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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
储岳峰 李祥瑞 胡元亮
测定了淫羊藿多糖、黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、板蓝根多糖、淫羊藿黄酮、蜂胶黄酮、人参皂甙和黄芪皂甙 9种中药成分对小鼠外周血和脾脏淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞和脾脏NK细胞活性以及抗体生成细胞数量的影响。结果表明 ,黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、板蓝根多糖、蜂胶黄酮、人参皂甙均能显著或极显著促进ConA (刀豆蛋白A)和LPS (脂多糖 )诱导的小鼠外周血和脾脏淋巴细胞增殖 ,黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮和人参皂甙均能极显著或显著提高小鼠腹腔巨噬细胞和NK细胞活性 ,黄芪多糖、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、人参皂甙和淫羊藿多糖、黄芪皂甙极显著或显著增加小鼠的抗体生成细胞数。结...
关键词：
中药成分 小鼠 免疫细胞 活性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
储岳峰 颜新敏 李祥瑞 胡元亮
应用半定量RT-PCR方法,测定了9种中药成分对小鼠脾脏T细胞IL-2mRNA水平的影响。结果显示,体内注射黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮和黄芪皂甙能够使ConA诱导的小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平显著升高,蜂胶多糖、板兰根多糖、人参皂甙、淫羊藿黄酮不能影响细胞内IL-2mRNA丰度;中药成分体外诱导时与体内应用时的作用效应相同,但与对照相比较,蜂胶多糖在体外能够显著促进IL-2mRNA的诱生,与体内不同。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
余树民 甘梦 左之才 崔恒敏 彭西 王娅 邓俊良
【目的】评价自拟中药复方对免疫抑制小鼠血清细胞因子、免疫球蛋白和红细胞免疫黏附功能的影响。【方法】通过腹腔注射环磷酰胺建立免疫抑制小鼠模型。试验组免疫抑制小鼠分别按20,10和5g/kg剂量灌胃自拟中药复方,同时设置模型对照组(灌胃等体积生理盐水)、健康对照组(灌胃等体积生理盐水)和黄芪多糖对照组(灌胃剂量66mg/kg),连续7d,试验第0,3,7天采集血样,用血细胞自动分析仪测定小鼠血细胞数,用酶联免疫吸附试验测定血清IL-2、IgG、IgM、IL-4和IFN-γ含量,并计算IL-4/IFN-γ,用红细胞C3b受体花环(C3b RR)及免疫复合物花环(ICR)试验分析红细胞免疫黏附功能。【...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孔祥峰 胡元亮 刘家国 张宝康 陈玉库 王德云
将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 8和 6 0h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明 ,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖 ;淫羊藿多糖主要具抑制效应 ;其他 5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖 ,而在某些浓度和时间点则抑制增殖 ,并有一定的量效和时效关系。
关键词：
中药成分 鸡胚成纤维细胞 细胞增殖
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张志敏 王建华 赵兴华 余永涛 刘志滨 耿果霞 马保华 赵晓娥
【目的】探索苦马豆素(SW)对小鼠免疫器官发育、外周血液中细胞数及淋巴细胞增殖功能的影响,为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将80只昆白系小鼠随机分为8组,其中5个试验组按0.05,0.2,0.8,3.2和6.4 mg/kg剂量每天灌服不同质量浓度的SW生理盐水溶液,连续21 d;其他3组均为对照组(分别为生理盐水组、环磷酰胺组和空白对照组)。检测小鼠胸腺和脾脏指数,用细胞分析仪检测外周血液中白细胞、红细胞及淋巴细胞数;用MTT法检测脾脏淋巴细胞的增殖活化。【结果】在SW剂量为0.2~0.8 mg/kg,小鼠脏器(胸腺和脾脏)指数及外周血液中的细胞数均增加;SW单独作用或其协同刀豆蛋白A...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王德云 李祥瑞 徐立新 王玉英 胡元亮
以淫羊藿多糖加蜂胶黄酮(方1)、人参皂苷加黄芪多糖(方2)组成2个复方,各加IL 2配合新城疫苗免疫雏鸡,分别于免疫后第7、14、21和28 d用微量法检测血清抗体效价的动态变化;同时将2个复方各分3种剂量加入到培养的鸡外周血T淋巴细胞中,分别培养7和24 h后用半定量RT-PCR方法检测淋巴细胞IL 2和IFNγ-的mRNA表达的变化。结果表明,2个复方单用或与IL 2合用均能显著提高抗体效价,而复方与IL 2的免疫协同作用不明显;方1的3个剂量和方2的高剂量能显著促进IL 2的基因表达,而2个复方的3个剂量能显著促进IFNγ-的基因表达,解释了复方中药成分与IL 2免疫协同作用不明显的原因...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
阚飞 孙捷 田路旸 李超 徐明旭 房云 代陈胜 张克云
以中国药用昆虫白星花金龟(Protaetia brevitarsis)幼虫(蛴螬)为研究对象,通过匀浆、乙醇沉淀、Sevag法去除蛋白,得到蛴螬总多糖,其得率为57%。用苯酚硫酸法进行多糖浓度测定。经MTT法检测表明,终质量浓度为5和20μg.mL-1的总多糖对小鼠脾细胞的生长增殖率分别为48.8%和62.2%,对巨噬细胞生长增殖率分别为240%和516%。用DEAE-Sephadex A-25、LPLC-Sephadex G-75层析法分离纯化总多糖,得到5种蛴螬多糖,其中相对分子质量分别为42 000和26 000的2种蛴螬多糖对脾细胞生长增殖率较高,终质量浓度为5μg.mL-1的该2种多...
