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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
戴均涛 张慎璞 王暄 丁修恒 李红梅
[目的]Mi基因是目前番茄遗传育种及生产实践中应用最为广泛的根结线虫抗源,通过对3种分子标记法检测番茄中Mi基因的结果进行比较与分析,以期为番茄抗根结线虫遗传育种提供准确、高效的分子鉴定方法。[方法]采用酶切扩增多态性序列(CAPS)、引物对组合以及序列特征扩增区(SCAR)3种分子标记法分别检测16个番茄品种的Mi基因及其基因型,同时采用人工接种法测定番茄品种对南方根结线虫的抗、感性。[结果]针对上述品种,3种分子标记法的检测结果存在着明显的差异,CAPS法检测全部供试番茄均含Mi基因,除‘线虫绝39号’外均为Mi/Mi纯合基因型;而PM3Fb/PM3Rb、PMi F3/PMiR3引物对组合检测和SCAR标记Mi23F/Mi23R检测的结果均显示有9个品种含Mi基因,前者检测表明‘VFN’‘双抗265’和‘双抗228’为Mi/Mi纯合基因型,但后者检测则显示仅‘VFN’和‘线虫绝39号’为Mi/Mi纯合基因型。接种测定结果显示:‘VFN’和‘线虫绝3号’为南方根结线虫免疫品种,‘双抗228’‘仙客1号’‘Sparta’和‘线虫绝39号’为高抗品种,‘双抗265’和‘牟番1号’为抗病品种,其余均为感病品种。[结论]CAPS法容易产生假阳性,不适用于番茄Mi基因的检测,而PM3Fb/PM3Rb、PMi F3/PMiR3的引物对组合和SCAR标记Mi23F/Mi23R这2种方法能够相对准确地检测番茄Mi基因,其中SCAR标记经单次PCR反应即可直接鉴定Mi基因的有无及其基因型,应用更为便捷。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
陆秀红 黄金玲 刘志明 秦碧霞 万宇力
采用盆栽接种2龄幼虫法,对6份番茄Solanum lycopersicum种质材料进行了对南方根结线虫Meloidogyne incognita的抗性鉴定。结果表明:供试的番茄材料对南方根结线虫的抗性存在差异,其中,高抗材料4份,抗病材料1份,感病材料1份;采用酶切扩增多态性序列(Cleaved amplified polymorphic sequences,CAPS)方法对番茄抗性材料进行Mi-1基因检测,发现TY52、T27和Bss368 3份材料不含Mi-1基因,无限生长(红色)和T24含有Mi-1基因。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陆秀红 黄金玲 刘志明 秦碧霞 乔丽娅
采用盆栽病土接种法,鉴定58份番茄(Solanum lycopersicum)种质材料对南方根结线虫(Meloido-gyne incognita)的抗性。结果表明:供试的58份番茄种质材料对南方根结线虫的抗病性存在明显差异,其中高抗材料1份,抗病材料3份,感病材料3份,高感材料51份;根据已知NBS-LRR类抗病基因NBS区域的保守系列,设计简并引物,对抗性材料基因组进行体外扩增,获得了约500bp的预期片段。
关键词：
番茄 南方根结线虫 抗性 检测
[期刊] 中国农业科学
[作者]
贾双双 高荣广 徐坤
【目的】研究确定准确鉴定评价番茄砧木抗南方根结线虫侵染能力的方法,筛选抗性砧木材料。【方法】通过测定16个盆栽番茄砧木幼苗接种南方根结线虫50d时的相对生长量及相关抗病指标,利用系统聚类分析和隶属函数运算相结合的方法进行综合分析。【结果】南方根结线虫侵染对不同番茄砧木幼苗各器官相对生长量、相关抗病指标及其变异系数的影响显著不同,其中生长量的变异系数以相对根鲜质量较大,为20.20%,相对茎粗较小,仅6.22%。采用相对生长量及抗病指标分别进行系统聚类的结果与利用根结指数的聚类结果一致,但与病情指数的聚类结果存在些微差异。根据综合指标隶属函数运算,确定了供试番茄砧木抗南方根结线虫的顺序。【结论】...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
陈淑君 肖顺 程敏 邓明雪 张绍升 刘国坤
从福建省闽南地区的胡萝卜、辣椒和空心菜根系发现一种线虫,通过形态鉴定,结合ITS1-5.8S-ITS2 r DNA区、28S D2-D3区、COⅡ/IrRNA线粒体基因和线粒体DNA 63 bp重复区序列分析等分子生物学方法,将其鉴定为象耳豆根结线虫;采用特异性引物Me-F/Me-R对不同田块的象耳豆根结线虫种群进行进一步检测,结果表明,空心菜为象耳豆根结线虫的新寄主;受侵染的番石榴可能是闽南地区蔬菜象耳豆根结线虫病的重要初侵染源.由此说明,象耳豆根结线虫已经成为福建省蔬菜上的重要病原物,对蔬菜产业发展具
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
韩冰洁 焦俊 段玉玺 朱晓峰 陈立杰 王媛媛
蔬菜根结线虫病是目前我国北方温室大棚和南方露地蔬菜生产中的重要病害之一,为研究常用化学试剂对根结线虫活性的作用,考察3种化合物CuSO4·5H2O、FeCl3·6H2O和NH4HCO3对靶标线虫南方根结线虫(Meloidogyne incognita)卵孵化和2龄幼虫(J2)侵染能力的影响,以及对番茄植株生长的影响。结果表明,3种化合物均对南方根结线虫的卵孵化具有明显的抑制作用,65mmol·L-1NH4HCO3对南方根结线虫卵孵化的抑制作用最强,抑制率可达100%;NH4HCO3和CuSO4·5H2O对番茄根结形成均具有较强的抑制作用,FeCl3·6H2O抑制作用较弱;3种化合物对番茄植株生...
