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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 任宇皓  胡元亮  刘家国  张宝康  宋大鲁  
将黄芪多糖 (APS)、淫羊藿多糖 (EPS)、淫羊藿总黄酮 (EF)分别与新城疫病毒 (NDV)Ⅰ、Ⅳ系以 3种顺序加入到培养 2 4h的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,即先加中药后接种病毒、先接种病毒后加中药、病毒和中药混合感作后同时加入。于病毒接种后 72h测定NDVⅠ系的半数组织培养感染剂量 (TCID50 )和NDVⅣ系的血凝效价 ,以评价 3种中药成分对NDV感染细胞的影响。结果表明 ,APS和EPS仅在先于病毒加入时对NDV有抑制作用 ,而EF无论以何种方式给药均呈抑制作用。提示它们有一定的抗病毒作用 ,且与其浓度有相关性
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王君敏  胡元亮  张帆  王德云  赵晓娜  张靖  刘静  赵彪  郝丽华  
用氯磺酸-吡啶法修饰当归多糖(CAPS)和枸杞多糖(LBPS),得到4种硫酸化当归多糖sCAPS0.6、sCAPS1.1、sCAPS1.9、sCAPS2.2和4种硫酸化枸杞多糖sLBPS0.7、sLBPS1.1、sLBPS1.5和sLBPS1.9。分别以CAPS和LBPS为对照,采用MTT法比较了这8种硫酸化多糖对新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞能力的影响。结果表明:硫酸化修饰能显著提高当归多糖和枸杞多糖的抗病毒活性,且与硫酸基取代度有一定的相关性。sCAPS2.2、sLBPS1.5、sCAPS1.9和sLBPS1.9的活性较好,可以作为进一步研究的材料。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 步志高  陈万芳  宋大鲁  
3日龄雏鸡皮下注射淫羊藿-蜂胶合剂,于7,21,35,49日龄分别采用微量全血~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法和乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定雏鸡外周血 T 淋巴细胞转化率和自然杀伤细胞(NK)活力。注射剂量0.4ml/羽能极显著(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 孔祥峰  胡元亮  王德云  李祥瑞  刘家国  张宝康  邱妍  
将 5种浓度的当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖、淫羊藿多糖、蜂胶多糖、淫羊藿黄酮、蜂胶黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷分别与新城疫病毒LaSota株混合感作 14 4h和 2 72h后 ,加到已培养 36h的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,继续培养 72h ,采用中性红染料吸收法测定CEF增殖变化 ,判定中药成分对病毒感染活性的影响。结果表明 ,所有中药成分几乎所有浓度均影响或显著抑制病毒的感染活性 ,且与感作时间有一定的相关性。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 吕英军  倪嘉宁  鲍恩东  
为探讨多聚核苷酸(聚肌胞)对新城疫病毒(NDV)的抑制作用,本研究通过聚肌胞对感染NDV的鸡胚成纤维细胞、SPF鸡胚和肉鸡进行了病毒抑制试验。结果显示:125和250μg.mL-1的聚肌胞溶液能明显抑制100倍TC ID50的NDV在鸡胚成纤维细胞上的繁殖;5 mg.mL-1的聚肌胞溶液(每个胚0.1 mL)能明显抑制NDV在SPF鸡胚中的繁殖,减轻NDV对鸡胚生长的抑制作用,降低病毒血凝效价和鸡胚死亡数。聚肌胞对肉鸡抵抗NDV感染试验结果显示,肌肉注射0.01 mg.kg-1的聚肌胞注射液能明显提高治愈率和显效率。但反映细胞活性状态的中性红染色(D570值)随着聚肌胞浓度的增大而变小的结果说...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 胡元亮  吕殿红  宋大鲁  张宝康  
