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[期刊] 林业科学研究
[作者]
阙国宁 诸葛强
以牡竹属黄竹（ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｍｅｍｂｒａｎｃｅｕｓＭｕｎｒｏ）的竹节及无菌苗根颈为外植体，培养于含有５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／ＬＫＴ和２００ｍｇ／ＬＬＨ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，然后移至相同成份或不同浓度２，４－Ｄ的液体培养基中，进行悬浮培养，以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体，其产量分别约为每克鲜重２．５×１０５个和５×１０５个，活力均可达８０％。
关键词：
黄竹,细胞悬浮培养,原生质体分离
[期刊] 林业科学研究
[作者]
诸葛强 阙国宁
山杉木(Cunninghamia lanccolata Hook.)成熟种子胚在含有2.0mg/l 2,4-D、0.2mg/l KT的MS培养基上诱导愈伤组织,通过筛选继代培养,得到了生长旺盛、质地松散的愈伤组织细胞系。继代初期适当降低蔗糖浓度有助于减少愈伤组织的褐化。将5个月龄的愈伤组织转移至含1.5～2.0 mg/l 2,4-D、0.1～0.2mg/l KT、200 mg/l CH的MS液体培养基振荡培养,建立了增殖快、分散性良好的杉木悬浮细胞系。从4个月龄的悬浮细胞酶解(2％纤维素酶、0.25％果胶酶和13％甘露醇),游离得到大量的杉木原生质体,产量为9.3×10~5个/g FWW,活力...
关键词：
杉木 悬浮细胞系 原生质体的分离
[期刊] 林业科学研究
[作者]
张守英 阙国宁
Callus was induced by embryos from mature seeds of Pinus serotina with MS medium contained 0.2 mg?L -1 of KT and 2.5 mg?L -1 of 2,4 D.After successive subculture and selection,six month old callus were transferred to a liquid medium with 0.2 mg?L -1 of KT and 0 5.0 mg?L -...
关键词：
晚松 悬浮细胞系 原生质体分离
[期刊] 水产学报
[作者]
谢恩义 马家海
为了开发礁膜人工育苗的新技术,以4％果胶酶和2％纤维素酶的甘露醇溶液,分离酶解经无菌处理的礁膜叶状体,在40mmol·L~(-1)CaCl_2,0.7mol·L~(-1)甘露醇,pH5.5,温度28℃,摇床速度50r·min~(-1)旋转振荡3h的条件下,1.0g湿重礁膜可获原生质体约2×10~6个。原生质体分离后依次用比重为1.030、1.026、1.022的消毒海水(添加N、P、Fe~(2+)、IAA、KB、Vit C)培养,2d后已形成明显的再生细胞壁,3～4d后细胞开始分裂,8d后形成由4～8个细胞组成的细胞团,以后原生质有不同的发育形态,较常见的是形成由一共同胶质膜包被的类似亲本的叶...
关键词：
礁膜 原生质体 酶解 分离 培养
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
葛台明 章荣德 秦发兰 余毓君 谢岳峰
以多花黑麦草 (LoliummultiflorumLam .)幼穗为外植体诱导愈伤组织 ,经高有机态氮培养基改造得到易碎型胚性愈伤组织 ,在 1 / 2AA培养基 +1 / 2MSDL培养基中得到了生长迅速、分散的胚性悬浮系。分离原生质体经培养后得到了再生白化苗
[期刊] 水产学报
[作者]
王素娟 孙云龙 马凌波 何培民
本研究多次获得原生质体，明确了酶解原生质体的内在因素与外在条件，诸如酶溶剂的种类及浓度，酶及组成，酶解温度及ｐＨ，采种藻时间及取用部位。分离的原生质体经初步培养，发现少数２分裂，最好的有成６分裂的细胞团，但尚未成株。研究结果为扩大培养打下了良好的基础。此外，还报道了用海洋细菌酶解的试验及意义
关键词：
羊栖菜,原生质体,分离,培养
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙玉强
根据增加棉花基因库多样性的迫切需要,棉花改良计划正在转向于多种分子育种技术的应用和资源的利用。丰富的棉花野生种(Gossypiumspp.)是栽培棉遗传改良重要的种质资源和更新资源,并成为宝贵的遗传资源库,野生棉研究利用对栽培棉的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李正红 孙振元 刘秀贤 彭镇华
用纤维素酶、果胶酶、甘露醇的混合酶液提取地锦和五叶地锦无菌苗幼叶、五叶地锦胚乳愈伤组织及地锦幼胚愈伤组织的原生质体,对影响原生质体提取得率及活力因素进行分析,对不同材料原生质体得率进行比较,对提取的原生质体进行液体浅层、固液结合及固体等方式培养,对原生质体形成的愈伤组织以MS和改良B5培养基附加不同浓度NAA、6 BA、2,4 D、PEG、KT、ZT等进行分化培养。试验结果表明:纤维素酶对原生质体提取得率有极显著影响,适宜地锦幼叶原生质体提取的酶液组合为:纤维素酶0.5%、果胶酶0.3%、甘露醇0.6mol·L-1、酶解8h;不同材料原生质体提取得率有显著差异;仅五叶地锦胚乳愈伤组织来源的原生...
