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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
黄月月 赵霞 王磊 代兴杨 阮祥春 李琳 曾明华
[目的]研究细胞色素b基因(Cytb)突变与柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)对喹啉类抗球虫药产生抗药性的关系。[方法]收集安徽和县、舒城县、肥东县、庐江县、凤台县和全椒县6个地区的柔嫩艾美耳球虫,经分离、纯化、鉴定和鸡体试验法检测耐药性后,采用PCR法和DNA测序相结合的方法,分析各个地区的野外分离株及敏感株之间Cytb基因的序列突变情况。[结果]获得了1 100 bp的目的片段。测序后发现:与敏感株相比,耐药株中Cytb基因有更多的基因突变,主要表现为T→C、T→A、A→G的突变,其中以
关键词：
柔嫩艾美耳球虫 Cytb 突变 耐药性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
汪明 孔繁瑶 殷佩云 吴健 安健
从4省市10个鸡场分离到10株柔嫩艾养耳球虫，使用AA肉鸡按每只鸡接种10万卵囊，对马杜霉素、百球清、盐霉素和拉沙里菌素的敏感性进行了测试。依照最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率3项指标，检测结果显示：30％虫株对马杜霉素和百球清有抗药性，40％虫株对拉沙里菌素有抗药性，70％虫株对盐霉素有抗药性，80％虫株对两种或两种以上的药物有抗药性。虫株的抗药谱带有明显的地方性。此外，对抗药虫株的鉴定标准进行了讨论。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林青 窦永喜 闫鸿斌 田广孚 才学鹏 张彦明 景志忠 于三科 翟军军
用柔嫩艾美耳球虫甘肃株(E.tenella G S,E t G S)对15日龄雏鸡进行感染,以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标,进行综合评定,研究了该虫株对三九球痢灵、地克珠利、氯苯胍和地克珠利氯苯胍合剂等几种常用抗球虫药的敏感性。结果表明,该虫株对三九球痢灵有中度抗药性,对地克珠利和地克珠利氯苯胍合剂有轻度抗药性,对氯苯胍无抗药性。
关键词：
柔嫩艾美耳球虫 抗药性 抗球虫药 鸡
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李安兴 蒋金书
对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)BJ 株 SO7基因进行了克隆和测序分析。以纯化的 E.tenella BJ 株7h 孢子化卵囊的总 RNA 为模板,应用 RNA 反转录酶(M-MLV)合成 cDNA,再用 Taq DNA 聚合酶进行PCR 扩增出 BJ 株 SO7基因.用常规基因克隆方法把 BJ 株 SO7基因插入 pGEM-T 克隆载体,选取正方向插入子的一个阳性克隆进行酶切分析及插入片段的全序列测序分析。结果表明:该序列全长862个核苷酸,有一个开放性读框(65～713nt),可编码216个氨基酸(22.4kD)。SO7-BJ 与国外株 SO7比较,同源性为99%,突变的8个核苷酸...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林青 张志敏 于三科 翟军军 段旭基
用杨凌地区鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株和母株分别免疫鸡,对免疫前后鸡体的平均增重、饲料转化率、盲肠病变记分和卵囊抑制率等指标进行了分析。结果发现,早熟株免疫组对球虫再攻击时的卵囊减少率分别为77.3%和67.6%,高于母株免疫组的41.7%和57.1%,且对同种同株球虫攻虫时的保护力优于同种不同株球虫。经2次免疫后,早熟株免疫组的鸡平均增重、饲料转化率均高于母株免疫组和对照组,而盲肠病变记分小于后者;早熟株免疫组经球虫攻击后卵囊的繁殖量明显减少,且卵囊抑制率均在91%以上。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
甘德培 汪明
将三对抗不同药物的 Eimeria tenella 虫株(氯嗪苯乙氰抗性株与盐霉素抗性株、氯嗪苯乙氰抗性株与氯羟吡啶抗性株、氯嗪苯乙氰抗性株与拉沙里菌素抗性株)分别等量混合感染不给药的鸡只,获得各自的杂交一代 F_1.再用 F_1感染饲喂双重药物的鸡只,通过双重药物的筛选,分别获得了各自的 E.tenella抗药性重组株 F_2~(ds),F_2~(de),F_2~(dl).这3株抗药性重组株在 F_2代中所占比例分别为:19.9%,36.5%,26.7%,重组株对相关的两种药产生了完全的抗药性.试验结果还显示,重组株的致病力与 E.tenella 敏感株无明显差异.
