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[期刊] 华北农学报
[作者]
孙雯 石海燕 张玉星
高质量的RNA是进行基因克隆、Northern杂交分析等研究的必要前提。针对黄金梨果实中多酚、多糖等次生代谢产物含量较高的特点,综合前人的多种方法,选取其中3种方法进行比较,结果表明:改良3%CTAB法和TIANGEN RNAplant plus Reagent法均能提取出黄金梨果实中的总RNA,但后者更适于黄金梨果实总RNA的提取,得到的RNA经电泳检测后,条带无降解且亮度较好,能基本满足后续试验的要求。
关键词：
黄金梨 果肉 RNA提取方法
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
丁勇 刘英 杨鸯鸯 甘莉
设计了1种从油菜种子中分离高质量总RNA的方法,有效的排除了种子中富含的多酚、多糖和蛋白质等杂质的污染。分离的总RNA经甲醛变性凝胶电泳和紫外光检测,可见28S和18S rRNA的2条清晰的带型,完整无降解,其A260/A280在1.8~2.0之间。研究结果证明,利用本方法提取的油菜种子总RNA具有很高的质量和纯度,且得率高,完全能满足后续的RT-PCR、全长基因的克隆和Northern blotting分析等分子生物学研究。
关键词：
油菜种子 RNA提取 多酚 多糖 方法
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭陈刚 李顺国 魏志敏 夏雪岩
为了从转录组水平研究黄伞菌的抗肿瘤等药用价值，需要提取分离得到高纯度、高质量的黄伞菌ＲＮＡ样品。利用液氮研磨ＴＲＩｚｏｌ一步法提取黄伞菌总ＲＮＡ，并且对经过和未经液氮研磨的黄伞菌ＲＮＡ提取产物进行了质量检测和统计对比分析。检测结果显示，经液氮研磨样品ＲＮＡ浓度远远高于未经研磨样品，ｏＤ２６０／２８０都约等于２，说明其纯度很高。同时，３个重复样品２５Ｓ和１８Ｓ亚基条带荧光强度比值分别为１．８，１．９，１．９，接近于２，证明ＲＮＡ完整性较好，ＡｇＩｌｅＮＴ ２１００的ＲＩＮ值检测结果分别为９．１，８．７，９．３，均远大于６．８标准，进一步佐证了其完整性。所以，液氮研磨ＴＲＩｚｏｌ一步法是非常适用于．．．
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
邵毅 罗云波 张京声 陈安均 朱本忠
李果实富含酚类和多糖,成熟李果实的总酚和总糖含量分别可达140.28μg/g和80.75mg/g,因此常规方法不能有效提取其RNA以进行分子生物学研究。比较了改良的异硫氰酸胍法、改良的Trizol法、改良的CTAB法和高氯酸盐法提取李果实RNA的效果,结果表明高氯酸盐法效果较好。根据李果实材料的特点,进一步优化了高氯酸盐法,包括用0.1mol/LTris-硼酸缓冲液(pH7.4)取代0.3mol/LTris-HCl缓冲液(pH8.3);提取缓冲液中β-巯基乙醇的浓度由1%提高到2%,可溶性PVP的浓度由8.5%降低至1%;联合使用10%乙醇和醋酸钾以除去多糖;用12000×g离心替代使用填充有...
关键词：
RNA提取 高氯酸盐 李果实 多酚 多糖
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨绍兰 张晓菲 张新富 王然
以茌梨和黄金梨果实为试材,研究了采后贮藏期间梨果实的硬度、乙烯释放速率、可溶性果胶含量以及7个PcEXPA基因的表达模式。结果表明,茌梨和黄金梨果实硬度在采后贮藏期间均呈下降趋势,但茌梨果实的硬度在贮藏后期明显高于黄金梨果实;黄金梨果实中的可溶性果胶含量明显高于茌梨果实;7个PcEXPA基因在2个品种梨果实中的表达模式显示,PcEXPA2基因在茌梨果实和黄金梨果实中的表达与果实硬度变化和乙烯释放速率一致,且均受1-MCP下调,表明其可能参与了茌梨和黄金梨的成熟衰老进程。
关键词：
茌梨 黄金梨 软化 Expansin
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孟晓庆 侯智霞 张兰 朴蕾
【目的】探讨榛子总RNA提取的有效方法,为今后开展榛子的分子生物学等研究奠定基础。【方法】以榛子的成龄叶片、幼嫩叶片和雄花芽为试材,采用植物RNA提取试剂盒、Trizol法、改良的CTAB法Ⅰ、改良的CTAB法Ⅱ、CTAB法和改良的SDS法提取其总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和PCR检测所提取总RNA样品的品质。【结果】除了Trizol法,其他5种方法都能提取到总RNA,但是改良的CTAB法Ⅰ更适合榛子幼嫩叶片、成龄叶片和雄花芽总RNA的提取,此方法提得的总RNA较完整,条带清晰,品质较优,28SrRNA亮度约是18SrRNA的2倍,且无降解现象。经RT-PCR验证,以改良的CT...
关键词：
榛子 总RNA CTAB SDS
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
陈美霞 陈富成 颜克伟 刘晓倩 徐建堂 陶爱芬 祁建民
红麻叶片中富含多糖、多酚和其他次生代谢物质,影响其RNA的产量和质量.本研究应用CTAB法、热硼酸法、SDS法、Trizol法和商品化试剂盒5种方法提取福红992幼嫩叶片总RNA,并对各方法提取效果进行比较.结果表明,热硼酸法效果最佳,其次是CTAB法和SDS法,而Trizol法、试剂盒提取效果不理想.采用热硼酸法提取的红麻叶片总RNA能够成功进行反转录和制备cDNA.
