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[期刊] 水产学报
[作者]
刘瑾 张美娟 于成兵 杨烁烁 张京 徐建雄 徐维娜
为研究黄连素对高脂诱导的斑马鱼肝脏细胞脂质代谢组学的影响，以斑马鱼细胞为实验材料，通过棕榈酸钠（0.25 mmol/L，24 h）诱导肝脏细胞脂质沉积模型，经黄连素（25 μmol/L，6 h）处理后收集细胞。采用高效液相色谱-质谱联用技术进行脂质代谢组学分析，对不同处理的斑马鱼肝脏细胞的脂质代谢物进行筛选鉴定并对脂代谢相关因子的基因表达进行检测。结果显示，与对照组相比，高脂组共筛选出1 761个差异离子，其中鉴定出147种差异表达的代谢产物基因，123个表达升高、24个降低；高脂+黄连素组共筛选出2 728个差异离子，其中鉴定出346种差异表达的代谢产物，139个升高、207个降低。与高脂组相比，高脂+黄连素组共筛选出1 605个差异离子，其中鉴定出259种差异表达的代谢产物，45个升高、204个降低。进一步对不饱和脂肪酸代谢通路研究发现，差异代谢产物二高-γ-亚麻酸（DGLA）和二高-α-亚麻酸（ETA）含量在高脂组中显著上升，且添加了黄连素后含量显著下降；与对照相比，高脂+黄连素组的DGLA和ETA含量并无显著差异。通过检测DGLA和ETA分解相关酶的基因（atgl、hsl）表达量发现，与对照组相比，高脂组二者均显著降低，添加了黄连素后均显著升高；检测合成相关酶基因（acc、elovl6、elovl7a、scdb、fas和fads2）的表达量，结果显示，与对照组相比，高脂组细胞内acc、elovl6和scdb的表达量显著升高，fads2表达量显著降低，而添加了黄连素后细胞内fads2的表达量显著升高，fas、elovl6和scdb表达量显著降低。综上所述，高脂诱导通过抑制脂质分解相关基因表达，促进脂质合成相关基因的表达进而引起脂肪在细胞中的过度沉积，添加适量黄连素可以显著改善这一现象。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李根芳 胡瑞芹 宋汝浩 陈良标
水体急性低氧一直是水产养殖中的棘手问题，而铁代谢在鱼类低氧应激中发挥着极其重要的作用。为探究铁离子浓度对鱼类应激低氧胁迫的影响，本研究以模式生物斑马鱼的肝脏细胞（Zebrafish liver cells，ZFL）为研究对象，分别利用柠檬酸铁胺（Ammonium ferric citrate，FAC）和去铁胺（Defetoxamine，DFO）对ZFL细胞进行外源铁补充和内源及外源铁清除处理，从而比较不同铁离子浓度下ZFL细胞对低氧胁迫的应激反应。结果表明，低氧胁迫显著降低了ZFL细胞的增殖能力和存活率以及铁代谢相关基因的表达水平，而与对照组和内源及外源铁清除组相比，补充外源铁能够明显增强ZFL细胞在低氧胁迫下的增殖能力、存活率和铁蛋白的表达水平。同时，在外源铁补充组的ZFL细胞中，与铁吸收（tfa）、铁储存（fthl27、fthl28、fthl31）和铁输出（fpn）相关基因的mRNA表达水平均显著提高。进而又对低氧胁迫下ZFL细胞的活性氧（Reactive oxygen species，ROS）水平进行检测，发现补充外源铁能够在一定程度上恢复ZFL细胞中ROS的水平，说明在一定范围内胞内ROS水平的增加有利于ZFL细胞应对低氧胁迫。综上所述，本研究发现当ZFL细胞处于急性低氧时，补充外源铁离子可以提高细胞内的铁水平，进而产生一定的有益ROS，有助于提高其在低氧环境中的生存率。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
黄敏 程珂 马春松 王猛 王春芳
为探究6-姜烯酚对鱼类的免疫调节作用,用不同浓度的6-姜烯酚孵育斑马鱼肝脏细胞48 h后,检测其生长率、胞内活性氧(ROS)水平、抗氧化酶活性,并进行抗炎、抗氧化基因表达量的检测。结果显示:高浓度的6-姜烯酚抑制肝脏细胞的增殖(P<0.05),而活性氧ROS和脂质过氧化产物MDA含量最低(P
[期刊] 水产学报
[作者]
陆梓晔 姚春凤 车明晓 迟淑艳 谭北平
