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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 胡芸  李茜茜  蔡皓  张红星  李林  
从发生冻害的植物组织中分离到1株冰核细菌MB03,该菌株在-3℃时在2min内的冻结率达到96.5%,而产生1个冰核所需要的细胞数约为2.9×103个,其冰核活性明显高于冰核细菌标准菌株和其它分离菌株。进一步对MB03进行了鉴定,经个体形态与培养特征观测、部分生理生化反应、G+C摩尔分数测定、16SrDNA序列对比分析、菌落原位杂交探测特异性基因和PCR扩增冰核基因等鉴定,确定该菌为丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)。
[期刊] 海洋渔业  [作者] 张晓玲  陆亚男  樊成奇  马丽艳  蒋平  俞勇  黄洪亮  陈雪忠  杨桥  
从采集自南极FAO 48.1海域海水样品中分离纯化到一株产吡咯喹啉醌(PQQ)海洋细菌,对其进行了细菌分类学鉴定、摇瓶培养发酵、发酵产物提取及HPLC定量分析,并对纯化的PQQ进行了针对一氧化氮(NO)抑制活性及羟自由基(.OH)清除抗氧化活性评价。结果表明,该菌株与副球菌属(Paracoccus sp.)内菌株的16S rRNA基因序列同源性较高。综合多个分类学指标的分析结果,将其鉴定为属于副球菌属,命名为Paracoccus sp.PQ-08。生物活性评价结果表明,PQQ可显著抑制人脐静脉内皮(ECV-304)模式细胞内诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)在mRNA转录水平及蛋白水平的表达量,...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 王娜  肖军  肇莹  王红  陈珣  龚娜  杨涛  
利用平面夹层和平板培养瓶厌氧法从油田区的岩石中分离到8株细菌,经气体组成及产氢能力检测,发现其中2株细菌具有产氢能力。在60℃高温条件下,菌株ZX-1的氢转化率最高,为1.8mol H2.mol-1葡萄糖。该菌为革兰氏阴性、杆菌、有芽孢、无鞭毛,菌体大小为(0.35~0.45)μm×(2~8)μm;菌落特征表现为圆形、乳白色、表面光滑、不透明;生理生化试验结果表明,明胶液化、硝酸盐还原、柠檬酸盐利用、葡萄糖为阳性,氧化酶、淀粉水解、V-P反应为阴性,初步鉴定为短芽孢杆菌属(Brevibacillus)。经16S rDNA PCR扩增及测序结果表明,该菌序列与Brevibacillus bors...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 周鑫钰  朱宏建  周倩  任佐华  吴凌婧  刘二明  
为了筛选具有生防价值的拮抗烟草青枯雷尔氏菌的内生细菌,从湖南长沙、永州、郴州烟草青枯病发病区的健康烟株采集茎秆,采用稀释平板分离法获得150个内生菌株。抑菌结果表明,21个内生菌株对烟草青枯雷尔氏菌2316菌株有拮抗效果,占总菌株数的14.0%。拮抗菌株中,F1菌株24 h对烟草青枯雷尔氏菌株2316抑菌圈直径达6.5 mm,其抗菌谱研究表明,该菌株对辣椒白绢病菌等5种植物病原真菌和柑橘溃疡病菌等5种病原细菌的生长均有抑制作用。采用形态学、生理生化鉴定及16S rDNA序列系统发育分析,F1菌株为莫哈韦芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 魏甜甜  叶甜甜  程国军  李友国  
从湖北省某重金属矿区的土壤中分离、筛选到1株能够还原Cu2+的菌株TT1。该菌株可以单抗3 mmol/L的Cu2+。经对该菌株进行形态特征以及16S rDNA序列比对分析,确认该菌株属于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。TT1与Bacillus licheniformis的同源性最高,达到98%。在含有0.2 mmol/L Cu2+的培养条件下,菌株TT1的生长不受影响。Cu2+还原的最适温度为30℃,在该温度下,24 h时间内TT1可以还原71%的Cu2+;Cu2+最适还原的pH为6。因此,TT1菌株有望用于含Cu2+废水的处理。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 周围  李友国  程国军  杨凯  
