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[期刊] 中国农业科学  [作者] 黄琴  黄怡  崔志文  李雅丽  李卫芬  余东游  
【目的】通过测定先天性免疫效应因子分泌水平的变化,研究鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)体外对巨噬细胞先天性免疫应答调节的影响。【方法】将培养好的鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞分为4组,分别用PBS(CT组,对照组)、Escherichia coli K88(EC组)和Lactobacillus rhamnosus(LR组)处理12 h,以及先用Lactobacillus rhamnosus预处理1 h,再用Escherichia coli K88处理12 h(LR-EC组)。试验结束时,收集各组的细胞培养液,用ELISA检测TNF-α、IFN-γ、IL-1β、I...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 高夕全  阮辛森  马亮  孙亚利  
先天性免疫反应是植物应对外来病原微生物侵害的一种主要策略。与动物相比,植物没有特异性的免疫细胞,其被侵染的细胞需通过复杂的监控机制来启动和激活先天性免疫反应,细胞死亡在该反应中发挥着重要作用。动物中的凋亡、自噬和坏死3种细胞死亡类型在植物细胞中均可能存在,且参与调控植物的免疫反应。植物既可利用产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)等物质抑制或杀死病原菌,也可通过程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)限制病原菌的侵染和扩展。目前,有关植物细胞死亡的作用和调控机制的研究报道还比较紊乱。本文从以下几方面对近年来关于细胞死亡在植物先天性免疫反应中的功能及其调控机制的研究进展进行了概述:1)植物细胞死亡的种类; 2)细胞死亡参与不同层面植物免疫反应的功能; 3) ROS、植物激素和蛋白酶等因子参与调控PCD的功能和机制。同时,对不同细胞死亡信号途径的交叉互作在植物免疫反应中的功能和作用机制提出假说,以期为植物抗病育种提供理论依据。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李鹏  崔佳  王丽清  吴长新  
[目的]结核病是全球最重要的人畜共患传染病之一,ASAP1与结核病易感性相关。本文旨在为了明确在细胞水平ASAP1表达与结核分枝杆菌感染的关系,探究ASAP1是否参与巨噬细胞对Mtb的吞噬以及了解该蛋白表达对巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌的影响。[方法]以人源单核细胞建立的不同ASAP1表达水平的巨噬细胞作为模型,通过感染结核分枝杆菌开展了一系列体外试验,使用BCG以及Mtb H37Ra菌株感染THP-1分化的巨噬细胞,Western blot以及荧光定量PCR检测感染后ASAP1的表达;建立不同ASAP1表达
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 范熠  刘丽莎  韩玉竹  李平兰  
为了解EPS的粒径、热稳定性、乳化特性及流变学特性,以实验室选育的一株胞外多糖(EPS)高产菌株(Bacillus amyloliquefaciens LPL061)为材料,并考察EPS的体外免疫调节功能。结果表明:芽孢杆菌EPS粒径大小为445.6nm;熔融温度为265.18℃;对食用油乳化效果较好,乳化指数达50%以上;EPS溶液为典型的假塑性流体,在20~80℃范围内黏度变化较小,具有较好耐温性;EPS能促进小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子产生,具有一定的免疫活性。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈昌福  姚娟  吴凡华中农业大学水产学院  李兆文  熊传喜华中农业大学水产学院  
将不同剂量的免疫多糖 (酵母细胞壁 )拌在饲料中投喂经过接种灭活柱状嗜纤维菌 (Cytophagacolumnaris)菌苗的异育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) ,通过测定受免异育银鲫的凝集抗体效价和血液中白细胞的吞噬活性 ,探讨了口服免疫多糖 (酵母细胞壁 )对受免异育银鲫免疫应答的调节效应。试验结果表明 ,在饲料中添加 15 0 0mg/kg体重的免疫多糖 (酵母细胞壁 ) ,对受免异育银鲫的免疫应答具有较强的调节效应 ,与对照组鱼相比 ,不仅血清中凝集抗体效价有所提高 ,而且血液中白细胞的吞噬百分比 (PP)和吞噬指数(PI)活性明显上升。
[期刊] 华北农学报  [作者] 余叶红  郭本恒  吴正钧  王荫榆  
