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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 张红英  崔保安  王学兵  赵现敏  邱妍  
将24头35日龄断奶仔猪随机分为6组,2种多糖(山药多糖和黄芪多糖)分别以高、低2个剂量(山药多糖剂量17.10、8.55mg/kg,黄芪多糖剂量为11.50、5.75mg/kg)和猪PRRSV灭活苗同时注射,于免疫后不同时间点采血,监测PRRSV抗体水平和外周血中T淋巴细胞亚群的变化.结果表明,2种多糖均能增强免疫猪的体液免疫,其中以高剂量的黄芪多糖效果较好;2种多糖均能促进猪CD3+细胞的增殖,其中以山药多糖效果较好,提示2种多糖对PRRSV灭活苗免疫效果均有较好的增强作用.
[期刊] 华北农学报  [作者] 张红英  王学兵  崔保安  赵现敏  陈红英  金钺  
研究山药多糖对PRRSV灭活苗免疫抗体和猪外周血T细胞亚群的影响。选择35日龄断奶仔猪16只,随机分为4组,将山药多糖分别以17.1mg/kg和8.55mg/kg两个剂量和猪PRRSV灭活苗同时注射,于免疫后7,14,24,34,44,54,69,79d采血,ELISA方法检测猪PRRSV抗体水平,流式细胞术检测猪外周血中T淋巴细胞亚群的变化。结果表明,山药多糖可显著提高PRRSV灭活苗免疫猪外周血CD3+和CD8+细胞数量,在免疫34d后,两个剂量的山药多糖均可显著提高PRRSV灭活苗免疫抗体水平。山药多糖可以作为免疫增强剂与PRRSV灭活苗联合使用。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 邱妍  崔保安  胡元亮  张红英  王远阁  
450羽14日龄蛋公鸡随机均分成9组,用鸡新城疫-传染性支气管炎二联(NDV-IBV)弱毒苗首次免疫的同时,8个试验组分别肌肉注射高、低剂量的黄芪多糖、板蓝根多糖、牛膝多糖和山药多糖溶液,对照组注射生理盐水,每天1次,连续3 d。28日龄用NDV-IBV灭活油乳苗再次免疫。各组分别于首次免疫后第7、14、21、28、35、42和49天随机抽取8羽翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制(HI)抗体效价;于首次免疫后第10、20、30、40和50天每组随机抽取5羽心脏采血,分离淋巴细胞,分别用MTT法和流式细胞仪双染色法测定淋巴细胞增殖和CD4+、CD8+T淋巴细胞含量的动态变化。结果...
[期刊] 水产学报  [作者] 王有基  林江兴  李琼珍  胡梦红  吴芳丽  沙毅杰  吕为群  
为更好地了解翡翠贻贝血淋巴细胞的免疫功能和拓展该贝类在环境免疫学中的应用,本研究调查了其血淋巴细胞亚群分类,并运用流式细胞术分析了各个亚群的相关免疫功能。结果显示,在翡翠贻贝的血淋巴中主要存在3种血淋巴细胞,包括粒细胞、半粒细胞(分大小2种)和透明细胞。粒细胞占细胞总数的40.4%±8.4%,直径(7.49±1.32)μm,细胞内部充满颗粒;半粒细胞占34.6%±9.4%,直径(12.45±2.21)μm,内部含有部分颗粒,其中小半粒细胞直径(6.64±1.05)μm;透明细胞占15.6%±4.8%,直径(4.69±1.01)μm,细胞内部基本无颗粒。流式细胞分析显示,粒细胞在吞噬作用上最为活...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 于正强  陈瑾  彭西  方静  陈科杰  何杨  
为探明黄曲霉毒素B1(AFB1)对雏鸡细胞免疫功能的影响,将100只1日龄艾维茵健康公雏鸡随机分为4组,分别喂以基础日粮(玉米–豆粕型基础日粮,对照)和AFB1日粮(基础日粮中AFB1的添加量分别为0.15、0.3、0.6 mg/kg,分别记为AFB1Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组),试验期21 d。以流式细胞术检测雏鸡外周血T淋巴细胞亚群变化;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测雏鸡血清IL–2和IFN–γ含量变化。结果显示,与对照组相比,AFB1Ⅱ和AFB1Ⅲ组7、14和21日龄雏鸡外周血CD3+,CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞百分比下降明显(P<0.05或P<0.01),血清中IL–2和IF...