从湖北省某重金属矿区土壤中分离到1株抗Cr6+(Ⅵ)的菌株,命名为MDS07。该菌株可以在含12mmol/L的Cr6+(Ⅵ)培养基上正常生长。经对该菌株进行形态观察和16S rDNA序列比对分析,确认该菌株为巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium。通过构建系统发育树,分析了该菌在系统发育中的地位。对MDS07进行了重金属抗性谱研究,结果表明该菌株对Cr、Zn、Ni等重金属具有较高的抗性。进一步研究发现,MDS07菌株同时含有chrB、czcD和nccA等基因,它们分别具有Cr、Zn、Ni等重金属抗性,表明MDS07菌株的重金属抗性是由抗性基因引起的。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 郭照辉  黄军  魏小武  罗容珺  伍善东  刘清术  
从烟–稻–(油)多年轮作的耕地土壤中分离得到1株广谱拮抗菌HMI–23,对水稻立枯丝核菌、油菜核盘菌、青枯雷尔氏菌具有强烈抑制作用。经过16S rDNA的序列比对,初步认为该菌为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌株发酵液抑菌活性对温度、紫外线和蛋白酶K不敏感,基因组中含有多个已知脂肽抗生素合成相关基因,脂肽粗提物亦对立枯丝核菌、核盘菌、雷尔氏菌有强烈的抑制作用。质谱分析结果表明,该粗提取物中可能含有多种已知的脂肽,如伊枯草菌素A、抗霉枯草菌素B、杆菌霉素D、丰原素B等。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 郭照辉  单世平  张德元  刘清术  魏小武  杜东霞  
采用梯度浓度驯化方法,从重金属镉污染土壤中分离、纯化1株具有较强镉抗性的菌株(编号为6–5)。经形态观察和生理生化分析、16S rDNA序列同源性比较以及系统发育分析,鉴定该菌株为贪铜菌属细菌,能耐受镉离子的最高浓度为20 mmol/L,在0.54 mmol/L镉离子LB培养基中,该菌株对镉离子的吸附量达72.18%。最低抑制浓度试验结果表明,该菌株对铅、铜、铬、锰、锌也表现出了一定的抗性。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘建玲  雷毅  阴耀邦  王高学  
【目的】从温泉的底泥中分离、鉴定能产生免疫增强活性胞外代谢产物的嗜高温菌,并对其胞外代谢产物的免疫增强活性和抗病性进行研究。【方法】通过菌株个体形态、菌落形态和生理生化特性,初步排除从陕西西安东大温泉的底泥分离菌株中的重复菌株;以白细胞吞噬活性、白细胞杀菌活性、血清溶菌酶和血清SOD活性为指标进一步筛选获得目的菌株,采用个体形态、群落形态、生理生化特性和分子生物学方法对目的菌株进行初步鉴定;通过大孔吸附树脂浓缩活性成分,硅胶柱层析,以白细胞吞噬活性、白细胞杀菌活性、血清溶菌酶和血清SOD活性、免疫相关基因转录水平和免疫保护率为参考指标,活性追踪分离获得该菌株的主要活性物质。【结果】筛选到1株嗜...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 孙翰昌  
从养殖的患病鲢(Hypophthalmichthys molitrix)组织分离出1株病原菌CQWL002,革兰氏阴性,短杆状,菌落半透明。经回归感染试验,证明该菌为鲢的病原菌。用API系统结合常规生理生化实验对该菌进行初步鉴定。为了进一步确定该菌的分类学地位,测定了其16SrDNA序列,分析了相关细菌的同源性,构建其系统发育树。结果表明,该菌株与河流弧菌(Vibrio fluvialis)的亲缘关系最近。综合上述几种方法的鉴定结果,最后鉴定株菌CQWL002为河流弧菌。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘珍珠  樊振  高雁  李玉国  刘欢欢  马贵军  娄恺  刘建伟  晁群芳  曾军  