关键词：
南方根结线虫 化合物 番茄 植株生长
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陆秀红 张雨 秦舒婷 黄金玲 张禹 刘志明
根据已知抗病基因的NBS-LRR保守结构域设计简并引物,从抗南方根结线虫病的番茄材料cDNA中克隆抗病基因同源序列(resistance gene analogs,RGAs),并通过qRT-PCR技术检测RGAs与南方根结线虫侵染的相关性。序列分析发现,2条序列具有NBS-LRR保守结构域,分别命名为F5-8和F5-20;保守区域氨基酸比对结果显示,F5-8(GenBank登录号为MG860907)和F5-20(GenBank登录号为MG860908)与已知抗病基因保守区域具有很高的相似性,其中F5-8与Mi-1相应区域氨基酸相似性为94%,F5-20与Hero基因相应区域氨基酸相似性为96%。qRT-PCR结果发现,F5-8和F5-20在接种南方根结线虫2龄幼虫24h后其表达量均发生了变化。初步推测F5-8和F5-20为南方根线线虫侵染相关基因同源序列。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张立宁 程继鸿 杨瑞 孙中华 吴春霞 王绍辉
【目的】研究茉莉酸合成相关基因Spr2与LePrs对番茄抗根结线虫的影响,探讨茉莉酸在番茄抗根结线虫病中的作用。【方法】以番茄茉莉酸合成突变体spr2、茉莉酸过量表达转基因番茄35S::PS及野生型CM为试材,研究外源喷施茉莉酸甲酯及不同番茄试材相互嫁接对接种根结线虫后番茄根结数、蛋白质酶抑制剂PI-Ⅱ表达及Spr2、LePrs基因转录水平的影响。【结果】番茄茉莉酸合成突变体spr2较野生型与茉莉酸过量表达转基因番茄35S::PS容易感染根结线虫,外源喷施茉莉酸甲酯降低了番茄根结数。以茉莉酸过量表达转基因番茄35S::PS为砧木,可以提高嫁接植株对根结线虫的抵抗能力。【结论】Spr2突变降低了...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
方治 彭德良 李建洪
利用3个真菌菌株ZB-4、ZW-3、XX-8的发酵液对蕃茄根结线虫2龄幼虫进行室内离体活性测定和温室盆栽的防效试验。结果表明:供试3个菌株不同稀释倍数的发酵液在处理后24、48和72 h对番茄根结线虫都有一定的抑制作用,其中3个菌株的2倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为95.27%、91.27%、86.58%;4倍发酵液在处理后72 h对番茄根结线虫2龄幼虫的校正抑制率分别为68.52%、84.05%、60.33%。在温室盆栽试验中,用3个菌株的2倍发酵液处理番茄苗,与对照相比,处理后45 d番茄根结线虫的减退率分别达到46.7%、43.3%、36.7%,防治效果...
