【目的】对黄瓜胚性愈伤组织的诱导保存和再生进行研究,为黄瓜高频率遗传转化奠定基础。【方法】以欧洲温室型黄瓜自交系14-1子叶节为外植体,在MS培养基上附加1.5 mg/L 2,4-D,进行25 d的胚性愈伤组织诱导培养后,取胚性愈伤组织在添加30,60,90,100,110,120,130,140和150 g/L蔗糖及1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基进行继代培养,每30 d继代1次,观察胚性愈伤组织的褐变情况及胚性分化能力,并用电子天平在超净工作台中记录胚性愈伤组织质量的变化。继代培养60 d后,将保存的胚性愈伤组织和体细胞胚移至含1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,待出现体细胞胚后移至MS培养基进行萌发,观察再生小植株的生长情况。【结果】将欧洲温室型黄瓜自交系14-1的子叶节,接种到附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上进行诱导培养后,子叶节一端的愈伤组织集中聚集于下胚轴处,之后有黄色胚性愈伤组织产生。在继代培养过程中,当培养基中添加的蔗糖为60～150 g/L时,胚性愈伤组织能保持胚性愈伤状态达60 d。之后将继代培养60 d后的胚性愈伤组织转接至附加1.5 mg/L 2,4-D的MS培养基上,在蔗糖质量浓度为60 g/L条件下保存的胚性愈伤组织可诱导出正常胚状体,且能形成健康小植株。【结论】由黄瓜子叶节诱导出的胚性愈伤组织可在MS+60 g/L蔗糖的培养基上保存达60 d,之后能正常萌发形成胚状体,进而形成正常小植株。

对福建龙眼的主要栽培品种、地方品种及特异株系共51份种质的幼胚进行培养,诱导胚性愈伤组织作为种质资源离体保存的材料,并进行限制生长保存试验.结果表明:MS+2 mg.L-12,4-D培养基适用于绝大部分品种的不同直径的龙眼幼胚胚性愈伤组织的诱导,平均诱导率为48.3%;直径2-4 mm的幼胚最适宜于胚性愈伤组织诱导.在添加1 mg.L-1活性炭的培养基上进行为期7-10 d的过渡培养,能减少直径6 mm的幼胚因褐变导致的死亡,从而提高愈伤组织诱导率.龙眼胚性愈伤组织在常规继代培养中的周期为20 d左右,且品种间的差异较大.在MS+1 mg.L-12,4-D培养基中附加20 g...

The embryogenic callus induction and shoot regeneration were studied systematically in elite clone GL9 of Eucalyptus cultivated widely in south China.We investigated TDZ 0.02-0.05 mg·L-1 was the proper concentration.The callus induction rate was 92.9%—100%.When TDZ concentration was higher than 0.1 ...

火炬松胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究唐巍欧阳藩（中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验室北京１０００８０）郭仲琛（中国科学院植物研究所北京１０００９３关键词火炬松，体细胞胚胎发生，植株再生本文于１９９６年１０月２８日收到。国家“８６３”资...

以冰糖橙成熟果实中的未发育胚珠为外植体 ,培养诱导胚性愈伤组织并进行植株再生。结果表明 :在不同的培养基和不同的培养条件下胚性愈伤组织和胚状体的发生频率不同 ;麦芽提取物和GA3 有利于胚性愈伤组织的发生 ,暗培养有利于胚性愈伤组织的诱导 ;在MKBN (MT +KT 0 .5mg/L +BA 0 .5mg/L +NAA0 .1mg/L)培养基上 ,胚状体的再生率达 88.2 4 % ,以酸橙作砧木进行试管嫁接 ,嫁接成活率达 88.89%。

以番木瓜的幼胚、下胚轴、叶片和子叶作为外植体,研究不同的激素配比、附加物以及培养方式和条件对胚性愈伤组织和体胚的诱导效果.结果表明,幼胚是胚性愈伤组织和体胚发生的好材料.幼胚最佳诱导培养基为:改良MS+10 mg·L-1 2,4-D+5 mg·L-1 NAA+2 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 BA;最适合的增殖培养基为:改良MS+10 mg·L-1 2,4-D+2.5mg·L-1 NAA+1 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 BA;最佳体胚诱导培养基为:改良MS+10 mg·L-1 2,4-D+2 mg·L-1 KT;子叶较难诱导愈伤组织,叶片和下胚轴愈伤组织的诱导率较高,...

为建立瓜叶菊愈伤组织再生体系,以瓜叶菊花梗、花托为外植体进行了愈伤组织诱导和分化研究.结果表明:1)在MS+2,4-D2mg/L+NAA0.1mg/L,3/4MS+2,4-D2mg/L+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L,3/4MS+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L培养基上花梗、花托的出愈率可达100%,但在3/4MS+6-BA1mg/L+NAA0.1mg/L,3/4MS+6-BA1mg/L培养基上花梗的出愈率不及花托;2)3/4MS无激素培养基对花托愈伤组织芽的分化较好,诱导率可达95%,3/4MS+6-BA1mg/L培养基对花梗愈伤组织芽的分化较好,诱导率为90%;3)再生苗...

