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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
郭习勤 王栋 王希良 蒋会婷 黄顺军 韩岳 何维明
为了研究鼠疫DNA疫苗pVAX1/F1-V质粒的安全性,试验运用SDS-PAGE电泳和琼脂糖电泳等方法检测了鼠疫DNA疫苗pVAX1/F1-V质粒的纯度,并以小鼠为动物模型进行了质粒pVAX1／F1-V的急性毒性和长期毒性试验,用PCR方法检测外源基因在小鼠组织中的分布情况,用ELISA、EIISPOT方法检测了其自身的免疫反应。结果表明,提取的质粒pVAX1/F1-V未检测到核酸及菌体蛋白污染;注射初期质粒pVAX1/F1-V 主要分布于注射部位的肌肉组织,其他组织有散在分布;小鼠接种4周后,质粒pVAX1/F1-V仅分布于注射部位。小鼠注射pVAX1/F1-V质粒后未产生明显的毒副反应及自...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
索钰杰 林格 江南 李逸群 范玉顶 刘文枝 孟彦 薛明洋 曾令兵 周勇
为了探明大鲵虹彩病毒病灭活疫苗的安全性与免疫效力,采用β-丙内酯(β-propiolactone, BPL)灭活鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papilloma cyprini,EPC)内增殖的大鲵虹彩病毒(giant salamander iridovirus, GSIV),制备成大鲵虹彩病毒病灭活疫苗,利用免疫剂量为1.0×10~6 TCID_(50)/mL的灭活疫苗腹腔注射健康大鲵(Andrias davidianus),研究疫苗的安全性和免疫效力。结果显示:一次单剂量注射、单剂量重复注射和超剂量注射后,大鲵的行为和摄食均正常,未见不良反应,证明了制备的大鲵虹彩病毒病灭活疫苗安全;用不同剂量的疫苗(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL/尾)免疫健康大鲵,在免疫后第28 d用GSIV进行攻毒,当免疫剂量为0.1 mL/尾时,相对免疫保护率为44.44%,其它4种免疫剂量的相对免疫保护率相似,均高于70%。大鲵在免疫后7 d已开始产生免疫应答,21 d血清抗体效价达到最高值252.48±28.01。在免疫后两周内,MyD88基因、TLR9基因和MHCIIA基因均显著上调。免疫后150 d进行攻毒实验,大鲵的相对免疫保护率为62.5%。二次免疫实验中,大鲵分别在第一次免疫7、14、21、28、56 d后进行第二次免疫。结果显示,第一次免疫21 d后进行二次免疫,其血清抗体效价可以较长时间维持在最高水平,最高血清抗体效价为274.37±25.23,第二次免疫后的第150 d用GSIV进行攻毒,存活率为86.67%。研究结果表明,大鲵虹彩病毒病灭活疫苗最佳免疫方式为腹腔注射疫苗0.2 mL/尾后,21 d进行第二次免疫,免疫剂量为0.2 mL/尾。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
黄复深 易新元 曾宪芳
为了观察核酸疫苗 Sj CA / pc和 Sj Mf1/ pc在小鼠体内的表达 ,取昆明鼠 ,于其后腿外侧肌注免疫 Sj CA/ pc和 Sj Mf1/ pc,2 d后剖杀动物 .取注射部位肌肉作石蜡切片 ,免疫组化分析 ,荧光显微镜下镜检 .结果表明 ,Sj CA/ pc和 Sj Mf1/ pc在小鼠注射部位肌肉可见黄绿色荧光 ,而对照组无此现象 .可见 ,Sj CA/ pc和 Sj Mf1/ pc可在小鼠体内表达 .
