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[期刊] 实验技术与管理
[作者]
赵思思 张新宇 曲宏宇 周思彤 闫可雨 孙晶晶 袁嘉敏 张航
实验通过紫外吸收与荧光光谱法研究了AIE型荧光探针四苯基-1,3-丁二烯对Fe~(3+)检测的选择性和灵敏度，对仪器分析实验中的荧光光谱法进行了探究与改进，属于设计性实验。该实验具有条件简单温和、荧光现象明显、重复性好、可操作性强等特点。根据课程需要和学生层次，采用阶梯式、模块化方式设置了实验教学内容，旨在通过过程化学习，强化学生的基础实验操作能力及自主学习能力，使科研、教学、趣味三者相互融合。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
陈杜刚 李婉青 余响林 闫志国
Knoevenagel反应是一种经典的缩合反应，常用于增加分子的共轭以构建具有给体-受体（D-A）结构的化合物，而此类偶极分子往往对环境的粘度变化有响应。基于此考虑，该文提出了一种综合性的实验教学方案，合成了一个对粘度敏感的荧光探针PySQ，筛选出了最佳的反应条件，并测试了其紫外-可见吸收光谱和荧光光谱，验证了探针对粘度的高灵敏响应性能。该实验包含有机物的合成、提纯和性能测试，将有机化学与分析化学紧密结合，且所得探针在生物成像领域颇具潜力，因此可以很好地调动学生的积极性，提高实验教学的效果。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
赵浩 郭鑫 吴忠云 杨玲 徐金荣 郑俊荣
设计了一款用于本科实验教学的低成本可重复组装拆解的紫外-可见光谱仪。要求学生利用光学元件搭建具有高分辨率的紫外-可见光谱仪，测试系列共轭分子的吸收光谱，并将实验结果与一维势阱方程和Gaussian软件计算结果进行相互验证。该实验有助于学生全面深入了解仪器原理及构造，探究各个部件的作用，深入体会现代仪器的原理。学生通过这一实操性强的实验，能够学习与验证相对抽象深奥的量子力学原理，锻炼动手能力、创新思维和知识融会贯通能力，学习兴趣大大提高。
[期刊] 林业科学
[作者]
王明旭 朱水芳 罗宽 周李华 赵文军
以松材线虫rDNA -ITS2为靶区 ,建立松材线虫的TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。对松材线虫大量DNA和单条线虫的检测结果表明 ,探针检测松材线虫和拟松材线虫时 ,前者产生明显的荧光信号 ,后者无荧光信号 ,表明探针具有高度的特异性 ;探针检测到最低模板浓度为 1pg·μL- 1 ,DNA测序结果与实时荧光PCR结果一致
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
马疏言 郑月萍 郑志富
【目的】磷脂酸(PA)是甘油脂生物合成的前体，又是参与植物生长发育调节和各种逆境响应的重要信使物质，然而目前对植物细胞中PA动态变化的了解十分有限。本研究试图构建一种能有效监测植物细胞PA变化的荧光探针，并用之测定盐碱胁迫过程中胞内PA含量的变化。【方法】将Spo20p蛋白中高度专一的PA结合域相对应的核苷酸序列与绿色荧光蛋白基因融合，经遗传转化获得携带该融合基因的转基因拟南芥Arabidopsis thaliana株系，其表达受组成型启动子UBQ10驱动，产生的融合蛋白成为专一结合PA的荧光探针。随后，运用该荧光探针监测盐碱胁迫下胞内PA含量的变化。【结果】构建获得7个不同的纯合、单插入位点转基因拟南芥株系。实时荧光定量PCR (RT-qPCR)分析显示：不同株系中融合基因的表达量存在差异。不同浓度外源PA处理试验显示：随着表达量的升高，PA探针可有效监测到2μmol·L-1 PA处理根尖10 min后细胞中PA含量的变化；而当PA探针表达量较低时，对PA监测灵敏度显著下降，表明在一定程度上荧光探针对PA监测的灵敏度与其表达量相关联。运用PA荧光探针发现：盐碱胁迫处理根尖5 min即可诱导质膜上或胞内PA的积累，暗示PA在植物早期盐碱胁迫响应中可能产生重要作用。【结论】本研究构建了一种可对细胞内PA含量进行有效监测的荧光探针，该探针可用于监测植物盐碱胁迫早期响应过程中胞内PA水平的变化，从而为早期逆境响应研究提供新工具。图7表1参36
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈红英 李新生 崔保安 杨明凡 金钺 刘金朋
根据GenBank公布的猪细小病毒VP2基因序列,利用Premier express软件设计并合成了1对引物和1条相应的TaqMan探针,从猪细小病毒感染的PK-15细胞中提取DNA,经PCR扩增VP2基因,纯化的PCR产物克隆入pGEM-T Easy载体中,构建重组质粒.转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线.在25μL扩增反应体系中,对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序.该方法能够特异、定量检测猪细小病毒,灵敏度达1.12TCID50/mL.
