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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
格日勒图 徐立新 严若峰 李祥瑞
利用DNA重组技术,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenalla)第2代裂殖子抗原基因MZ5-7的完整 阅读框(ORF,945 bp)克隆到真核表达质粒pcDNA4．0中,构建了DNA疫苗pcDNA4．0-MZ。用同样方法,将鸡成 熟白细胞介素-17(IL-17)基因的完整阅读框(507 bp)与MZ5-7基因串连,使MZ5-7基因位于IL-17基因的上游, 将串连基因克隆到pcDNA4．0中,构建成免疫调节型DNA疫苗pcDNA4．0-MZ-IL-17。2种DNA疫苗纯化后,胸 部肌肉注射免疫1周龄雏鸡(50 μg／鸡),在免疫后3．5,7,15和20 d取注射和非注射部位肌肉组织,分别...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
谢昆 严若峰 徐立新 李祥瑞
利用DNA重组技术,分别将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)pEtK2基因单独或与鸡白细胞介素2基因(IL-2)串联克隆到DNA疫苗载体pVAX1或pcDNA4.0(c)上,构建了pVAX1-pEtK2、pcDNA4.0(c)-pEtK2、pVAX1-pEtK2-IL-2、pcDNA4.0(c)-pEtK2-IL-2 DNA疫苗。酶切鉴定正确后分别将重组质粒胸肌注射14日龄雏鸡,1周后取注射部位肌肉组织,用RT-PCR和Western-blotting法检测保护性抗原的表达情况。结果表明,抗原基因pEtK2和pEtK2-IL-2串联基因均能在注射部位肌肉组织中成功表达。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林青 张志敏 于三科 翟军军 段旭基
用杨凌地区鸡柔嫩艾美耳球虫早熟株和母株分别免疫鸡,对免疫前后鸡体的平均增重、饲料转化率、盲肠病变记分和卵囊抑制率等指标进行了分析。结果发现,早熟株免疫组对球虫再攻击时的卵囊减少率分别为77.3%和67.6%,高于母株免疫组的41.7%和57.1%,且对同种同株球虫攻虫时的保护力优于同种不同株球虫。经2次免疫后,早熟株免疫组的鸡平均增重、饲料转化率均高于母株免疫组和对照组,而盲肠病变记分小于后者;早熟株免疫组经球虫攻击后卵囊的繁殖量明显减少,且卵囊抑制率均在91%以上。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李博 刘群 蒋金书
AA肉鸡雏鸡分别经口免疫柔嫩艾美耳球虫毒株早熟株 ,用免疫组化ABC法染色检测小肠、盲肠扁桃体、脾脏中CD4 +、CD8+T淋巴细胞动态变化 ;用淋巴细胞转化实验MTT法检测T淋巴细胞活性。结果表明 :球虫免疫鸡后 ,CD4 +T淋巴细胞在一次免疫后迅速增殖 ,第 6天达到第一峰 ,免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 38%和 4 4 % ,免疫早熟株的鸡盲肠与脾脏中CD4 +T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到 36 %和 4 3% ,而二次免疫后和对照相比很少有显著差异。CD8+T淋巴细胞在一次免疫后比CD4 +增殖速度慢 ,第 9天达...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
翟少钦 闫志强 陈春林 朱买勋 唐红梅 付文贵
将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30只，模型组灌服1×10~(4)个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型，正常组灌服等体积生理盐水，感染5 d，剖杀试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测，对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α多样性、β多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价，探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响。结果表明：与正常组相比，感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低，Shannon指数显著降低，Simpson指数显著升高；门水平上，模型组变形菌门的相对丰度极显著升高，而厚壁菌门的相对丰度显著降低，拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低；属水平上，正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属，而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高。可见，艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性，促进潜在致病菌的建立和生长，尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖，快速生长。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
林青 于三科 陈秀荔 潘广林 王建锋 李涛
构建了一种新的鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术 ,并对杨陵柔嫩艾美耳球虫地理株进行了分离 ,对继代增殖的纯种卵囊进行了致病性试验。结果表明 ,该单卵囊分离技术简单易行 ,单卵囊感染成功率可达4 0 % ;该虫株对雏鸡有很强的致病性 ,经口接种 1× 10 5个孢子化卵囊 ,致死率高达 80 %。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