本试验旨在探究高脂饲料中添加α-硫辛酸（α-LA）对大口黑鲈生长性能和肝脏脂质代谢的影响，配制3组等氮实验饲料，分别为粗脂肪14%的基础饲料组（D1），粗脂肪14%添加α-LA组（D2），粗脂肪16%添加α-LA组（D3），投喂大口黑鲈幼鱼[初体质量（5.01±0.02）g]，养殖试验持续8周。结果显示，D3组与D1组之间的鱼体增重率和特定生长率差异不显著，显著高于D2组；D3组的蛋白质效率和蛋白沉积率显著高于D1和D2组；D2和D3组血清甘油三酯、谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性比D1组显著降低，各组间总胆固醇含量差异不显著。D2和D3的肝脏空泡化面积和脂肪含量显著低于D1组；D2和D3组肝脏的脂肪甘油三酯脂肪酶和肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ活性显著提高，脂肪酸合成酶和乙酰辅酶A羧化酶的活性显著降低；肝脏代谢组学结果显示，D3组不饱和脂肪酸的生物合成代谢通路相比D1组显著上调。D3组肌肉十五烷酸、十七烷酸和二十一碳酸含量显著升高，D2和D3组花生四烯酸（ARA）、二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）的含量显著升高。研究表明，高脂饲料中添加α-LA，通过不饱和脂肪酸的生物合成代谢通路增强脂质分解并抑制脂质合成，减少肝脂积累，促进肝脏健康，增加肌肉ARA、DHA和EPA的沉积。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨丹 宋昕昊 季春雷 彭麟 高修歌 左儒楠 季辉 江善祥
[目的]研究鲫鱼肝脏细胞色素P450酶系对马度米星铵的响应。[方法]采用半静态染毒法，设置0.112、0.224、0.448 mg·L~(-1)的马度米星铵处理组和助溶剂对照组，在染毒后第7、14、21及28天，测定肝脏中细胞色素P450 1A(CYP1A)、3A(CYP3A)及4T(CYP4T)的mRNA表达水平，同时测定7-乙氧基异吩唑酮-脱乙基酶（EROD）、氨基比林-N-脱甲基酶（APND）、苯胺-4-羟化酶（AH）、红霉素-N-脱甲基酶（ERND）、NADPH-细胞色素C还原酶（NCCR）的活性及细胞色素P450（CYP450）的含量；通过体外肝微粒体孵育法评价马度米星铵对CYP1A活性的影响。[结果]马度米星铵对CYP1A、CYP3A和CYP4T的mRNA表达水平有一定诱导作用；0.448 mg·L~(-1)马度米星铵组CYP450含量在第21天显著低于对照组（P<0.05）；试验期间，马度米星铵组ERND活性均低于对照组；暴露于各染毒组的AH活性呈先升高后降低的趋势；体外肝微粒体孵育体系中，马度米星铵对CYP1A活性的抑制作用小于25%。[结论]马度米星铵对鲫鱼肝微粒体CYP1A活性无影响；马度米星铵对ERND活性的抑制作用可能与CYP3A的转录水平无关；ERND对马度米星铵较为敏感，适合作为马度米星铵污染水体的生物标志物。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
付兵 郁二蒙 王广军 谢骏 李志斐 张凯 龚望宝 田晶晶
为了研究摄食蚕豆后草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏脂肪蓄积情况以及形成原因,采集了摄食蚕豆的草鱼(试验组)和摄食配合饲料的草鱼(对照组)的肝脏样本后,通过H&E染色、油红O染色和透射电镜分别对两组草鱼肝脏进行病理学特征、脂质蓄积情况和肝细胞的超显微结构观察,同时检测与脂肪代谢相关的生理生化指标,并分析与脂肪酸合成相关的基因表达情况。结果发现:与对照组草鱼相比,试验组草鱼肝脏发生明显的脂肪变性,线粒体形态异常且数量减少;试验组草鱼血清中甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量显著升高(P<0.05);试验组草鱼肝脏中TG、TC和过氧化氢(H_2O_2)含量显著增加,但过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽(GSH)显著降低(P<0.01);试验组草鱼肝脏脂肪酸合成相关基因(acc和fas)的mRNA表达量极显著高于对照组(P<0.01)。研究表明,长期摄食蚕豆的草鱼肝脏会发生脂肪变性,其可能与脂肪酸从头合成(DNL)增加、氧化应激增强及线粒体结构破坏等有关。研究结果将为脆肉鲩营养调控和预防鱼类肝脏脂肪变性提供一定的理论依据。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
许琼琼 韩兵社 罗军涛 李艳 侯艳雯 胡鹏 张俊芳