关键词：
柔嫩艾美耳球虫 抗药性 杂交
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
甘德培 汪明 龙光宗 宋松林
作者检测了 Eimeria tenella 对4种抗球虫药的交叉抗药性情况。4种抗球虫药(拉沙里菌素、盐霉素、克球粉和地克珠利)对4株 E.tenella 抗药性虫株(拉沙里菌素抗性株、盐霉素抗性株克球粉抗性株和地克利抗性株)的药效结果显示,E.tenella 对以下三组药物不存在交抗药性:地克珠利与拉沙里菌素、地克珠利与盐霉素、地克珠利与克球粉.另外,盐霉素抗性株对拉沙里菌素表现敏感,而拉沙里菌素抗性株对盐霉素则缺乏敏感性.拉沙里菌素抗性株和盐霉素抗性株对克球粉表现为部分抗药,克球粉抗性珠对拉沙里菌素和盐霉素则表现敏感.
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李博 刘群 蒋金书
AA肉鸡雏鸡分别经口免疫柔嫩艾美耳球虫毒株早熟株 ,用免疫组化ABC法染色检测小肠、盲肠扁桃体、脾脏中CD4 +、CD8+T淋巴细胞动态变化 ;用淋巴细胞转化实验MTT法检测T淋巴细胞活性。结果表明 :球虫免疫鸡后 ,CD4 +T淋巴细胞在一次免疫后迅速增殖 ,第 6天达到第一峰 ,免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 38%和 4 4 % ,免疫早熟株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 36 %和 4 3% ,而二次免疫后和对照相比很少有显著差异。CD8+T淋巴细胞在一次免疫后比CD4 +增殖速度慢 ,第 9天达...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
甘德培 汪明 吴志光
在药物浓度递增的情况下,经过10次传代,诱导出对1.25mg·kg~(-1)地克球利产生抗药性的 Eimeriatenella 虫株,初始诱导浓度为0.07mg·kg~(-1);经过6次传代,诱导出对150mg·kg~(-1)克球粉产生抗药性的 E.tenella 虫株,初始诱导浓度为75mg·kg~(-1).低浓度(0.125mg·kg~(-1))地克球利产生了较为稳定的抗药性,则诱导过程便进行得很快,一步一个台阶,即球虫的抗药性突破某一阈值后很容易对高一级浓度的药物产生抗药性.因此,在鸡场球虫病的防治中,虽然地克株利具有高效抗球虫作用,但无论采用何种用药方案,其使用
[期刊] 中国农业科学
[作者]
韩红玉 赵其平 姜连连 董辉 陈兆国 黄兵
以遗传背景一致的柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)敏感株孢子化卵囊为驱动组,马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊为试验组,利用抑制消减杂交(SSH)方法,通过两轮杂交和两次PCR分别构建了富含两个抗药株孢子化卵囊与敏感株孢子化卵囊之间差异表达基因的消减cDNA文库。随机从两个消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株孢子化卵囊的消减文库重组率分别为96%和98%,差异基因片段大小分布在250bp～1.0kb之间。从每个文库中随机挑取65个阳性克隆经斑点杂交试验,分别选择表达量上调的6个克隆进行序列分析和同源性比较。结果发现,有4个cDNA片段...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
谢昆 严若峰 徐立新 李祥瑞
利用DNA重组技术,分别将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)pEtK2基因单独或与鸡白细胞介素2基因(IL-2)串联克隆到DNA疫苗载体pVAX1或pcDNA4.0(c)上,构建了pVAX1-pEtK2、pcDNA4.0(c)-pEtK2、pVAX1-pEtK2-IL-2、pcDNA4.0(c)-pEtK2-IL-2 DNA疫苗。酶切鉴定正确后分别将重组质粒胸肌注射14日龄雏鸡,1周后取注射部位肌肉组织,用RT-PCR和Western-blotting法检测保护性抗原的表达情况。结果表明,抗原基因pEtK2和pEtK2-IL-2串联基因均能在注射部位肌肉组织中成功表达。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘群 蒋金书 韩谦
本研究对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)北京株进行10代早熟选育,获得早熟弱毒株,对其生物学特性研究证实:该早熟株潜隐期为123h,比亲本毒株缩短了21h;内生发育研究发现其第二代裂殖生殖发育较快,第二代裂殖体含裂殖子较少,提前进入配子生殖;该早熟株繁殖能力下降,仅为毒株为24.75%;该早熟株致病性大大下降,经口感染发现剂量为10×10~4/只的早熟株的致病性仅相当于剂量10×10~2/只亲本毒株的致病性;对其免疫原性研究发现;①分别用剂量为1000个卵囊/只的早熟株丝、鸡胚株和亲本毒株孢
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
傅小平 李银 沈永林 杨廷桂 陈伟华
在感染柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella)的雏鸡日粮中添加NO前体物L Arg或在饮水中添加iNOS抑制剂Dex ,探讨NO在鸡感染柔嫩艾美球虫过程中的作用。结果显示 ,未感染组鸡的血浆中NO水平无明显变化 ,感染组鸡则明显升高 ,第 6天达到峰值 (P 0 0 5 ) ;添加Dex组鸡则明显高于不添加的对照组 (P
关键词：
一氧化氮 柔嫩艾美球虫 鸡
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