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
焦铁军 李河林 张浩 李健强
检测了4批自制禽脑脊髓炎冻干活疫苗的安全性和最小免疫剂量,并对疫苗进行了病毒含量测定和攻毒保护试验。结果表明,鸡接种疫苗后精神、食欲及发育均正常,疫苗安全性良好;接种病毒剂量为500 E ID50时,可使免疫鸡产生可靠的免疫力,抵抗AEV VR株强毒的攻击,降低鸡群发病率,所以该疫苗的最小免疫剂量≤500 E ID50/羽。4批疫苗病毒含量均大于103.5E ID50/羽份,攻毒后保护率均在87.5%以上。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
邱德新 陈焕春 吴斌 金梅林 申咏红 何信 龚文波
采用转瓶生产技术 ,在MARC 14 5细胞中增殖PRRSV克隆 2 0株 ,经过条件的优化选择 ,得到TCID50 ≥ 10 -7.55/mL的高滴度PRRSV溶液 ,为生产疫苗打下基础 ;所生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全无致病性 ,能刺激猪产生特异性抗体应答 ,接种后第 14天可检测出特异性中和抗体。疫苗内的PRRSV滴度在冻干前后变化不大 ,冻干疫苗在 4～ 8℃保存有效期为 6个月 ,- 2 0℃保存有效期达 18个月 ,表明生产的PRRSV弱毒活疫苗对猪安全且能刺激猪产生体液免疫应答 ,可用于PRRS的预防接种。
[期刊] 水产学报
[作者]
马爽 蒋弥 李艳红 刘炀 孙瑜 唐晓琪 吴正理
为探究松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用，本研究设计了注射感染实验、投喂感染实验和灭活疫苗保护实验，通过组织病理学观察、实时荧光定量PCR（qPCR）和酶活性检测等方法进行分析。结果显示，注射实验中鲫全身性出血、肝脏充血肿大，96 h LD_(50)为5×10~(6) CFU/mL。投喂实验投喂含不同浓度JS-1的饲料后，鲫肝脏、脾脏、肾脏出现病变，细胞坏死；血清中转氨酶呈先增加后减少的趋势，高浓度（HG）组降低趋势最明显，溶菌酶活性显著升高；鲫肝脏和脾脏中TNF-α和IFN-γ基因表达量均先增加后减少，且显著高于对照组。注射灭活疫苗后，血清中溶菌酶活性显著高于对照组，而碱性磷酸酶、转氨酶、超氧化物歧化酶活性显著低于对照组，过氧化氢酶活性显著升高；经灭活疫苗免疫后的血清中，特异性IgM和总IgM与对照组相比都显著增加，注射感染JS-1 10 d后鲫的存活率达83.3%。研究表明，松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性强，其灭活疫苗可为鲫提供有效的保护，为松鼠葡萄球菌疫苗的开发提供研究基础。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李云岗 田夫林 周开锋 高凤山 李新生 马慧玲 夏春
为研究猪IL-2真核表达质粒对乳酸杆菌载体口蹄疫VP1 DNA疫苗(Lactobacillus acidophilusSFMD-1)猪体免疫的分子佐剂效应,通过RT-PCR方法从猪的肠系膜淋巴结克隆猪IL-2基因,基于pRc/CMV2载体,构建编码猪IL-2的真核表达质粒pCSIL2,以RT-PCR方法分析了该质粒转染PK15细胞以后的mRNA表达。结果显示预期的429 bp IL-2带仅出现在pCSIL2转染细胞。试验猪单独免疫L.acidophilusSFMD-1或者联合免疫pCSIL2质粒,后者能够增强FMDV-VP1特异的T细胞和B细胞反应,免疫后5周,单独免疫组和联合免疫组的抗体水平...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
陈汉忠 谢婷 罗秀帧 姚玲 郭直 孙坚 欧阳康 韦晓宝
将野毒(强毒)混合卵囊制成微囊型强毒鸡球虫疫苗,探讨该剂型球虫疫苗拌料免疫鸡的效果。结果表明,3个剂量组(200、300、400个卵囊/羽)的增重和肉料比均与空白对照组相当,其中200个卵囊/羽的增重和肉料比还略优于空白对照组。微囊型鸡球虫疫苗使用方便,不需逐只鸡免疫,节省人力物力,剂量较容易控制,即使用于免疫小鸡,只要剂量适宜也能获得安全的效果。该剂型球虫疫苗的进一步完善和推广应用,将为我国鸡球虫病的免疫预防提供新的方法。
关键词：
微囊型球虫疫苗 免疫剂量 免疫效果 鸡
[期刊] 西南农业学报
[作者]