关键词：
猪细小病毒 检测 实时荧光定量PCR
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
许朝用 刘琳 傅艺颖 白艳丽 梁建功 陈璐
在合成牛血清白蛋白（ＢＳＡ）修饰的金纳米团簇（金簇）的基础上，将荧光素异硫氰酸酯（ＦＩＴＣ）与金簇偶联，构建一种新型比率型ｐ Ｈ荧光探针。当体系ｐ Ｈ值在４．０～１０．０之间变化时，ＦＩＴＣ的荧光强度逐渐增加，而金簇的荧光强度基本保持不变。在ｐ Ｈ为５．５～８．０之间，该探针对于ｐ Ｈ具有良好的线性关系，线性方程为Ｙ＝１．７２Ｘ－８．８，相对标准偏差为０．９９４，同时该探针在ｐ Ｈ为６．０～９．０之间还具有良好的可逆性。此外，将此ｐ Ｈ荧光探针与ｐＫ１５细胞共培养，通过ＭＴＴ实验证明该比率型ｐ Ｈ荧光探针对细胞几乎没有毒性。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘金彤 蒲虹辰 叶林瑶 莫艳阳 杨红
[目的]本文旨在构建磁性纳米探针并将其应用于莠去津残留的荧光检测。[方法]通过共沉淀法合成磁性纳米材料;合成莠去津适配体及荧光素标记DNA单链形成的非完全互补DNA双链,并将其修饰于磁性材料之上,构建特异性检测莠去津残留的功能化荧光磁性探针;利用紫外、透射电镜等技术对探针进行表征分析;利用凝胶电泳技术,分析目标物莠去津与探针负载的适配体特异性结合后,释放荧光素标记DNA单链、解除材料对荧光淬灭从而恢复荧光的机制;运用荧光光谱技术,构建基于荧光信号强度变化的莠去津残留灵敏定量方法。[结果]本研究开发的荧光检测莠去津残留方法在0.01～20μg·mL~(-1)具有良好的线性关系,相关系数(R~2)可达0.998,检测限为8.17μg·L~(-1),相比于其他农药,探针对莠去津具有较高的特异选择性及抗离子干扰能力。在稻田水添加浓度范围中,莠去津的平均添加回收率为95.48%～102.03%,相对标准偏差(RSD)为2.17%～3.14%;稻田土中莠去津的加标回收率为94.79%～100.66%,RSD为3.40%～4.72%。[结论]本研究建立的基于磁性纳米探针的莠去津残留荧光定量方法简单、高效,其灵敏度和准确度均符合环境中农药残留分析要求。
关键词：
莠去津 荧光传感 磁性材料 纳米探针
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王念武 王婷 沈建国 胡方平
【目的】从口岸进境番茄种子中检测番茄溃疡病菌(Clavibacter michiganensis subsp.michiganensis,CMM),一直以来都受检测周期的限制,快速、特异地从种子中检测该病原细菌需要新的方法。研究在锁式探针扩增方式上,选择连接酶依赖的PCR扩增方式,并结合实时荧光PCR技术,旨在建立番茄溃疡病菌基于锁式探针技术的实时荧光PCR快速检测方法,为口岸番茄种子快速检疫提供技术支持。【方法】根据番茄溃疡病菌的一段特异基因Pat-1序列,设计锁式探针的T1和T2臂,使之与CMM的特异性片段碱基序列互补,再按照锁式探针的设计原则设计锁式探针和扩增引物以及荧光探针。试验时,先...
