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[期刊] 渔业科学进展
[作者]
毛芝娟 王美珍 陈吉刚 杨季芳
2008年3月,浙江省象山港养殖黑鲷暴发了严重的肠炎病情,病鱼肠道肿胀,充满黄色黏液。以ZoBell2216E平板自病鱼肠道黏液分离到4株菌BB01、BB02、BB03和BB04。通过人工感染试验验证了前3株为病原菌,其中BB01菌株96h的半数致死浓度LD50为4.61×104CFU/g鱼体重。3株分离菌革兰氏染色阴性,短杆状,氧化酶试验阳性,氧化葡萄糖,不产气,4℃生长,精氨酸双水解酶阳性,利用麦芽糖、柠檬酸盐,硝酸盐降解阳性,DNA酶、乙酰胺酶阴性;与已发表的恶臭假单胞菌16SrRNA序列的同源性达99%以上;经形态和理化特性鉴定及16SrDNA序列测定,此3株菌同属于恶臭假单胞菌。药敏...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张锡林 王有模 唐学清 王明清
从大口鲶细菌性肠炎的病鱼中，分离出二株病原菌，经人工感染健康大口鲶表现出较强的致病力，出现与自然病鱼相同的症状。证实这二菌株是大口鲶细菌性肠炎的病原菌。对菌体形态特征、培养特性和生理生化反应的鉴定证明为嗜水气单胞菌。细菌性肠炎的病理学研究结果表明为淋巴细胞侵润为主的炎性病变。并探讨细菌性疾病的致病原理。
关键词：
大口鲶,细菌性肠炎,病理学
[期刊] 水产学报
[作者]
樊海平
从患烂鳃病的病鳗分离到多株细菌 ,其中三株经人工感染证实为病原菌 ,经生理、生化等测试鉴定为恶臭假单胞菌。其主要特征为革兰氏阴性、具动力的短杆菌 ;氧化酶、过氧化氢酶、枸掾酸盐利用、精氨酸双水解酶阳性 ;硝酸盐还原 ,鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、明胶酶、尿素酶、V -P反应、吲哚反应阴性。对氟哌酸、妥布霉素、卡那霉素、庆大霉素敏感
关键词：
欧洲鳗鲡 烂鳃病 恶臭假单胞菌
[期刊] 华北农学报
[作者]
张朝辉 张广 闻亚美 杨艳青 刘亚非 张会 王振河 邱立友
真菌-细菌生物膜(FBB)在制备高效生物肥料接种剂和生防制剂中发挥着重要作用,探讨FBB的形成机理非常有必要。以双孢蘑菇和恶臭假单胞菌UW4为对象,研究了1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)在双孢蘑菇-细菌生物膜形成过程中的作用。采用PDA平板培养双孢蘑菇菌丝,在距离菌丝尖端边缘处涂布UW4菌悬液,双孢蘑菇菌丝生长速度比涂布超纯水的对照组提高10.85%,同时,显微镜和扫描电镜均可观察到UW4能够在双孢蘑菇菌丝表面形成菌膜。使用ACC合成酶抑制剂氨基氧乙酸(AOA)抑制双孢蘑菇菌丝ACC的合成,则UW4不能在双孢蘑菇菌丝表面形成菌膜。此外,UW4 ACC脱氨酶基因缺失突变株也不能形成菌膜。趋化试验发现,UW4可趋化ACC,趋化强度与双孢蘑菇菌丝分泌物中的强趋化物谷氨酰胺和柠檬酸类似,且ACC最适趋化浓度的趋化强度高于谷氨酰胺和柠檬酸最适趋化浓度的趋化强度。而UW4 ACC脱氨酶基因缺失突变株不能趋化ACC。转录组测序分析ACC对UW4基因表达的影响,发现ACC能够引起UW4中趋化和运动相关基因的表达水平发生显著的上调或下调。以上结果表明,ACC是假单胞菌趋化双孢蘑菇的一种强趋化物质,同时是产ACC脱氨酶细菌在真菌菌丝表面形成菌膜的关键信号物质。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张红星 李茜茜 叶婷 李维琳 李林
利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)冰核基因的N-末端(inpn)作为锚定单元(anchoring mo-tif),通过与来自黄杆菌属(Flavobacteriumsp.)的有机磷水解酶基因opd构建融合基因inpn-opd,并连接于假单胞菌表达载体pYMBP,然后导入恶臭假单胞菌(P.putida)野生型菌株AB92019,获得了能在其细胞表面展示有机磷水解酶并具有全细胞酶催化活性的重组工程菌MMBL-opd。SDS-PAGE结果表明,融合基因能表达产生80 ku的蛋白质。重组菌MMBL-opd在无抗性LB固体培养基上能稳定生长,所携带的外源质粒的稳定性达到100%;...