以成熟合子胚为外植体,用完全随机、正交设计等试验方法加之组培技术来研究影响华北落叶松(Larix princi-pis-rupprechtii)胚性愈伤组织诱导的几种主要因子。结果表明:诱导胚性愈伤组织过程中的最佳灭菌方式为2%Na-ClO灭菌30 min,剥皮、去胚乳处理。其中污染率和NaClO的灭菌时间呈负相关:NaClO灭菌时间越长,污染率越低。诱导胚性愈伤组织的最佳琼脂浓度为4 g·L-1,且过高和过低的琼脂浓度不仅降低了其诱导率,提高了愈伤组织的褐化水平,也影响了外植体的发育形态。外源激素的正交试验结果表明:2,4-D是主要影响因子,对诱导率的影响显著,其次是KT,最后是6-BA。最...

以14个柑桔品种成熟泉实中的败育种子为试材,培养诱导胚性愈伤组织的发生。结果表明,不同种类品种的胚性愈伤组织和胚状体的发生频率明显不同。麦芽提取物、谷氨酰胺和GA明显影响柑桔胚性愈伤组织和胚状体的发生。

以玉米自交系黄早4、综31、金黄96B、GY237、478及海921为材料,通过改良培养基上附加成分的组成及浓 度,对影响玉米胚性愈伤组织的诱导及分化等几个关键因素进行了研究。结果表明,基因型对玉米胚性愈伤诱导的影响 是显著的,而且基因型和基本培养基之间存在互作;在培养基上附加水解酪蛋白(casein hydrolysate,CH)、L-脯氨酸(L- proline)对于玉米胚性愈伤组织的诱导分化是必要的,而附加L-谷氨酰氨、甘露醇、AgNO3对提高胚性愈伤组织的诱导作 用不显著;结果还发现胚性愈伤组织诱导培养基和胚性愈伤组织分化培养基的组合对成苗率有明显的影响作用。

为了诱导冰糖橙的愈伤组织和建立胚性细胞系,以冰糖橙成熟果实中未发育胚珠为外植体,将乙烯合成抑制剂AgNO3应用于冰糖橙胚性细胞系的建立,AgNO3设有5,10,12mg/L等3个处理,以未加AgNO3的MT培养基为对照.结果表明,在诱导培养基中添加AgNO3不能促进胚性愈伤组织的形成,反而抑制了胚状体的发生.然而在继代培养基中添加5mg/L的AgNO3有利于小而弱的胚状体基部形成胚性愈伤组织,胚性愈伤组织发生率达28%.经过5次继代处理建立了冰糖橙的胚性细胞系.

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg·L~(-1))、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg·L~(-1))、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg·L~(-1))和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg·L~(-1))组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg·L~(-1))、6-BA(0、0.5、1.0 mg·L~(-1))和TDZ(0、0.2、0.5 mg·L~(-1))组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO_3和NH_4NO_3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS+2,4-D 3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 0.2 mg·L~(-1)+TDZ 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+琼脂7.0 g·L~(-1),诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+TDZ 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+谷氨酰胺100 mg·L~(-1)+琼脂7.0 g·L~(-1),体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO_3浓度提高1倍、NH_4NO_3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍; 1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。

目的沙田柚(Citrusgrandis[L.]Osbeckcv.Shatian)是中国的特有品种,其愈伤组织难以诱导。为进一步进行细胞工程研究,本研究通过与其它品种杂交的方法获得杂种胚性愈伤组织。方法以沙田柚为母本,用体细胞杂种橘柚+无酸甜橙([C.reticulataBlanco×C.paradisiMacf.]cv.Nova+C.sinensis[L.]Osbeckcv.Succari)为父本进行杂交,90d后将幼胚取出,在MT+ME(麦芽提取物,500mg·L-1)和MT+GA3(1mg·L-1)两种固体培养基上培养。结果幼胚培养约5个月左右,在两种培养基上从胚状体和幼小植株的下胚轴处都...

为了建立小麦成熟胚的高频再生体系,以泰9817和泰山21为材料,研究了不同浓度金属离子(Cu2+和Ag+)对小麦成熟胚离体培养特性的影响。结果表明,在培养基中添加1μmol/L CuSO4或10μmol/L AgNO3有助于小麦成熟胚愈伤组织的诱导及分化,不同浓度CuSO4或AgNO3对小麦成熟胚愈伤组织出愈率的影响不如对胚性愈伤率、分化率及出苗率的影响大;在最佳CuSO4浓度(1μmol/L)下,泰9817和泰山21的胚性愈伤率、分化率及出苗率分别比对照(未加CuSO4)提高了71.18%和87.37%、76.01%和88.92%1、59.64%和323.79%;在最佳AgNO3浓度(10μ...

以长江流域及华中地区推广的24个小麦品种为材料,分析、比较其成熟胚在3种诱导培养基和1 种分化培养基上的愈伤诱导和分化频率。结果表明:不同诱导培养基在愈伤诱导率上存在显著差异,添加ABA的MB5培养基诱导效果最佳;不同小麦品种对培养条件的反应不同,华9943、华9914等4 个品种在3 种培养基上的诱导频率相同,而其余品种在3种培养基上的愈伤诱导率差异极显著。在分化绿点和成苗率上,品种间差异十分明显,农大146、苏麦6号、扬麦158、华麦12号和华麦8号的再生力强。因此,在小麦成熟胚培养中,筛选优良的基因型—培养基组合是必要的。