关键词：
红麻 叶片 总RNA提取
[期刊] 西南农业学报
[作者]
叶开玉 卢美英 于萍 陈殿余
针对龙眼组织富含多糖、单宁、色素及酚类物质的特点,采用改良的SDS法和CTAB法进行龙眼顶芽、叶片和茎皮3种组织总RNA的提取与纯化研究。结果表明,两种方法提取的总RNA均具有28、18、5S 3条清晰、完整的条带,且无降解现象;A260/A280均介于1.8~2.0之间,A260/A230均大于2.0。说明改良的SDS法和CTAB法提取的总RNA具有很高的纯度,可以满足后续分子生物学研究的要求。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
杜希华 陆海 高述民 李凤兰
以文冠果花药为材料 ,利用TRIZOL试剂快速提取法、异硫氰酸胍法和CTAB法提取花药总RNA .通过RNA产率、纯度、电泳图谱和mRNA差异显示等分析来确立适于文冠果花药RNA分离的方法 .研究结果表明 ,CTAB法提取的RNA呈现出 2 8SrRNA、18SrRNA和 5SrRNA三条较清晰的条带 ,很少有降解 ,其A2 6 0 A2 80 值可达 1 94 4 ,A2 6 0 A2 30 值为2 16 5 ,具有很高的纯度 .另 2种方法获得的RNA纯度较低 ,降解严重 ,有较多小分子和盐存在 ;RNA无明显条带出现 ,而是以小分子RNA弥散状分布 .使用差异显示法分析发现 ,用C...
关键词：
文冠果 花药 RNA 分离提取
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
丁勇 范红波 张高磊 严宇庭 李瑞阳
采用RNAiso Plus法、RNApure Plant Kit法和改良CTAB法分别提取麻疯树种子总RNA,以期筛选适合于麻疯树种子高质量总RNA提取方法。用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,以紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率。结果表明:RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA的A260/A280比值为2.030,28S和18S rRNA条带清晰,且前者的亮度约为后者的2倍,无可见的弥散现象,利用该方法提取的总RNA进行RT-PCR,成功克隆获得了麻疯树oleosin基因长603 bp的cDNA序列。证明RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA可满足后续RT-PC...
[期刊] 华北农学报
[作者]
张鑫 杜国强 师校欣
利用CTAB_异硫氰酸胍法、改良CTAB法和RNAplant试剂盒法,从富含多糖和酚类物质的苹果组培苗继代苗中提取总RNA。结果表明CTAB_异硫氰酸胍法对苹果组培苗总RNA的提取有较好的效果,所得RNA的A260/A230大于2.0,A260/A280为1.8~2.0,产率在16.95μg/g左右。改良CTAB法和RNAplant试剂盒法提取的RNA均有少量DNA污染,但RNAplant试剂盒法比CTAB法更快捷,简便。
关键词：
苹果 总RNA 提取方法 组培苗
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李大志 邓子牛 熊兴耀 谢丙炎
从RNA的完整性、纯度和产量等方面比较了TRIzol,RNAplant,TRIpure等3种RNA提取试剂对番茄不同组织部位总RNA的提取效果.结果表明,RNAplant能从成熟组织中获得较高质量和产量的总RNA,用该方法提取的番茄老化组织总RNA经RT-PCR能成功进行内参检测.
关键词：
番茄 总RNA RT-PCR
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
许靖诗 乌云塔娜 王广军
对内蒙古和黑龙江的5个野生秋子梨群体的100个单株的果实性状变异程度,变异类型,果实形态的地理变异,果实和花性状指标与海拔高度的相关性进行了分析,以揭示我国野生秋子梨的遗传多样性,及其与环境的关系,为我国野生秋子梨资源的保护和利用提供理论依据。研究结果表明:野生秋子梨果型小于栽培梨,在野生秋子梨果实性状指标中果柄长的变异程度最大,变异系数为23.26%;根据野生秋子梨果实的性状指标可以将野生秋梨分为‘红罐梨’、‘大苹果梨’、‘小扣罐梨’、‘红焦梨’、‘小红焦梨’、‘黄罐梨’、‘短把黄罐梨’、‘长把黄罐梨’、‘圆通梨’、‘小罐梨’;根据果实纵径/横径分为苹果型(果实的纵径/横径为0.9-1)和梨...
关键词：
中国野生秋子梨 果实 形态变异
[期刊] 华北农学报
[作者]
段西飞 王静华 崔江慧 薛薇 李霄 常金华
介绍一种高粱总RNA的提取方法。该方法以CTAB为主要提取试剂,成功地提取出了高粱叶片的总RNA。获得的RNA条带清晰,A260/A280在1.8~2.0。这些结果表明提取的总RNA质量好,完整性好,可用于cDNA文库的构建、差异表达等工作。
关键词：
高粱 总RNA CTAB 提取
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘品 李超 黄吉芹 吉红
获得高质量的RNA是逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及转录组测序(RNA-Seq)等分子生物学研究的基础,由于草鱼脂肪细胞中油脂含量较高,从中提取高质量RNA存在困难。本研究以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)成熟脂肪细胞为材料,通过增加离心和抽提次数等方式对传统总RNA提取方法进行优化,采用琼脂糖凝胶电泳、核酸定量分析及基因扩增等方法验证所得RNA的完整性、纯度及质量。结果表明,经此方法提取的草鱼成熟脂肪细胞总RNA的A260 nm/A280 nm比值在1.95到2.00之间,28S和18S条带完整,草鱼LPL和β-actin基因扩增条...
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