关键词：
蛴螬 多糖 免疫细胞增殖
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张志敏 王建华 赵兴华 公小兵 余永涛 崔忠华 耿果霞
【目的】探索苦马豆素(SW)与小鼠腹腔巨噬细胞功能之间的关系,为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将70只小鼠随机分为7组,其中5组分别按0.05、0.2、0.8、3.2和6.4mg·kg-1每天灌服SW生理盐水,连续21d,另2组为生理盐水和空白对照组。收集小鼠腹腔巨噬细胞,经脂多糖(LPS)诱导活化,用ELISA法检测TNF-α生成,酶法检测一氧化氮合酶(NOS)活性,化学法检测H2O2浓度,MTT比色法检测杀伤肿瘤细胞活性及吞噬中性红能力。【结果】SW剂量在0.2～3.2mg·kg-1之间,能够提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬和杀伤活性﹑NOS活性,促进TNF-α和H2O2生成,且均呈剂量...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
秦君 李庆章 高学军
【目的】以王不留行为试验材料,寻找王不留行促进泌乳的有效成分,为中药催乳针剂的研发提供理论依据。【方法】对王不留行3类主要成分(皂甙类、黄酮甙类及香豆素类)进行提取,并用化学方法及薄层层析方法予以鉴定。将3种成分分别以不同浓度添加到细胞培养液,采用MTT法检测3类成分对体外培养的小鼠乳腺上皮细胞增殖的作用,运用荧光定量RT-PCR方法对细胞中β-酪蛋白的表达进行检测,用激光共聚焦显微技术对细胞周期蛋白cyclinD1和细胞信号通路中磷酸化stat5因子的表达进行检测,最后通过动物实验进一步验证其有效成分的作用。【结果】王不留行皂甙类成分对小鼠乳腺上皮细胞的增殖有明显的抑制作用(P<0.05),...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
秦磊 陆承平 陈怀青
将嗜水气单胞菌的胞外毒素(HEC) 和胞外蛋白酶(ECPase) 与迟缓爱德华氏菌脂多糖(LPS)、脱毒多糖(PS) 偶联, 制成3 种亚单位偶联疫苗 (HEC-PS、HEC-LPS、ECPase-PS), 分别免疫小鼠。另设这两种细菌的全菌灭活苗免疫及注射生理盐水对照组, 每组8 只。在第2 次免疫后第7 天用四甲基偶氮唑盐比色法 (MTT), 检测脾淋巴细胞转化率与腹腔巨噬细胞吞噬活性, 并检测各组小鼠的全菌凝集抗体。结果表明, 亚单位疫苗的这两项细胞免疫指标明显高于对照组,但略低于全菌灭活苗免疫组, 而细胞免疫指标与抗体水平无对应的平行关系。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨龙圣 胡元亮 薛家宾 王芳 王德云 徐为中
【目的】研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张朝莹 文兆海 张玥 李嫄 徐立新 陆明敏 宋小凯 李祥瑞 严若峰
[目的]旨在研究旋毛虫钙网蛋白（rTs-CRT）对宿主免疫系统的影响。[方法]用原核表达技术获得纯化旋毛虫钙网蛋白，并进行Western Blot验证；将rTs-CRT与小鼠巨噬细胞共孵育，检测该蛋白对小鼠巨噬细胞增殖、NO释放和凋亡的影响；将rTs-CRT与大鼠外周血单核细胞（PBMC）共孵育，检测该蛋白对大鼠PBMCs转录因子和细胞因子的影响。[结果]Western Blot结果显示rTs-CRT可以被感染旋毛虫的大鼠血清所识别；rTs-CRT可促进小鼠巨噬细胞的增殖和NO的分泌，抑制小鼠巨噬细胞的凋亡；rTs-CRT下调大鼠PBMCs T-bet、Gata-3和PU.1的转录水平，上调Foxp3、Ahr、RORγt和Bcl-6的转录水平；rTs-CRT上调大鼠PBMCs IFN-γ、IL-17、IL-10、TGF-β、Il-9和IL-22等细胞因子的转录水平，下调IL-4和IL-21的转录水平。[结论]旋毛虫钙网蛋白可刺激宿主产生Th1、Th17、Treg、Th9和Th22等多种类型的免疫反应，抑制Th2和Tfh免疫，对宿主免疫调节作用复杂。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