为了研究鱼类低温下分子调控机制及其与活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅ ｏｘｙｇｅｎ ｓｐｅｃｉｅｓ，ｒｏｓ）之间的关系，本实验对斑马鱼（Ｄａｎｉｏ ｒｅｒｉｏ）胚胎成纤维ＺＦ４细胞进行不同程度的低温胁迫（１８℃和１０℃），监测其在不同低温胁迫时间下（１ Ｄ、３ Ｄ和５ Ｄ）ｒｏｓ的变化以及丝裂原活化蛋白激酶（ｍｉｔｏｇｅｎ－ａｃｔｉｖａｔｅＤ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ，ｍａｐｋ）通路中蛋白的表达情况。结果显示：（１）ＤｃＦＨ－Ｄａ探针法表明在低温胁迫作用下，细胞内ｒｏｓ含量增加。细胞内ｒｏｓ上升水平与外界胁迫压力成正相关。低温处理３ Ｄ后，１８℃和１０℃的细胞，其ｒｏｓ含量与对照组（２８℃）相比分．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张文旭 王宝维 葛文华 张名爱 李文立
【目的】探讨胆碱对青农灰鹅体内脂质转运、代谢的作用及脂肪酸合成酶FAS(fatty acid synthase)基因表达的影响,确定鹅日粮中胆碱的最适添加量。【方法】将180只1日龄青农灰鹅随机分为6个处理组,每处理组3个重复,每个重复10只。试验在玉米-豆粕型饲粮的基础上各组的胆碱添加量分别为0、600、1 200、1 800、2 400和3 000 mg.kg-1,试验期15周。屠宰后测定肝脏和血清总胆固醇、甘油三酯,血清低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、葡萄糖、胰岛素、胰高血糖素水平,肝脏脂蛋白酯酶、肝脂酶及血清胆碱酯酶活性和肝脏脂肪酸合成酶(FAS)基因表达量。【结果】①4周龄时...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张勇 杜瑞亭 何秋雯 礼贺 张和平
【目的】研究不同剂量益生菌L.casei Zhang(2.0×1010CFU/d、2.0×109CFU/d和2.0×108CFU/d)及其发酵乳饮料(2.0×108CFU/mL/d)对高胆固醇血症大鼠肝脏脂质的治疗作用。【方法】采用高脂饲料诱导高脂血症,采用相应试剂盒测定肝脏总胆固醇水平(TC)和甘油三酯(TG)水平、粪便总胆汁酸水平与胆固醇水平以及血清载脂蛋白ApoAⅠ与ApoB水平。【结果】益生菌各剂量组和发酵饮料组与高脂模型组相比,肝脏总胆固醇水平(TC)和甘油三酯(TG)水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。各试验组均可显著增加高血脂大鼠粪便总胆汁酸水平和血清载脂蛋白ApoAⅠ...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
廖春燕 高文浩 李嘉辉 迟淑艳
本实验旨在探讨高脂饲料在短期内对珍珠龙胆石斑鱼生长性能和抗氧化能力所产生的影响， 以便于预估高脂饲料对石斑鱼生长可能产生的负面影响， 从而在高脂饲料配制和投喂时间上采取有效措施。在粗蛋白水平为48%的基础上分别配制脂肪水平为8% (EE8)、10% (EE10)、12% (EE12)、14% (EE14)、16% (EE16)、18% (EE18)和20% (EE20)的7组等氮饲料， 饲喂初均重为(13.70±0.01) g珍珠龙胆石斑鱼4周。实验结果表明， 随着饲料粗脂肪水平的提升， 增重率(WGR)和存活率(SR)无显著性变化(P>0.05)， EE14-EE20组饲料系数(FCR)显著降低(P<0.05)， 而脏体比(VSI)显著增大(P<0.05)， 饲料粗脂肪超过16%后蛋白质效率(PER)显著上升(P<0.05)。EE14-EE20组腹肌粗脂肪(AMEEC)显著升高(P<0.05)， EE16-EE20组的肝体比(HSI)显著增大(P<0.05)。与EE12组相比， EE8、EE10、EE18和EE20组的总胆固醇(T-CHO)显著升高(P<0.05)， EE16-EE20组谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著下降(P<0.05)， EE20组丙二醛(MDA)含量显著上升(P<0.05)， EE8、EE16-EE20组的肝脏细胞空泡化面积和脂滴量显著增加(P<0.05)。脂肪合成基因g6pd、6gpd和me的相对表达量在EE20组显著上升(P<0.05)， 脂肪分解基因cpt-1、pparα相对表达量在EE16-EE20组显著上升(P<0.05)。研究表明， 饲料粗脂肪超过16.77%时， 会造成珍珠龙胆鱼肝脏脂肪沉积， 降低肝脏抗氧化能力， 使肝脏健康受损。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陈丹红 陈青青 田红艳 施华娟 刘文斌