【目的】分离,鉴定冰川前缘原生裸地土壤中紫色非硫光合细菌,并且对其氮转化能力进行分析。【方法】采用紫色非硫光合细菌富集培养基从天山1号冰川前缘土壤中富集,分离紫色非硫光合细菌,纯化后的单菌落采用形态学观察和基于16S rRNA测序的分子生物学进行鉴定。对分离得到的菌株其对氨氮和硝态氮转化能力动态变化进行为期15 d的监测。【结果】通过富集培养共分离得到5株光合细菌,活细胞吸收峰检测结果显示这几株菌在480、510、590和810 nm处有明显吸收峰;菌株最适生长pH为7.0。分子生物学鉴定4株为类球红杆菌(命名1Y, 241, GZ, G6),1株为沼泽红假单胞菌(LG)。菌株LG对氨态氮的转化率最高为65.71%,菌株GZ为56.22%次之,其余转化率为53%左右。菌G6对硝态氮的转化率最高能够达到95.79%,其次是菌株LG为95.58%,最弱的是菌株241为69.96%。并且,经光合细菌转化后的硝态氮和铵态氮仅有2%左右转化为亚硝酸盐,其余均转化为菌体蛋白。【结论】光合细菌能够高效地将无机氮转化为有机氮,其对于贫瘠土壤中氮素的固定和高效利用可能具有重要意义。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 姚润贤  袁哲明  
为获得具有高冰核活性的基因工程菌,从冰核细菌Erwinia ananas 110扩增冰核基因iceA,将其克隆到pMD19–T载体上,转化大肠杆菌DH5α,单、双酶切鉴定并测序;阳性克隆目的片段亚克隆到表达载体pET–23a(+)上,转化大肠杆菌DH5α,单、双酶切鉴定重组质粒;阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,并经IPTG诱导表达。SDS–PAGE电泳检测表明,冰核基因iceA能够并以包涵体形式表达,相对分子质量约为180 000。冰核活性测定结果表明,重组菌BL21(DE3)pLysS/pET–ice的冰核活性与野生冰核细菌Erwinia ananas 110在–5、–...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 邓振山  南婧  张海州  李军  韦革宏  
【目的】分离能够降解高氯.马拉硫磷的菌株,并对其降解特性进行初步研究,以探寻高氯.马拉硫磷无公害降解方法。【方法】利用富集及驯化培养方法,从长期施用并受高氯.马拉硫磷严重污染的土壤中,分离筛选出1株能够高效降解高氯.马拉硫磷的菌株;在形态特征和生理生化鉴定的基础上,对其16SrDNA序列进行分析,并研究了其对高氯.马拉硫磷的降解特性和最佳摇床培养条件。【结果】获得了1株能以高氯.马拉硫磷作为惟一碳源和氮源生长的菌株,经形态特征观察、生理生化特性鉴定和16SrDNA序列分析,初步鉴定其属于假单胞菌属;系统发育树显示,该菌株与荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的相似性最...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 曾大鹏  张永祥  晁龙军  汪来发  孙福在  
从辽宁省、黑龙江省及北京市的杨树不同部位及干部溃疡类病害的病斑上分离到大量细菌。约有60%左右的菌株在-3.5~6℃具有冰核活性。其中,从树干冻伤部位分离的细菌数量最多,冰核活性细菌的比例也最高;由DotheorellagregariaSacc.引起的大型溃疡病病斑上也分离到较多的冰核活性细菌。用干部大型溃疡斑上分离到的1个冰核活性较强菌株[Erwiniaherbicola(Lohnis)Dye]和叶部分离1个冰核活性强的菌株(PseudomonassyringaeVanHall),在人工霜箱中测定,可使杨树干条的结冰温度从-4.6℃分别提高到-2.2℃和-1.7℃。初步调查研究的结果表明,北...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 邵登科  吕正阳  李望豪  周瑞鹏  赖泽成  张春源  樊改丽  王荣波  林占熺  鲁国东  叶文雨  
通过研磨组织、稀释分离等方法,从巨菌草的健康叶片中分离、筛选出1株具有溶磷和分泌吲哚乙酸能力的内生细菌,命名为FJU3,并对其生理生化特性、16S rDNA序列进行测定和分子生物学鉴定,也研究了其对盆栽玉米的促生效果.结果表明:菌株FJU3具有一定的溶磷能力,其分泌吲哚乙酸的质量浓度达到了14.2 mg·L~(-1),且显著高于其他菌株;经形态特征和分子生物学鉴定该菌株为解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus);菌株FJU3在产铁载体、接触酶、解硅酸盐等生理生化特性试验中均为阳性反应;玉米盆栽促生试验结果表明,促生效果比较显著的是地上部鲜质量和株高,与对照组相比,分别增加了76%和41%.
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