升速度也比对照缓慢。综合各项指标分析认为,充N2包装对提高鲜切猕猴桃果片品质以及延...

水果之王———猕猴桃扬州大学农学院陈清硕猕猴桃又名阳桃、羊桃、毛桃、藤梨、中国鹅莓、中国醋栗、中国猕猴梨、凯维果、奇异果（Ｋｉｗｉｆｒｕｉｔ），属猕猴桃科、猕猴桃属（Ａｃｔｉｎｉｄｉａ），是一种野生的大藤本植物，原产我国长江上游山地，１９０５年被一位...