关键词：
蕃茄根结线虫 生物防治 真菌发酵液
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
朱峰 王芳 王东 左青 朱晓峰 王媛媛 段玉玺 陈立杰
Hsp90基因是真核生物中广泛存在且非常保守的热激蛋白基因家族中的重要成员,在生物的抗逆胁迫过程中起重要作用。从番茄基因组扩增Hsp90基因,连接到载体pCAMBIA1302上,构建了表达载体pCAM-Hsp90,利用实时定量荧光技术检测了番茄接种南方根结线虫后Hsp90基因的表达水平,结果表明:在20~25dpi后番茄根部Sl-Hsp90基因大量表达。此外,南方根结线虫的雌虫和二龄幼虫J2的Mi-Hsp90基因在高温和低温胁迫时表达量都高于对照,而且在35℃时表达量要高于4℃时的表达量,在J2中的表达量高于雌虫的表达量。说明Hsp90基因在番茄抗线虫侵染以及线虫适应环境方面起到非常重要的作用...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王刚 李二峰 茆振川 谢丙炎 冯东昕
【目的】研究南方根结线虫(Meloidogyne incognita)Me3毒性变异群体的分子标记,用快速有效的分子方法来鉴定毒性变异的发生。【方法】以南方根结线虫的无毒群体以及抗性基因Me3毒性群体为材料,用根据南方根结线虫基因组设计的100对引物和19对来自文献的引物进行扩增,筛选出在3个种群中扩增的差异条带,设计SCAR引物,并建立多重PCR反应体系。【结果】得到了7对能在3个群体稳定扩增出差异条带的多态性引物,把其中的2个位点开发为SCAR标记,能够区分开3个线虫群体。多重PCR反应体系在无毒群体和Me3毒性群体中分别扩增出1条999 bp和1条629 bp的条带,在混合群体扩增出99...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张绍松 李成云 周晓罡 丁玉梅 孙茂林
通过5年番茄栽培地的根结线虫发病状况调查,得出蔬菜栽培地的根结线虫发病率为90%~100%。采集发病株根系及其附着的根系土,利用蔗糖高渗溶液离心法与分离筛法分离,获得病原线虫3种虫态的虫体。接种不同虫态的分离物于培养的番茄幼苗,培养56 d后,调查结果显示:已分化并具有卵雏形的雌虫所产生根结和卵块团的数量极少,缺乏侵染性;接种虫卵和幼虫对苗期番茄根系具有侵染性,但形成根结时间不同,接种幼虫后10 d可见根结雏形,同时接种的虫卵,16 d可见根结雏形,病圃土则需17 d;接种J2幼虫后,苗期番茄单株平均形成卵块团数为48.1个,虫卵和病圃土则约有4.5个,表明接种幼虫是测试植物对根结线虫敏感性的...
关键词：
番茄 根结线虫 分离 苗期 接种
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
胡先奇 杨艳丽 冯志新 赵峥
运用抗根结线虫基因Mi簇中Mi 1.2的核苷酸序列 ,设计引物 ,对 2 8种烟草进行抗根结线虫基因同源序列的初步分析。在 2 8个烟草中 ,扩增出 10 1条DNA片段 ,大小 0 .1～ 4kb ,主要集中在 0 .5～ 1.5kb之间 ,多态性片段 78条 ,占 77.2 %。将烟草的抗性鉴定结果 ,与Mi 1.2同源序列的相似性对比分析 ,发现抗南方根结线虫 1号小种、3号小种的烟草 ,被扩增的Mi 1.2同源序列片段 ,比感病烟草的多。表明Mi 1.2同源序列多态性 ,与烟草抗南方根结线虫 1号小种、3号小种的特性相关。这一结果和理论上品种与抗病基因相关的DNA条带越多 ,该品种的抗...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
杨国栋 周宝利 毕晓华 张馨宇 滕龙 吴媛媛 王国华
为了明确不同番茄砧木的抗南方根结线虫特性,及抗性与生理指标、土壤生物学活性间的关系,采用温室盆栽人工接种法,鉴定了12个番茄砧木对南方根结线虫(Meloidogyn incognita)的抗性程度,测定番茄叶片防御酶活性和根系活力、相对电导率、叶绿素、脯氨酸、丙二醛等生理指标,采用连续稀释法测定土壤中微生物的种类、数量,并测定土壤酶活性,同时分析上述指标与病情指数的相关性。试验结果表明:番茄砧木Gardna,Baliya,Greengard,Anka-T,Volante和9748表现为高抗;M158和RS2表现为中抗;Kagemusha和RS1表现为抗病;Vespa表现为感病;L-402表现为...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
巩彪 张丽丽 隋申利 王秀峰 魏珉 史庆华 杨凤娟 李岩
【目的】研究土壤添加大蒜秸秆对番茄根结线虫病及根际微生态的影响，旨在探明大蒜秸秆对植物、根结线虫病和根际微环境的综合效应，为合理开发大蒜秸秆资源提供理论依据和技术支撑。【方法】试验设置土壤添加０（ＣＫ）、１％（Ｔ１）、２％（Ｔ２）、４％（Ｔ３）和８％（Ｔ４）共５个大蒜秸秆添加浓度（ｗ／ｗ）。于日光温室中采用装有５ Ｋｇ田园土的花盆（直径２０ Ｃｍ，深２０ Ｃｍ）进行番茄幼苗培养，缓苗后于番茄幼苗周围打洞接种南方根结线虫二龄幼虫（５ ０００ Ｊ２／株）。每３０盆作为一个处理，培养温度控制在白天／夜晚为２８—３２℃／１５—２３℃。于处理１０、３０和５０ ｄ后取番茄根系样品，并采用抖动法收集根际土壤．．．
关键词：
番茄 根结线虫 大蒜秸秆 根际微生态
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