关键词：
地锦 五叶地锦 原生质体 培养
[期刊] 华北农学报
[作者]
周延清 苑保军 张根发 卢龙斗
用决明（ＣａｓｉａｏｂｔｕｓｉｆｏｌｉａＬ．）子叶和下胚轴为材料，游离和培养原生质体。结果表明，１５日龄无菌苗的子叶和下胚轴比较适于游离原生质体，每１ｇ材料的原生质体产量高达１．６×１０４个；ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ－２３是分离原生质体所必需的；用含２，４－Ｄ０．４ｍｇ／Ｌ（以下单位同），ＮＡＡ１．０与ＫＴ０．１的ＫＭ８Ｐ漂浮培养利于原生质体的分裂。培养４ｄ后，原生质体开始分裂，１５ｄ后其植板率约为１９．２％，３０ｄ形成了细胞团或小愈伤组织。增殖愈伤组织在分化培养基上培养，可分化出芽。芽在生根培养基上培养１４ｄ生根，从而再生决明小植株。
关键词：
决明,原生质体,再生植株
[期刊] 华北农学报
[作者]
程增书 高志强 方仁
从小麦ＣＫ８９、１０２、１１３的花药和花冬的约穗诱导愈伤组织的继代培养中，选择致密颗粒型愈伤组织，转入附加２，４－Ｄ２～４ｍｇ／Ｌ改良ＭＳ固体培养基上进行继代培养，６～１０周后形成生长迅速的胚性愈伤组织，这种愈伤组织分离原生质体得率为１～３．７×１０７个／ｇ。原生质体于ＰＣＭ２培养基上琼脂糖包埋培养，３～５天出现第一次细胞分裂，７～１４天进行第二、第三次细胞分裂，两周后形成大量细胞团，细胞分裂频率达２０．３％～７３．３％，４～６周后形成肉眼可见愈伤组织。供试４个基因型中，ＣＫ８９、１０２和花冬均形成再生愈伤组织，仅１１３形成多细胞团。愈伤组织增殖分化实验尚在进行中。
关键词：
小麦,胚性愈伤组织,原生质体培养
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
史永忠 万蜀渊 薛光荣
草莓花药愈伤组织经５次继代培养，生长旺盛，质地松软，可用于原生质体的分离。在含０．１％ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ－２３，０．５％纤维素酶（ＯｎｏｚｕｋａＲ－１０），０．５％离析酶（ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－ｌ０）的混合酶液中酶解１３ｈ，原生质体的产量为１．４７×１０￣６／ｇＦＷ，活性６７．３５％。原生质体采用液体浅层和琼脂糖包埋培养，获得了肉眼可见的多细胞团。
关键词：
草莓,原生质体培养,再生细胞团
[期刊] 华北农学报
[作者]
王怀名 A.舍弗尔-门沃尔 G.米克斯-瓦格纳
研究了8个杂种一代嫩茎花椰菜品种,在5个品种中得到了细胞分裂、多细胞团和愈伤组织;1个品种的愈伤组织再生了新枝。离体繁殖的无菌苗叶片剪成细条,酶液由2％纤维素酶和1％解析酶组成,21℃、50转/分摇床上分离3小时。0.5M蔗糖液漂浮纯化。接种于1％琼脂糖滴上,滴加液体培养基,25℃、光照16小时、光强4000lux下培养。3～5天细胞分裂;1周左右形成4个或更多细孢团;3～5周形成小愈伤组织。愈伤组织达2～3mm时,移到愈伤组织固体培养基上;直径达1cm时,移到固体分化培养基上,分化出根和新枝。
关键词：
原生质体培养 新枝再生 嫩茎花椰菜
[期刊] 林业科学
[作者]
尹忠平 上官新晨 陈继光 吴少福 黎冬明
通过大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析、半制备高效液相色谱及重结晶对青钱柳悬浮培养细胞三萜酸进行分离纯化,获得5个单体三萜酸,经高分离度快速液相-飞行时间质谱(RRLCTOF/MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)和核磁共振碳谱(13C NMR)等分析,分别被鉴定为2α-羟基齐墩果酸、2α-羟基熊果酸、白桦脂酸、齐墩果酸、熊果酸,其中2α-羟基齐墩果酸和白桦脂酸是首次在青钱柳中得到分离鉴定。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
梁军 魏刚 吕全 贾秀贞 张星耀
研究了印楝细胞悬浮培养系的建立及印楝细胞悬浮培养的条件。结果表明,印楝细胞悬浮系的建立以B5培养基,NAA2 0～4 0mg·L-1,采用直接倾倒法作为接种方法为好;基于生物量、印楝素含量和印楝素产率综合分析认为,印楝细胞悬浮培养的最佳条件为B5培养基,NAA2～4mg·L-1,蔗糖30g·L-1,培养温度25℃,及根据培养容器的大小选择合适的转速和装液量。
关键词：
印楝 细胞悬浮培养 印楝素 植物源农药
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘菲 彭克勤 彭志红 夏石头 萧浪涛
以喜树的幼嫩叶片为材料,探讨了MS、SH、B5基本培养基和不同激素(2,4-D、NAA、6-BA)配比对愈伤组织诱导及继代培养的影响,并筛选喜树细胞悬浮培养体系的最优培养基配方.结果表明,喜树幼嫩叶片外植体诱导愈伤培养以SH+2.0mg/LNAA+0.5mg/L6-BA为最优,愈伤组织诱导率为92%.继代培养以MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LNAA为最适,在此条件下诱导的愈伤组织质地疏松,适于进行悬浮培养.
关键词：
喜树 愈伤组织 组织培养 悬浮培养
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