3日龄雏鸡按两个剂量组分别于皮下注射淫羊藿-蜂胶佐剂(简称淫蜂佐剂)0.2mL和0.4mL,24日龄时重复注射1次。于7,14,21,28,35,42日龄时随机抽样扑杀,采取免疫器官称重并进行光镜和电镜检查,比较不同剂量的淫蜂佐剂对雏鸡免疫器官的增重以及形态结构的影响。结果表明,淫蜂佐剂能显著促进雏鸡免疫器官的早期发育,并能刺激T、B淋巴细胞活化。重复注射后,可再次引起脾脏增重,且与剂量有相关性,0.4mL/羽优于0.2mL/羽。
[期刊] 水产学报  [作者] 曹丽萍  丁炜东  张柳  Galina Jeney  徐跑  殷国俊  
为了探讨香菇和黄芪多糖对鲤免疫细胞的免疫活性作用,采用Percoll密度离心等技术,对鲤的头肾巨噬细胞和外周血白细胞进行分离纯化,并离体培养,从细胞和分子水平上研究了香菇和黄芪多糖的免疫调节作用。巨噬细胞和外周血白细胞分别体外暴露不同浓度的黄芪多糖和香菇多糖后,采用MTT法测定它们对鲤外周血白细胞增殖的影响;NBT还原法和Griess试剂显色法测定对头肾巨噬细胞的呼吸爆发的影响;实时定量PCR法测定头肾巨噬细胞细胞因子IL-1β诱导表达的影响。结果显示,黄芪和香菇多糖作用头肾巨噬细胞24h后,香菇多糖浓度为1,10,100μg·mL-1时能显著诱导巨噬细胞的氧爆发活性,黄芪多糖则没有显著的诱导...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 赖晓健  陈仕玺  赖国银  陈芸  陈锦民  李忠琴  王艺磊  
在水温(21±1)℃下,给体重(592.5±52.5) g的日本鳗鲡(Anguilla japonica)雌亲鱼投喂每千克体重含0.034 g淫羊藿和0.034 g菟丝子浸膏的饲料90 d,对照组投喂人工配合饲料,研究淫羊藿和菟丝子对卵巢发育的影响。结果显示,饲料中添加淫羊藿和菟丝子的雌鱼卵巢大部分卵母细胞属第Ⅱ时相,性腺指数和肝体比均显著高于对照组(P<0.05);卵母细胞油滴明显增多,部分卵母细胞胞质已充满油滴,核仁变小增多;血清雌二醇(E2)和11-酮基睾酮(11-KT)水平显著升高(P<0.05),实验组11-KT含量约为对照组的4倍;肝脏卵黄蛋白原基因vtg表达量升高,实验组和对照组卵巢cyp19a1仅微量表达,肝脏未检测到erα和erβ的表达;实验组肌肉总脂肪酸、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)和高度不饱和脂肪酸(HUFA)含量均显著高于对照组(P<0.05),最主要的高度不饱和脂肪酸花生四烯酸(AA)、二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量均显著高于对照组(P<0.05)。本研究表明,在亲鱼培育饲料中添加中草药淫羊藿和菟丝子促进了日本鳗鲡卵母细胞油滴和肝脏卵黄蛋白原增加,提高了肌肉高不饱和脂肪酸的积累,为卵黄生成和卵母细胞进一步发育做好更充分的准备。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 陈茜  邢玉娟  陈玉库  胡元亮  王德云  蔡丙严  
【目的】研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)和氧化苦参碱(Oxymatrine,OM)对新城疫疫苗免疫的影响。【方法】将14日龄非免疫罗曼蛋公鸡550羽随机均分为11组,1~9组分别为OAP(以OM与APS质量比为6∶4配成)、OM和APS的高(4mg/mL)、中(2mg/mL)、低(1mg/mL)剂量组,10组为免疫对照组,11组为空白对照组。除空白对照组外,各组试验鸡只均于14日龄首免NDV-Ⅳ系疫苗,28日龄重复免疫。在首次免疫的同时,1~9组分别口服高、中、低剂量药物,免疫对照组和空白对照组口服等量生理盐水,每天1次,连续3d。分别于14,21,...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 段旭光  周崇文  陈科  曾雷  
用乙醚萃取大鼠血浆样品,用反相高效液相色谱法(Shim-pack VP-ODS色谱柱,等梯度洗脱)测定大鼠灌胃复方淫羊藿制剂后不同时间血浆中的淫羊藿苷质量浓度.结果表明,乙醚萃取处理后的血浆样品淫羊藿苷与复方制剂中其他组分及可能的内源性复合物能很好分离,淫羊藿苷在(0.0638~10.2000)μg/mL线性关系良好,日内精密度与日间精密度小于5%,提取回收率大于85%,样品在24h内保持稳定.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李春鹏  王克凤  孙晓丹  姚强  董然  