查红波 蒋金书
通过石蜡切片、H.E.染色等研究了巨型艾美耳球虫 Eimeria maxima 在免疫鸡体内的发育及鸡体相应肠道的组织学变化.E.maxima 在非免疫鸡体内有3代裂殖生殖。在其第1,2代裂殖生殖阶段,所见虫体寄生的空肠组织发生粘液变性.在裂殖生殖后期和配子生殖阶段,非免疫攻毒鸡空肠绒毛组织病理学变化明显,包括粘膜上皮大量脱落,固有层淋巴细胞浸润等,有时可见大量上皮间淋巴细胞(IEL)出现,在免疫攻毒鸡,E.maxima 从子孢子的侵入、移行阶段在免疫鸡体内就受到抑制.随着时间推移,第1,23代裂殖生殖受到日益加重的抑制,最终使虫体没有进入有性生殖阶段。给免疫鸡攻毒后24h 即可见空肠...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋金书 胡景辉
采用体外脱囊的方法,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和堆型艾美耳球虫(E.aceroulina)的子孢子分别接种于9日龄 SPF 鸡胚的尿囊腔和鸡肾原代细胞中,置40～41℃恒温箱中培养.E.tenella 子孢子接种 SPF 鸡胚尿囊腔后,24h 后发现早期的第一代裂殖体;34h 后可观察到成熟的第一代裂殖体和裂殖
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
安健 汪明 孔繁瑶 殷佩云
为了观察马杜霉素对球虫超微结构的影响 ,探讨马杜霉素抑杀球虫的作用机理 ,将马杜霉素按0 .0 0 0 5%浓度混入鸡的育雏饲料中 ,1 2日龄时 ,用该饲料喂给药组的鸡 ,同时 ,另设定 1组不用药对照组 ,在1 4日龄时 ,参加实验的 2个组的每只实验鸡接种对马杜霉素敏感的孢子化的鸡柔嫩艾美尔球虫卵囊 2× 1 0 4个 ,感染后 84,96,1 0 8,1 2 0和 1 32 h每组分别捕杀 2只实验鸡 ,取鸡盲肠组织 ,制成超薄切片 ,通过透射电镜观察鸡体内的柔嫩艾美耳球虫敏感株在马杜霉素作用下超微结构的变化 ,与对照组比较 ,发现线粒体表现为数量增多和形态改变。形态改变表现在有的线粒...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
秦泽荣 孔繁瑶 荒川皓 马场荣一郎
本研究揭示了柔嫩艾美耳球虫感染可以引起鸡肠炎沙门氏菌感染的复发。复发的主要表现为盲肠内容物的肠炎沙门氏菌阳性率和数量再次显著地升高;肠炎沙门氏菌在盲肠中的滞留时间显著延长。这种复发与肠炎沙门氏菌的初始感染量及球虫感染时间有关。肝脏和脾脏阳性率无显著变化。
关键词：
肠炎沙门氏菌 复发 柔嫩艾美耳球虫
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
秦泽荣 孔繁瑶 荒川皓 马场荣一郎
本试验对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)感染对肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)感染的影响进行了研究。实验结果表明:肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫的相互作用显著;在球虫感染后第4,10,14d 时,柔嫩艾美耳虫球虫感染可显著地(P<0.01)增加盲肠内容物中肠炎沙门氏菌数量。肠炎沙门氏菌和柔嫩艾美耳球虫之间协同作用与肠炎沙门氏菌的感染量大小和感染后的时间显著相关(P<0.01)。柔嫩艾美耳球虫感染并没有显著地提高肝脏、脾脏中肠炎沙门氏菌的阳性率。不同感染量的肠炎沙门氏菌感染对鸡盲肠的球虫病变记分显著影响.
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
傅小平 李银 沈永林 杨廷桂 陈伟华
在感染柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella)的雏鸡日粮中添加NO前体物L Arg或在饮水中添加iNOS抑制剂Dex ,探讨NO在鸡感染柔嫩艾美球虫过程中的作用。结果显示 ,未感染组鸡的血浆中NO水平无明显变化 ,感染组鸡则明显升高 ,第 6天达到峰值 (P 0 0 5 ) ;添加Dex组鸡则明显高于不添加的对照组 (P
关键词：
一氧化氮 柔嫩艾美球虫 鸡
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋建林 蒋金书
本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织，铜筛过滤除去大颗粒杂质后，以1．1mol·mL－1蔗糖离心漂浮卵囊，然后用小于0．5mol·mL－1蔗糖溶液反复漂洗，最后以5％次氯酸钠消毒处理，获得了大量纯化柔嫩艾美耳球虫卵囊。孢子化卵囊经研磨，消化，游离出子孢子后，过DEAE-纤维素52层析柱，以0．05mol·mL-1，Tris－HCl，（pH＝80，0．15mol·mL1-NaCl）洗脱，层析往高5cm，洗脱液水柱高3cm，流速为2mL·min－1，纯化出了子孢子。取人工感染球虫鸡的120h后的盲肠，游离出第二代裂殖子，铜筛过滤后，过柱方法同前，纯化出了第二代...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈刚 蒋金书
利用肠粘膜压片镜检的方法,对 E.brunetti,E.maxima 和 E.acervulina 在鸡体内的发育部位和各期虫体的形态学特性进行了研究,经三次重复试验检查结果表明,E.brunetti 第一代、第二代裂殖生殖主要在空肠和回肠进行;第三代裂殖生殖,配子生殖和卵囊形成主要在空肠、回肠、直肠和盲肠近端进行;第三代裂殖生殖,配子生殖和卵囊形成主要在空肠、回肠、直肠和盲肠近端进行.朋代裂殖体出现时间分别为接种后24～48h;56～80h 和88～96h;小配子体与大配子体均于104～112h 出现,未完全成熟的卵囊和极少数成熟卵囊见于112～120h。
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