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
沈锦玉 余旭平 潘晓艺 许文军 尹文林 曹铮
浙江宁波、台州等地相继发生网箱养殖大黄鱼的大量死亡,主要症状为脾脏、肾脏有许多白色结节,大小为0.1～1mm。从病鱼体内分离出致病力极强的菌株GYCWS,人工感染试验证实为大黄鱼的病原菌,其半数致死量(LD50)为8.5×104CFU/ml。对该细菌进行了形态、生理生化特性的测定,并进行了全自动微生物分析系统(ID32GN)及16S rRNA分子鉴定。经PCR扩增获得了大小约1.5Kb的16S rRNA部分基因片段,产物经回收纯化,克隆到pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1,对阳性克隆子进行酶切及PCR鉴定确认阳性重组质粒,将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对,与恶臭假单胞菌的...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
杨昆明 郭爱民 马江霞 段成任 谢志胜 岳城
河鲈(Perca fluviatilis Linnaeus)是新疆额尔齐斯河特有的土著鱼类,已开展人工养殖,但其病害相关研究较少。2016年,五家渠某水产推广站河鲈突然大批死亡,作者从发病的河鲈肝脏和肠道分离病原菌,对分离菌进行了传代纯化培养。结果显示,在20℃培养24h后,ZL1能形成边缘整齐、中间微隆起、表面光滑、浅黄色、有特殊芳香气味、大小为1.5～2 mm的菌落,在血琼脂平板上能形成明显的β-溶血圈;ZL3和ZL5可形成圆形、微隆起、表面湿润光滑、灰白色、半透明、菌落大小为0.5～1 mm的菌落,但在血琼脂平板上不能形成溶血圈。经革兰氏染色、生理生化、16SrRNA序列比对和基因序列进化树分析,鉴定ZL1株为温和气单胞菌(Aeromonassobria),ZL3和ZL5株为迟缓爱德华菌(Edwardisella tarda)。药敏实验结果显示,ZL1株对庆大霉素、米诺环素、头孢他啶等药物高度敏感,对链霉素、青霉素、克拉霉素等耐药;ZL3和ZL5株对左氧氟沙星、链霉素和恩诺沙星敏感,对庆大霉素、氨苄西林、青霉素、复方新诺明等药物耐药。人工感染结果显示,分离菌均具有明显致病性。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
马有智 舒妙安
[期刊] 中国农业科学
[作者]
年洪娟 张杰 樊利强 刘朔 宋福平 黄大昉
【目的】探索荧光假单胞菌的分类方法,分离筛选拮抗性较强的荧光假单胞菌。【方法】利用紫外下产生荧光的特性,采用梯度稀释及鞭毛染色的方法,对采自云南、海南、山东和新疆的488份植物根际土壤进行分离筛选,分离菌株进行ARDRA分析,采用室内平板对峙法筛选对植物病原真菌具有较强拮抗作用的菌株,并对其进行生理生化分析和分子鉴定。【结果】分离筛选到102株紫外下产生荧光的杆状单极生鞭毛菌株。ARDRA分析产生荧光假单胞菌类型、恶臭假单胞菌类型以及一个未知的谱带类型。以油菜立枯病菌作为靶标菌,筛选到25株具有拮抗作用的菌株,其中TC222产生的抑菌圈最大,进一步的生测结果表明该菌株对9种重要的植物病原真菌如...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
梁利国 秦国民 张晓君 毕可然 杨家新 阎斌伦
对从患病血鹦鹉(Cichlasoma var.)肝、眼部脓肿处分离到2株细菌,对该分离菌进行人工感染实验、鉴定和药敏实验。结果显示:通过人工感染实验证明其对血鹦鹉有较强的致病性。分离菌革兰氏阴性杆状,氧化酶阳性、接触酶阳性、甲基红阴性,能够利用枸橼酸盐、丙二酸盐,发酵葡萄糖。综合分离菌的表型特征及分子生物学结果,鉴定分离菌为假单胞菌属(Pseudomonas)的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。药敏试验结果显示头孢哌酮、头孢他啶、壮观霉素、阿米卡星、阿奇霉素、氨噻酸单胺菌素和阿洛西林抑菌效果显著。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈焕春 刘超 金梅林 罗满林 吴美洲
从六个猪场采集严重发生腹泻的病死仔猪和剖杀的濒死仔猪的肠系膜淋巴结和扁桃体用免疫荧光技术作猪传染性胃肠炎病毒抗原检查。并且用肠系膜淋巴结病料进一步作病毒分离。将处理病料接种到原代猪甲状腺组织培养细胞。盲传九代后出现恒定典型的细胞病变,再适应猪肾传代细胞IBRS—2获得成功。从六份病料中分离出一株具有典型细胞病变的毒株通过电镜形态学观察,理化特性和血清学鉴定为猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)。