本研究运用细胞生物学研究方法,探讨中草药提取物黄连素对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞(L8824)活力、氧化应激和细胞凋亡的影响。用不同浓度黄连素(0μmol/L、5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)分别处理体外培养的草鱼肝细胞Oh、6 h、12 h和24 h,采用CCK-8法检测细胞活力。结果显示,黄连素浓度和时间对细胞活力有显著交互作用(P<0.05),且黄连素浓度对其活力影响差异显著(P<0.05),草鱼肝细胞活力随着黄连素的浓度增加先升高后降低(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王林枫 贾少丹 杨改青 朱河水 柳如意 严平 李明 杨国宇
【目的】探寻脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)影响奶山羊肝脏营养代谢的特征代谢物(生物标记物),阐明LPS引起肝脏代谢障碍的机制。【方法】选择12—18月龄,体重24—28 kg的关中奶山羊15只,平均分为3组(每组5只),分别为对照组(CTL)、低剂量LPS处理组(LPS-L)和高剂量LPS处理组(LPS-H)。LPS-L和LPS-H分别腹腔注射20、40μg·kg-1 BW的LPS溶液,CTL注射等容量生理盐水。24 h后,LPS-L和LPS-H追加LPS溶液。48 h后,静脉采血,分离血浆和血清,检测血液相关生化指标;然后活体采集肝脏组织,液氮保存。肝脏组织冻干后,用...
关键词：
代谢组学 脂多糖 肝脏 代谢物 奶山羊
[期刊] 海洋渔业
[作者]
施兆鸿 廖雅丽 王孝杉 高权新 彭士明 张晨捷
为探讨云纹石斑鱼（ＥｐｉｎＥｐｈＥｌｕｓ ｍｏａｒａ）肝脏代谢酶活力对盐度骤降的响应，设置２７（对照组）、２１、１５、９共４个盐度梯度对云纹石斑鱼进行盐度骤降胁迫实验。分别在０、１、２、３、７ ｄ时取样，测定其肝脏中酸性磷酸酶（ａＣｐ）、碱性磷酸酶（ａＫｐ）、谷丙转氨酶（ＧｐＴ）、谷草转氨酶（ＧｏＴ）以及乳酸脱氢酶（ｌｄｈ）活力。结果显示，ａＣｐ活力盐度２１组先波动变化后恢复正常水平，盐度１５组先下降后升高，随后第７天下降恢复正常水平；ａＫｐ活力盐度２１组和盐度１５组先呈下降趋势，第３天大幅度升高；ＧｐＴ与ｌｄｈ活力盐度２１组和盐度１５组基本呈现先下降再上升并波动的变化趋势；ＧｏＴ活力变化趋势．．．
关键词：
云纹石斑鱼 骤降低盐胁迫 肝脏代谢酶
[期刊] 中国水产科学
[作者]
牛虹博 胡鹏 程鹏丽 储旭 胡春兰 陈良标
为了研究双特异性磷酸酶(dual-specificity phosphatase 1,dusp1)基因与鱼类低温诱导的细胞凋亡之间的关系,本研究经Eco RI和Age1酶切构建plko.1-dusp1-sh RNA1,plko.1-dusp1-shRNA2,plko.1-negative control(nc),plko.1-EGFP的重组质粒,并分别与慢病毒包装质粒pCMV-DR8.9.1、pCMV-VSVG共同转染至293T细胞中,经293T细胞包装的病毒,感染斑马鱼(Danio rerio)胚胎成纤
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
皇甫一凡 昝林森 王洪宝 成功 刘扬 高建斌 李耀坤 杨宁
【目的】建立稳定成熟的牛成肌细胞胰岛素诱导成脂分化体系,为肉牛肉脂品质的改良提供参考。【方法】取1日龄荷斯坦公牛犊后腿肌肉,用Ⅳ型胶原酶消化法分离成肌细胞,用胰岛素诱导成肌细胞成脂分化,以未添加胰岛素的培养基为对照组,检测成肌细胞成脂分化过程中细胞形态的变化,并分析与成肌细胞和脂肪细胞分化相关基因(C/EBPα、C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ、Myf5、MyoD)分别诱导第3,6,9,12,15天相对表达量的变化,分析牛成肌细胞的诱导分化情况。【结果】成功分离培养了牛原代成肌细胞。胰岛素处理组细胞中脂滴的油红O染色明显,C/EBPβ、C/EBPδ、PPARγ和MyoD相对表达量明显增高...
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