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 沈筱芸  郭杏  黎远东  陈萍  王琦  冯雁  
流式细胞技术是医学分子与细胞生物学研究领域中重要的检测技术之一。根据流式细胞仪检测教学与科研工作的要求,该文设计了一个应用流式细胞术测定金花茶水提物作用功效的综合类实验项目。通过该实验可以使学生掌握体外细胞扩增和培养技术,以及使用普通倒置显微镜观察评估不同浓度的金花茶水提物对人外周血T淋巴细胞的刺激增殖功效,同时学会采用流式细胞术检测和分析金花茶水提取物是否具有活化T淋巴细胞作用的技术方法,有助于学生更好地理解和掌握流式细胞术的基本原理和实际应用。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 张彤瑶  高雅松  张爱龙  周家生  宋慧  
为探索不同含量金针菇菇脚(Flammulina velutipes stembase,Fvs)添加到肉鸡饲粮中对肉鸡生产性能以及t、b淋巴细胞免疫功能的影响,采用1日龄健康aa肉鸡270只,随机分为5组,每组3个重复,每个重复18只。试验分为:对照组(基础日粮);抗生素组(基础日粮+0.05%黄霉素);低剂量组(基础日粮+2%Fvs);中剂量组(基础日粮+4%Fvs);高剂量组(基础日粮+6%Fvs)。试验为期42d,检测指标为:生产性能,免疫器官指数,外周血t、b淋巴细胞增殖率(mtt法测定),血清细胞因子il-2、il-4、iFn-γ含量测定(elisa法测定),血清免疫球蛋白iG-a、i...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 范云鹏  王德云  胡元亮  刘家国  赵晓娟  袁菊  高焕  王远垒  
为了观察黄芪多糖(APS)被制备成黄芪多糖脂质体后是否能够提高其生物活性,用MTT法测定了其对鸡T、B淋巴细胞增殖的影响,以APS溶液和空白脂质体作为对照。结果显示:APS脂质体在125~15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同植物血凝素(PHA)作用均能显著促进鸡T淋巴细胞的增殖,并且在125~31.25μg.mL-1时,效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05);APS脂质体在125~15.625μg.mL-1时无论是单独作用还是协同脂多糖(LPS)作用均能显著促进鸡B淋巴细胞的增殖,并且在31.25μg.mL-1的效果显著优于APS溶液和空白脂质体(P<0.05)。表明...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 特列克·阿依恒别克  赛福丁·阿不拉  萨比热·热夏提  况玲  德力拜尔·木拉提  阿得力江·吾斯曼  
[目的]探讨骆驼刺酸性多糖 (Acidic Alhagi sparsifolia shap polysaccharide, aASP) 对小鼠脾淋巴细胞的免疫增强作用。[方法]本试验采用醇沉法提取骆驼刺多糖,采用柱层析法对骆驼刺多糖进行分离及纯化,采用苯酚硫酸法、硫酸-咔唑法和BCA微孔酶标仪法,检测糖含量、糖醛酸和蛋白含量,采用红外光谱法鉴别多糖性质。采用MTT法确定aASP对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度,在安全浓度范围内500 μg·mL~(-1)、125 μg·mL~(-1)和31.25 μg·mL~(-1)三个浓度下检测单独、协同LPS和PHA对脾淋巴细胞的增殖效果;流式细胞术检测aASP对淋巴细胞亚群分化的影响;ELISA法检测aASP对淋巴细胞细胞因子分泌的影响。[结果]骆驼刺多糖提取物中多糖含量为81.8%±1.2%,糖醛酸含量为17.34%±0.75%,蛋白含量为0.54%±0.08%;红外光谱显示aASP在1746.53 cm~(-1)处有较强的吸收峰,结合糖醛酸含量判定aASP为酸性多糖。高、中、低浓度的aASP均可促进脾脏淋巴细胞增殖,协同LPS和PHA能够更显著促进B细胞和T淋巴细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术和ELISA检测结果显示aASP能够促进CD4~(+)T和CD8a~(+)T细胞的分化,并促进脾淋巴细胞分泌IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-4。[结论]aASP可以增强小鼠脾脏淋巴细胞的增殖,诱导小鼠脾脏T淋巴细胞产生Th1及Th2混合型免疫应答,免疫细胞偏向CD4~(+)T细胞分化。
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 李丽立  张彬  朱南山  印遇龙  彭慧珍  邱细敏  唐志如  