探讨干酪乳杆菌LC2W细胞壁组分体外对小鼠巨噬细胞功能的影响。以培养液单纯培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞作为对照,研究干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖对RAW264.7细胞代谢水平、吞噬中性红能力及释放NO的影响。不同浓度磷壁酸和肽聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞代谢MTT能力、吞噬中性红能力有明显增强作用,并呈一定的剂量效应,在相同质量浓度时,两种细胞壁组分激活巨噬细胞能力无显著差异。同时诱导产生NO量也随着浓度增大而增加,当浓度达到50μg/mL时,磷壁酸诱导能力显现出较高的水平。干酪乳杆菌LC2W细胞壁主要组分磷壁酸和肽聚糖能激活小鼠巨噬细胞RAW264.7细...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 崔志文  黄琴  黄怡  吴红照  文静  李卫芬  
【目的】研究鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响。【方法】将培养的Caco-2细胞分为4组:对照组和氧化应激组(在培养液中加入100μmol.L-1 H2O2),处理组Ⅰ和处理组Ⅱ在氧化应激条件下分别添加鼠李糖乳酸杆菌(约108 CFU.mL-1)和抗氧化剂特丁基对苯二酚(TBHQ)(2.75μg.mL-1)各1 mL。Caco-2细胞培养至12和48 h时分别测定其上清液和裂解液的抗氧化活性。【结果】添加鼠李糖乳酸杆菌减轻了Caco-2细胞氧化受损,使细胞培养上清中的总抗氧化力(T-AOC)显著高于氧化应激组:12 ...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 刘平  李宗军  许爱清  
以肠出血性大肠杆菌O157:H7感染的小鼠为模型,研究造模后按茯砖茶水提物剂量1、10、20 g/(kg.d)(分别记为低、中、高剂量茶汁组)连续灌胃10 d后模型小鼠免疫功能的变化。结果表明,模型组和对照组的吞噬系数、血清溶血素水平和肠道黏膜上CD4+T、CD8+T淋巴细胞数均有显著性差异;中剂量茶汁组小鼠胸腺指数和高剂量茶汁组小鼠血清溶血素水平均极显著高于模型组小鼠(P<0.01),中剂量茶汁组小鼠血清溶血素水平和高剂量茶汁组小鼠胸腺指数以及中、高剂量茶汁组小鼠肠道黏膜上CD4+T、CD8+T淋巴细胞数均显著高于模型组小鼠(P<0.05);中、高剂量茶汁组小鼠的吞噬系数极显著高于模型组小鼠...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张志敏  王建华  赵兴华  公小兵  余永涛  崔忠华  耿果霞  
【目的】探索苦马豆素(SW)与小鼠腹腔巨噬细胞功能之间的关系,为SW免疫研究提供新的试验依据。【方法】将70只小鼠随机分为7组,其中5组分别按0.05、0.2、0.8、3.2和6.4mg·kg-1每天灌服SW生理盐水,连续21d,另2组为生理盐水和空白对照组。收集小鼠腹腔巨噬细胞,经脂多糖(LPS)诱导活化,用ELISA法检测TNF-α生成,酶法检测一氧化氮合酶(NOS)活性,化学法检测H2O2浓度,MTT比色法检测杀伤肿瘤细胞活性及吞噬中性红能力。【结果】SW剂量在0.2~3.2mg·kg-1之间,能够提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬和杀伤活性﹑NOS活性,促进TNF-α和H2O2生成,且均呈剂量...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 汪成竹  陈昌福  
在饲料中添加定量的免疫多糖,投喂经注射接种福尔马林灭活的柱状黄杆菌(Flavobacterium co-lumnare)菌苗的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)28 d后,通过测定供试鱼的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率,探讨了免疫多糖对受免草鱼免疫应答的增强作用。结果表明,用添加200.0 mg/(kg.d)免疫多糖的饲料投喂受免草鱼,不仅可以使受免草鱼对灭活柱状黄杆菌的免疫应答水平提高,增强抵抗柱状黄杆菌人工感染的能力,而且还具有一定的促进生长和改善肝功能的作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 郝凤奇  李景梅  李成玉  杨桂连  
【目的】比较嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)和植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)肠道黏膜免疫调节作用的差异。【方法】以C57BL/6小鼠为受试动物,分别灌胃嗜酸乳酸杆菌和植物乳酸杆菌7d后取材,采用流式细胞术、ELISA等方法,对脾脏和肠系膜淋巴结中T细胞亚群、结肠PP结中TLR2+和TLR4+细胞、结肠组织中IFN-γ和IL-4水平及小肠sIgA水平进行检测,明确2种乳酸杆菌对肠道黏膜的免疫调节作用。【结果】2种乳酸杆菌对小鼠体质量无显著影响。2种乳酸杆菌均可显著提高小鼠肠系膜淋巴结中CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞比例,...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 郝凤奇  李景梅  李成玉  杨桂连  