关键词：
传染性胃肠炎 病毒分离 中和试验 猪
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
罗忠宝
为了解福建闽北地区鸡源肠炎沙门菌(SE)的生物学特性及致病性，从该地区肉鸡规模化养殖场鸡群采集疑似病例，通过细菌分离培养、生化特征检测和PCR鉴定进行SE的分离鉴定，并对分离菌进行耐药表型检测和动物感染致病性研究。分离菌耐药表型检测结果显示，经分离鉴定得到的11株鸡源SE,对氨基糖胺类和β-内酰胺类耐药比较普遍，且多重耐药菌株占比高达81.81%;致病性检测结果显示，攻毒组鸡只在感染后24 h开始出现死亡现象，3～6 d为死亡高峰期；剖检结果显示，攻毒组鸡只肝脏淤血肿大，肠道组织充血、出血，肠壁变薄；病理切片观察显示，攻毒组鸡只肝脏和肠道组织出现大量炎性细胞浸润、细胞坏死的情况；细胞因子表达水平的检测结果显示，SE感染诱导鸡只肝脏和肠道组织促炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IFN-γ、TNF-α的表达水平极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)升高，而盲肠组织紧密连接蛋白ZO-1和分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)下降。表明本地区鸡群感染的沙门菌血清型以SE为主，具有较强的致病力，分离株对氨基糖胺类和β-内酰胺类耐药比较普遍，且多重耐药菌株占比高。本研究结果可为该地区肠炎沙门菌病的防控及临床治疗提供参考。
关键词：
鸡 肠炎沙门菌 分离鉴定 耐药性 致病性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
胡秀彩 边延峰 胡宏晓 王艺 吕爱军
从市售鲫鱼(Carassius carassius)鳃中分离获得一株细菌,暂时编号为CG-2,进行细菌形态观察、理化特征、16S rRNA基因测序以及系统发育树构建等系统鉴定。结果表明,CG-2菌株为革兰氏阴性杆菌,进一步采用PCR方法扩增16S rRNA基因,测序片段大小为1501 bp,与维罗纳假单胞菌(Pseudomonas veronii)的序列同源性达99.5%~99.7%;系统发育树分析表明,CG-2菌株与P.veronii(AF064460)亲缘关系最近,自然聚类为一支,因此,鉴定CG-2菌株为维罗纳假单胞菌。首次报导鲫鱼鳃中维罗纳假单胞菌,为进一步研究鱼类鳃中细菌分布及生态功能...
关键词：
鲫鱼 鳃 维罗纳假单胞菌 分离鉴定
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
晋怀远 刘耀宽 高晔 夏苏东 陈四清 莫照兰 边力 李杰
2018年和2019年，山东省烟台市蓬莱市一养殖场工厂化养殖的绿鳍马面鲀(Thamnaconus septentrionalis)和许氏平鲉(Sebastes schlegeli)发病死亡，主要症状为嘴部溃疡、红肿和出血。从发病鱼内脏中均可分离到大量形态一致的优势菌，分别命名为2018TS-1和2019SS-1，分离菌株经16S rRNA测序、生理生化鉴定和vapA基因分析确定为杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种(Aeromonas salmonicida subsp. masoucida)。人工感染实验证明，2018TS-1和2019SS-1分别能引起绿鳍马面鲀和许氏平鲉的死亡，被感染鱼呈嘴部红肿症状，与自然发病症状一致，其半数致死量分别为1.78×10~(5)和0.89×10~(5) CFU/尾。本研究首次报道了国内工厂化养殖绿鳍马面鲀和许氏平鲉感染杀鲑气单胞菌的病例，是目前人工养殖绿鳍马面鲀的首个疾病报道，也是继大西洋鲑(Salmo salar)、大菱鲆(Scophthalmus maximus)和裸盖鱼(Anoplopoma fimbria)等品种后，在山东省海水养殖鱼类中再次发现杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染，本研究结果丰富了杀鲑气单胞菌杀日本鲑亚种的感染宿主范围，也为绿鳍马面鲀和许氏平鲉养殖过程中病害防控提供了依据。
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