为探讨多糖对早期断奶仔猪淋巴细胞增殖与细胞因子的影响,选用21d龄健康杜×长×大断奶仔猪(5.30±0.25kg)25头,随机分为5个组,每组5头,分别饲喂玉米-豆粕型基础日粮(CR)、基础日粮+0.3%白术纯多糖(PPAM)、基础日粮+0.6%复合粗多糖(CCP)、基础日粮+0.6%白术粗多糖(CPAM)、基础日粮+抗生素(15%金霉素150mg/kg+4%黄霉素50mg/kg)(ANT),试验期为14d。结果显示:PPAM、CCP能提高血清中TNF的含量(P<0.05),同时PPAM、CCP、CPAM也有提高淋巴细胞增殖和IL-2的趋势。表明饲料中添加PPAM、CCP能够有效提高早期断奶仔...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李晓琳  郭华  刘子臣  段滇宁  张亚群  韩俊源  张书霞  
选取6头猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原及抗体均为阴性的普通断奶仔猪,无菌取脾脏,制成单个细胞悬液进行体外培养,并分为PCV2组和对照组,PCV2组用PCV2与脾细胞共同培养,对照组加等量RPMI-1640培养液。分别于培养0、6、12、24和48 h后收取悬浮的淋巴细胞,用间接免疫荧光法检测PCV2感染淋巴细胞的情况,相对定量RT-PCR法检测淋巴细胞中TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8和TLR9 mRNA的表达量,Western blot检测TLR3和TLR4的蛋白表达情况。结果显示:PCV2感染后,TLR2和TLR9 mRNA的表达量在1...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘永祥  崔锦  程伟  朱宽佑  姜东风  
【目的】研究日粮中添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对仔猪外周血T淋巴细胞的细胞毒活性影响,为将CLA作为免疫调节剂调控动物机体的免疫力和应用于畜禽乃至人类的营养实践提供参考。【方法】30头21日龄杜长大断奶健康仔猪按体质量相近、性别比例一致原则两两配对,随机分为对照组和CLA日粮组,分别喂给基础日粮和2%CLA日粮,每组5个重复,每个重复3头猪,63日龄时用肝素抗凝真空管前腔静脉采取血样,测定外周血T淋巴细胞亚群、细胞毒活性、穿孔素和颗粒酶B mRNA表达及脂肪酸组成。【结果】日粮添加CLA不影响仔猪外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+的数量(P>0.0...
[期刊] 华北农学报  [作者] 朱南山  张彬  李丽立  侯德兴  
本试验研究了白术多糖对仔猪血淋巴细胞转化率及细胞内信息分子一氧化氮(NO)、环腺苷酸(cAMP)、环鸟苷酸(cGMP)及干扰素γ(IFN-γ)的影响。分离制备仔猪血淋巴细胞悬液,MTT法检测细胞增殖;酶联免疫法测定培养上清液IFN-γ的浓度;放射免疫法测定cAMP、cGMP的浓度;利用硝酸还原法测定NO,发现白术多糖能显著促进仔猪血淋巴细胞转化率I、FN-γ、细胞内NO浓度及cAMP浓度。以上结果提示,白术多糖能显著提高血淋巴细胞免疫功能,其作用是通过改变细胞内信息传导实现的。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李宏梅  成子强  刘建柱  刘法孝  郭慧君  崔治中  
【目的】研究致瘤性病毒REV、ALV-J单一感染和共感染肉鸡后血液和脾T淋巴细胞的免疫功能与脾组织病理学的变化。【方法】用一定剂量的REV和ALV-J单一感染及共感染1日龄肉鸡,取感染后不同日龄鸡的血液和脾组织,无菌分离淋巴细胞,用3H-TdR掺入法和MTT法分别检测T淋巴细胞增殖活性和细胞毒T淋巴细胞(CTL)的杀伤活性,并对脾脏进行组织切片、H.E染色检测组织病理学变化,通过免疫荧光抗体结合试验(immunofluorescence assay,IFA)分析组织病毒感染量变化。【结果】感染REV和ALV-J的肉鸡血液和脾T淋巴细胞的增值活性和CTL杀伤活性在整个感染监测期出现降低,单一感染...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 史秋梅  
为探讨中草药免疫增强剂的作用机理,进行了鸡T淋巴细胞数量的动态观察。将240只1日龄雏鸡随机分为3组:1组为对照组,其余2组分别饮用10和5mL/L中草药免疫增强剂48d,采用α醋酸萘酯酶染色(ANAE)法检测了12,24,36和48日龄各组鸡血液中T-淋巴细胞数量。结果显示,饮用中草药免疫增强剂后,T-淋巴细胞百分率较对照组显著提高,且10mL/L中草药免疫增强剂组T-淋巴细胞百分率较5mL/L组显著提高。并运用组织学常规切片技术和ANAE法,观察了10mL/L中草药免疫增强剂组和对照组在14和21日龄时鸡小肠黏膜淋巴组织中T淋巴细胞的数量分布。结果显示,10mL/L中草药免疫增强剂组鸡小肠...
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