[期刊] 中国高教研究
[作者]
闻星火 黄乐 王琦
大型仪器开放共享是国家和高校普遍关注的问题。在长期的大型仪器建设和开放共享的工作中.政府部门和高校积累了许多行之有效的经验,凝聚了一批建设成果。笔者总结已有的经验、成果,提出了在现有条件下健全高校内部的共享体系、完善运行管理机制、推动大型仪器共享的思路。
关键词：
大型仪器 共享系统 开放 机制
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
刘娅彤 曹佳琪 张茜茜 崔瀚文 邹月利 赵李霞
新型比色探针H-6的合成、表征及对铜离子的快速检测，为科研转化为本科教学的化学综合实验项目。该实验通过分子设计、有机合成，红外、核磁和质谱表征，以及紫外特性分析、实际应用和密度泛函理论（DFT）计算探针识别机理等全流程教学，提升了学生的实验技能和科研素养，激发了创新意识。该实验将有机化学、无机分析、材料科学、仪器分析等多学科交叉融合，强化了实验教学的系统性和应用性。将新型比色探针检测手段科研成果融入本科实验教学的思路与理念对推动实验教学改革有借鉴意义。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
叶君 熊犍 吴胜龙 何婉芬
将科学研究前沿和热点的荧光检测技术引入本科教学实践,合成了一种具有快速、高选择性和高灵敏度的新型荧光探针CMC/Tb(Ⅲ)复合物,用于对自来水中Mn~(2+)的快速检测。该实验的实施,对学生开拓知识视野、培养创新意识和创新技能等发挥了很好的作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王跃进 Lamikanra Olusola
利用细菌质粒 M13克隆葡萄无核基因的 RAPD标记 UBC- 2 6 94 50 后 ,采用自动荧光 DNA序列分析仪对其测序。结果表明 ,UBC- 2 6 94 50 由 4 84对核苷酸及其特定序列构成。按照该序列 ,人工合成两个寡聚核苷酸5′ CCAGT TCACT CTCAA TAGGT CC3′和 5′ CCAGT TCGCC CGTAA ATG3′分别作引物 ,当用获得该标记及其序列的亲本和无核杂种后代作模板进行 PCR分析 ,凡是可以扩增出约 5 90 bp片段即为无核基因携带者和表达者。进一步用其原始无核祖先无核白和商业化无核品种及 C78- 47× B52 - 1 2 2 ...
关键词：
葡萄无核基因 DNA序列 DNA探针
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
颜世敢 朱丽萍 张玉忠 周百成 张秀美 李雁冰
用适宜摩尔浓度的异型双功能交联剂SPDP将R-藻红蛋白与纯化的禽流感病毒H9亚型多克隆抗体交联,并经高效液相色谱纯化制备R-藻红蛋白标记抗体荧光探针。以溴化氰活化的琼脂糖微球为固相载体,采用双抗体夹心法建立固相免疫荧光检测法,以制备的R-藻红蛋白标记抗体荧光探针检测禽流感病毒H9尿囊毒。结果表明,阳性微球在蓝、绿光激发下发射桔黄色荧光,荧光明亮,无背景光干扰,特异性好,灵敏度高,可检测蛋白浓度为1.85×10-5mg.mL-1的H9亚型尿囊毒。R-藻红蛋白标记探针的检测灵敏度高于FITC标记探针,R-藻红蛋白可替代FITC或与FITC等荧光染料一起用于多色荧光免疫检测。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
张通 张延军 白林
基于线热源模型，研制了一种可应用于室内和原位实验的岩土热导率测量探针。通过数值模型模拟了探针的传热过程，结果表明探针整体轴向传热不明显，符合线热源模型假设。在设定的加热参数下，当测量时间大于40 s时，热导率计算精度满足要求。用室内制备黏性土样品测试探针性能的实验结果显示，探针测量岩土热导率准确，具有测量快速、操作方便等特点。该探针可应用于岩土原位测量实验和实习课程，有助于加深学生对线热源模型的理解，培养学生的创新能力。
关键词：
线热源模型 热导率 数值模拟
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