【目的】建立朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)种胚组织培养快繁体系,筛选其适宜的组织培养条件。【方法】以朝鲜淫羊藿种胚为外植体,研究外植体最佳消毒方式;在1/2MS基础培养基上,采用L_9(3~4)正交试验设计,探讨6-BA、NAA、IBA和蔗糖对种胚愈伤组织诱导的影响,筛选适宜培养基,并分析不同激素组合对愈伤组织增殖、丛生芽增殖及幼芽生根的影响。【结果】朝鲜淫羊藿的最佳消毒方式为:利用体积分数0.1%HgCl_2对种子表面消毒8 min,再对种胚消毒5 s,该条件下种子存活率为71.11%;诱导种胚愈伤组织的适宜培养基为1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,诱导率为47.78%;愈伤组织增殖的适宜培养基为1/2MS+0.5 mg/L KT+0.3 mg/L NAA,增长率为172.67%;丛生芽的适宜增殖培养基为1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,增殖系数为2.78;0.5 mg/L NAA的生根效果最好,生根率为43.33%。【结论】建立了朝鲜淫羊藿种胚适宜的组织培养体系,在该体系下,组培苗长势良好,但生根效果需进一步研究。
[期刊] 水产学报  [作者] 任胜杰  吴青  张佐  袁文清  陈兰  郑曙明  
为研究黄芪多糖(APS)和当归多糖(ASP)对维氏气单胞菌诱导鲫细胞凋亡的影响,实验设阴性对照组、阳性对照组,黄芪多糖组和当归多糖组,通过对鲫用维氏气单胞菌攻毒处理,用流式细胞仪测定血细胞的凋亡比例和细胞周期变化,并用荧光显微镜和透射电镜观察凋亡细胞的形态。结果显示,维氏气单胞菌攻毒后阳性对照组鲫血细胞的细胞凋亡率均极显著高于多糖组和阴性对照组;多糖组能显著降低鲫的细胞凋亡率且黄芪多糖组效果更显著;攻毒后鲫肝细胞和肾脏淋巴细胞出现染色质凝集、细胞核固缩边集和细胞空泡化及凋亡小体;同阴性对照组相比;维氏气单
[期刊] 水产学报  [作者] 任胜杰  吴青  张佐  袁文清  陈兰  郑曙明  
为研究黄芪多糖(astragalus polysacharin,APS)和当归多糖(angelica sinensis polysaccharide,ASP)对维氏气单胞菌诱导的鲫细胞凋亡的影响,实验设阴性对照组、阳性对照组,黄芪多糖组和当归多糖组四个处理组,通过对鲫用维氏气单胞菌攻毒处理,用流式细胞仪测定血细胞的凋亡比例和细胞周期变化,并用荧光显微镜和透射电镜观察凋亡细胞的形态。结果显示,维氏气单胞菌攻毒后阳性对照组鲫血细胞的细胞凋亡率均极显著高于多糖组和阴性对照组(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王华夏  顾峰  廖瑛  茅翔  丁铲  范红结  
[目的]本文旨在探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染过程中细胞因子显著上调的机制。[方法]NDV感染He La细胞,用RT-PCR法检测IFN-β、IL-6、IL-8 mRNA水平。Western blot分析和免疫荧光分析检测NDV对双链RNA激活的蛋白激酶(PKR)与NF-κB信号通路的影响。[结果]与未感染组相比,IFN-β、IL-6、IL-8 mRNA水平显著上调。NF-κB信号通路在感染后1224 h被激活,转录因子p65入核,而使用NF-κB信号通路抑制
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 池雪林  曾显成  黄小红  罗树红  汪世华  
通过透射电子显微技术对羊口疮病毒(ORFV)YX强毒株感染羊胚胎鼻甲细胞(OFTu)的细胞超微结构和病毒形态发生学进行研究.结果显示,成熟的病毒粒子呈椭圆形,有囊膜,大小约为150 nm×250 nm,可见两面凹陷呈哑铃形的核酸芯髓和2个侧小体结构.病毒在胞浆中复制,在高尔基体形成囊膜,最后病毒粒子通过细胞膜出芽和细胞裂解方式释放病毒粒子.感染细胞超微结构主要表现为:内质网扩张呈囊、池内分离;线粒体增生、嵴肿胀、变暗、模糊不清,最后空泡化;高尔基体出芽、扩张;细胞核溶解呈早期凋亡现象,胞浆出芽,最后整个细胞裂解、破碎.
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