吴玉宝 朱美真 崔治中
18周龄SPF种鸡在用网状内皮增生病病毒(REV)弱毒疫苗免疫接种后,均在11 d内产生REV特异性抗体。种鸡在免疫后1~15 d内均未检出病毒血症。在开产后在5个月的产蛋期内,来自免疫种鸡的雏鸡100%REV母源抗体阳性。对3日龄雏鸡的攻毒试验表明,相对于无母源抗体的SPF鸡,REV母源抗体能有效地预防或减弱经接种REV低代毒造成的生长迟缓、中枢免疫器官萎缩及其对NDV和AIV灭活疫苗免疫后抗体反应的抑制作用。
关键词：
网状内皮增生病病毒 安全性 母源抗体
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘伟 张畅 张发明 李应超 杨君敬 凌勇 袁吉磊 何诚
本试验对猪流产嗜性衣原体omp-1基因噬菌体DNA疫苗进行了免疫效果评价。将猪流产嗜性衣原体omp-1基因插入λNM1149噬菌体载体构建成DNA疫苗,筛选获得阳性噬斑;使用重组的噬菌体疫苗按250 ng/只分别在第2、16和30天三次免疫Balb/c小鼠,以1B弱毒活疫苗(10μg/只)、噬菌体空载体(250 ng/只)为对照组。免疫后分别以ELISA法测定小鼠抗体以及MTT法检测淋巴细胞刺激指数。结果表明重组λ-MOMP噬菌体疫苗虽然未能在短期内(免疫第29天)激发高水平的抗体(1B组免疫第29天抗体D450=0.347,重组噬菌体组免疫第29天抗体D450=0.19;1B组免疫第43天抗...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
许宗丽 谢芝勋 谢丽基 刘加波 邓显文 谢志勤 庞耀珊 范晴 罗思思
设计了2对特异性引物,PCR扩增出鸭源NDV分离株GX2011/19的F基因和DuCV的Cap基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1,成功构建重组融合表达质粒pcDNA3.1-F-Cap。经酶切和测序鉴定正确后,将重组质粒pcDNA3.1-F-Cap转染Vero细胞,采用间接免疫荧光检测到目的基因的体外表达。将pcDNA3.1-F-Cap作为DNA疫苗对2周龄的SPF雏鸭以胸部肌肉多点注射的方式进行免疫。分3个实验组,每组接种剂量分别为100、200和300μg/只,另设2组为载体质粒空白组和灭活疫苗组。ELISA检测抗体水平,试验结果显示:各DNA疫苗免疫组的NDV抗体和DuCV抗体...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
严若峰 徐立新 孙延鸣 赵光伟 李祥瑞
【目的】构建捻转血矛线虫DNA疫苗,并研究该疫苗对山羊的免疫保护效果。【方法】将捻转血矛线虫重要保护性抗原H11的编码基因分H11-1、H11-2和H11-3三部分,分别亚克隆到基因疫苗载体pcDNA4/HisMaxC中,用酶切反应、序列测定等方法鉴定重组疫苗。将纯化的DNA疫苗肌肉注射山羊后,用RT-PCR、Westernblotting和ELISA方法检测疫苗在山羊体内的转录、翻译和诱导IgG的产生。第2次免疫后2W用10000条捻转血矛线虫第3期幼虫攻击实验动物,检测山羊虫卵排出、虫卵孵化率、成虫数量等免疫保护性指标。【结果】获得了捻转血矛线虫H11DNA疫苗,疫苗第1次免疫7d后在山羊...
关键词：
山羊 捻转血矛线虫 H11 DNA疫苗
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周智君 唐连飞 黄复深 曾宪芳 易新元
为观察日本血吸虫合成表位多肽疫苗诱导的保护性免疫,将用日本血吸虫抗原免疫血清筛选噬菌体随机12肽库得到的、具有较好免疫保护性的4个模拟抗原表位短肽进行人工合成,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测它们的抗原性.将合成多肽分别与钥孔戚血蓝蛋白(KLH)连接后免疫昆明小鼠,第3次免疫后收集血清,检测其针对各个多肽和可溶性成虫抗原(AWA)的IgG抗体滴度,以及补体介导的小鼠体外杀日本血吸虫童虫作用.结果显示,4个合成多肽均能被相应的抗体识别,具有良好的抗原性;能诱导产生特异性IgG抗体.这些抗体在补体参与下能在体外有效毒杀血吸虫童虫.与正常小鼠血清比较,4个合成多肽免疫血清的杀童虫率分别为31.7...
关键词：
日本血吸虫 合成肽 表位疫苗
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