高珍珍 张超 景丽荣 胡元亮
[目的] 本试验旨在筛选出增强免疫活性最强的硒化多糖，为研制硒多糖类免疫增强剂提供理论依据。[方法] 体外试验：首先测定7种硒化多糖，硒化当归多糖sCAPS、硒化山药多糖sDOP、硒化党参多糖sCPPS、硒化淫羊藿多糖sEPS、硒化大蒜多糖sGPS、硒化百合多糖sLP、硒化白术多糖sAMP和修饰试剂亚硒酸钠Na_(2)SeO_(3)对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度，取安全范围内5种浓度的各硒化多糖和Na_(2)SeO_(3)单独或与PHA、LPS同时加入到小鼠脾脏的淋巴细胞培养体系中，测定淋巴细胞增殖率，筛选出增强免疫效果较好的3种硒化多糖sCAPS、sCPPS和sGPS。体内试验：各组小鼠免疫OVA时分别灌服150、100、50 μg·mL~(-1)浓度的sCAPS、sCPPS和sGPS，10 μg·mL~(-1)的Na_(2)SeO_(3) 0.4 mL，免疫对照组和空白对照组灌胃等量生理盐水，每天1次，连续3 d，分别于首免后7、21和35 d每组随机抽取8只摘眼球采血，分离血清，用ELISA试剂盒测定血清IgG、IgM、IL-2、IL-4和IFN-γ含量，HE染色后比较各组小鼠脾脏的组织学变化。[结果] 在体外，单独加入或与PHA、LPS同时加入时，sCAPS、sCPPS和sGPS组的淋巴细胞增殖率均高于或显著高于其他各组(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张向杰 孙耀贵 程佳 李宏全 王俊东
【目的】探讨日粮中分别添加山楂叶总黄酮、何首乌二苯乙烯苷及二者同时添加对肉鸡屠宰性能、血清生化指标及脂质代谢相关功能基因表达的影响。【方法】选用1日龄AA肉鸡128只(雄),随机分为4个处理组,即空白对照组(饲喂玉米-豆粕型基础日粮)、Ⅰ组(在日粮中添加300 mg.kg-1山楂叶总黄酮)、Ⅱ组(在日粮中添加150 mg.kg-1何首乌二苯乙烯苷)和Ⅲ组(在日粮中添加300 mg.kg-1山楂叶总黄酮和150 mg.kg-1何首乌二苯乙烯苷)。每组4个重复,每个重复8只。【结果】①与对照组相比,Ⅰ组的全净膛率、血清高密度脂蛋白胆固醇、肝脏组织中过氧化物酶增生物激活受体α和肉毒碱棕榈酰基转移酶-...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
韩春杨 刘翠艳
【目的】研究中药免疫调节剂对免疫抑制小鼠的组织保护作用。【方法】用环磷酰胺(Cyclophospha-mide,Cy)构建小鼠免疫抑制病理模型。分别给正常小鼠和环磷酰胺所致免疫抑制小鼠饮服自制中药免疫调节剂玉屏风散加减(ZY)和经典方剂玉屏风散(YPF),检测ZY、YPF对不同免疫状态下小鼠血液学指标(白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞体积(MCV))、体质量、脾脏指数以及肝脾组织病理学的影响。【结果】(1)ZY和YPF对健康小鼠血液学指标影响不显著(P>0.05);ZY对Cy所致的免疫抑制小鼠WBC、R...
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