【目的】比较嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)和植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)肠道黏膜免疫调节作用的差异。【方法】以C57BL/6小鼠为受试动物,分别灌胃嗜酸乳酸杆菌和植物乳酸杆菌 7 d后取材,采用流式细胞术、ELISA等方法,对脾脏和肠系膜淋巴结中T细胞亚群、结肠PP结中TLR2+和TLR4+细胞、结肠组织中IFN-γ和IL-4水平及小肠sIgA水平进行检测,明确2种乳酸杆菌对肠道黏膜免疫调节的作用。【结果】2种乳酸杆菌对小鼠体质量无显著影响。2种乳酸杆菌均可显著提高小鼠肠系膜淋巴结中CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞比...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 朱晗  何欣  李长田  
为研究灰树花发酵产物提取出的胞内多糖的免疫活性,采用50只雄性昆明小鼠,随机分为5组,每组10只,设100、200和400mg/(kg·d)3个水平处理组,并设阳性对照组(黄芪多糖400mg/(kg·d))和阴性对照组(生理盐水),饲养30d后观察多糖对细胞免疫功能的影响。通过流式细胞仪检测脾细胞表面分子的CD4和CD8及对T淋巴细胞增殖的影响;用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测其细胞因子IL-6、IL-8、CRP和TNF-α的表达。结果表明:灰树花胞内多糖使小鼠脏器显著增大(P≤0.05);并显著
[期刊] 水产学报  [作者] 冯军厂  蔡忠良  陈永艳  常绪路  刘慧芬  赵燕静  张建新  
为研究乳酸乳球菌Q-9胞外多糖(exopolysaccharides from Lactococcus lactis Q-9, EPS-9)对鲤免疫应答、抗氧化活性以及抗嗜水气单胞菌性能的影响,本实验将提取并纯化的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养,检测头肾细胞的增殖能力和吞噬活性,以及孵育液中一氧化氮(NO)和细胞因子的合成量。将300尾健康鲤[(47.66±0.43) g]随机分为5组,对照组(阴性和阳性)灌喂无菌的磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline, PBS),处理组分别灌喂不同浓度的EPS-9 (250、500和1 000 μg/mL),1次/天,连续处理7 d后取血液和肝胰腺组织。随后,阳性组和处理组腹腔注射嗜水气单胞菌,阴性组用无菌PBS处理,感染24 h后取血液和肝胰腺组织。分别检测血清中NO和细胞因子的合成量,及溶菌酶(LZM)和碱性磷酸酶(AKP)的活性;肝胰腺组织中的抗氧化(T-AOC、T-SOD、CAT、GSH、GSH-Px和MDA)指标。体外结果显示,EPS-9能显著增强鲤头肾细胞的增殖能力和吞噬活性,并提高NO、促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)和抗炎细胞因子(IL-10和TGF-β)的合成量。体内结果显示,与阴性对照组相比,EPS-9灌喂处理能显著上调血清中NO和促炎细胞因子的合成量,LZM和AKP活性,以及肝胰腺的抗氧化水平。嗜水气单胞菌感染后,NO、促炎细胞因子的合成量及LZM、AKP的活性均显著低于阳性对照组。但无论感染与否,EPS-9处理组血清中抗炎细胞因子的合成量均显著升高。上述结果表明,EPS-9在体内和体外均具备提高鲤的非特异性免疫、抗氧化活性和抗病原菌感染的能力,可作为一种安全有效的添加剂应用于水产养殖中。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张朝莹   文兆海   张玥   李嫄   徐立新   陆明敏   宋小凯   李祥瑞   严若峰  
[目的]旨在研究旋毛虫钙网蛋白(rTs-CRT)对宿主免疫系统的影响。[方法]用原核表达技术获得纯化旋毛虫钙网蛋白,并进行Western Blot验证;将rTs-CRT与小鼠巨噬细胞共孵育,检测该蛋白对小鼠巨噬细胞增殖、NO释放和凋亡的影响;将rTs-CRT与大鼠外周血单核细胞(PBMC)共孵育,检测该蛋白对大鼠PBMCs转录因子和细胞因子的影响。[结果]Western Blot结果显示rTs-CRT可以被感染旋毛虫的大鼠血清所识别;rTs-CRT可促进小鼠巨噬细胞的增殖和NO的分泌,抑制小鼠巨噬细胞的凋亡;rTs-CRT下调大鼠PBMCs T-bet、Gata-3和PU.1的转录水平,上调Foxp3、Ahr、RORγt和Bcl-6的转录水平;rTs-CRT上调大鼠PBMCs IFN-γ、IL-17、IL-10、TGF-β、Il-9和IL-22等细胞因子的转录水平,下调IL-4和IL-21的转录水平。[结论]旋毛虫钙网蛋白可刺激宿主产生Th1、Th17、Treg、Th9和Th22等多种类型的免疫反应,抑制Th2和Tfh免疫,对宿主免疫调节作用复杂。
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