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[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴旭东 侯玉霞 张文吉
从组织提取RNA的完整性对于分子生物学研究是至关重要的。RNA提取方法有多种。采取异硫氰酸胍法从黄河鲶肌肉、血液、全鱼、肾脏、肝脏、卵巢中提取出完整RNA,结果表明,通过该方法所提取RNA质量高,效果好,可以用于进一步的分子生物学研究。
关键词：
黄河鲶 RNA提取 异硫氰酸胍法
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴旭东 张奇 侯玉霞 张文吉
从鲶肌肉、肝、肾、血中提取基因组DNA。经过0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,DNA带型整齐。紫外分光光度仪测定基因组DNA的D260 nm/D280 nm达1.77~1.82,证明所提取基因组DNA质量较好,可用作聚合酶链式反应(PCR)的模板所需。
关键词：
鲶 基因组DNA 提取方法
[期刊] 西南农业学报
[作者]
叶开玉 卢美英 于萍 陈殿余
针对龙眼组织富含多糖、单宁、色素及酚类物质的特点,采用改良的SDS法和CTAB法进行龙眼顶芽、叶片和茎皮3种组织总RNA的提取与纯化研究。结果表明,两种方法提取的总RNA均具有28、18、5S 3条清晰、完整的条带,且无降解现象;A260/A280均介于1.8~2.0之间,A260/A230均大于2.0。说明改良的SDS法和CTAB法提取的总RNA具有很高的纯度,可以满足后续分子生物学研究的要求。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
侯哲 陆秀君 张晓林 梅梅 魏俊 李昂
试验以天女木兰叶芽、幼叶、成熟叶、花芽、花瓣、种子为材料，分别采用Ｔｒｉｚｏｌ法、改良Ｔｒｉｚｏｌ法、ＣＴＡＢ－异丙醇法、ＣＴＡＢ－ＮＡ ＡＣ和无水乙醇法、ＣＴＡＢ－ｌｉ Ｃｌ法、天根试剂盒法对其各器官进行总ｒＮＡ的提取。总ｒＮＡ的完整性、纯度和浓度等提取效果分别通过琼脂糖凝胶电泳和酶标仪进行检测。结果表明：叶芽的总ｒＮＡ最适合用改良Ｔｒｉｚｏｌ法进行提取，花瓣和花芽的总ｒＮＡ最适合用改良的ＣＴＡＢ法提取，幼叶的总ｒＮＡ可选择试剂盒法，Ｔｒｉｚｏｌ可用于成龄叶片的提取，而天根试剂盒最适合天女木兰种子总ｒＮＡ的提取。通过不同提取方法获得的高质量总ｒＮＡ经ｒＴ－ＰＣｒ检测表明：可以直接用于后续分子．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
任杰 徐秀红 张素丽 冷平
为了提高植物不同组织提取质量和效率,降低成本,在热硼酸法的基础上探索出一种适于植物不同组织总RNA提取方法。利用该方法从植物根、茎、叶、不同成熟期果实、不同成熟期种子和不同成熟期果柄中提取的总RNA经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳分析证明具有较高的纯度和完整性。所得RNA的A260/A230大于2.3,A260/A280为1.8～2.0,并且RNA产量高,可以满足RT-PCR和Real time RT-PCR的实验需要。该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物不同组织总RNA提取方法。
关键词：
植物组织 总RNA 热硼酸法
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
方婷 徐倩 金爱武 邓莹 骆争荣 朱强根
【目的】探讨适合于毛竹不同组织尤其是毛竹根系以及种子等总RNA提取的最优方法,获得高质量RNA样品,为今后开展毛竹的分子生物学研究奠定理论基础。【方法】分别采用柱式Trizol法、Trizol法、SDS法、改良CTAB法提取毛竹的细根、气雾根、成熟叶、幼叶、枝、种子、笋等不同组织的RNA,通过NanoDrop2000微量分光光度计检测浓度、1.5%琼脂糖凝胶电泳检测样品完整度以及RT-PCR检测是否存在目标条带,采用Excel和SPSS软件对提取结果进行统计学分析。【结果】4种方法均能从毛竹不同组织中提取到总RNA,其中SDS法提取的RNA浓度较高,但提取时间过长且步骤繁琐,RNA容易发生降解,其质量不适合用于后续的分子生物学试验;柱式Trizol法和Trizol法用时短且提取方法简单便捷,除了对毛竹细根和种子的提取效果不佳外,其余组织的RNA纯度和质量都可以满足后续的试验开展;改良CTAB法适用于各组织,包括木质化程度较高的毛竹细根以及富含淀粉的毛竹种子,缺点是DNA残留明显。除SDS法所获得的浓度较高并与其他3种方法有显著性差异外,其余3种RNA抽提方法对样品总RNA浓度无统计学差异,且各组织RNA反转录为cDNA,以内参基因PhPP2A为目的基因进行RT-PCR扩增,均可在目标位置获得明亮单一条带,约为150 bp。【结论】改良CTAB法最适合毛竹细根以及种子的RNA提取,柱式Trizol法和Trizol法适合毛竹气雾根、叶、枝和笋总RNA的提取。
关键词：
毛竹 组织 RNA提取 RT-PCR
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李大志 邓子牛 熊兴耀 谢丙炎
从RNA的完整性、纯度和产量等方面比较了TRIzol,RNAplant,TRIpure等3种RNA提取试剂对番茄不同组织部位总RNA的提取效果.结果表明,RNAplant能从成熟组织中获得较高质量和产量的总RNA,用该方法提取的番茄老化组织总RNA经RT-PCR能成功进行内参检测.
关键词：
番茄 总RNA RT-PCR
[期刊] 中国农业科学
[作者]
常洪 于永梅 钱耕荪 冀德君 吴一迁
目的寻找中缅树鼩孟德尔性状的适宜纯化方法。方法以Rife-Buranamanas母子性状组合频率定律鉴别了中缅树鼩8种孟德尔性状的遗传机制;以群体遗传学和概率矩阵方法探讨了动物克隆、超数排卵与胚胎移植、“理想型横交”和多元测交四种选育体制对中缅树鼩驯化群孟德尔性状纯化和保持一般的遗传多样性的效率。结果在中缅树鼩基因组背景下,野生型毛色、暗色眶缘、白色腹毛、有季节性红斑、肉色掌底皮肤、非竖耳、圆尾和对称乳房是显性孟德尔特征;对于规模既定的群体而言,不同体制下一代间淘汰率之比也就是近交增量、基因多样度损失量之比;就性状纯化的效应而言,多元测交体制优于“理想型横交”。以普通果蝇(Drosophila...
关键词：
中缅树鼩 孟德尔特性 纯化方法
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张燕 吴谋成
油菜籽饼中单宁的提取、纯化工艺参数的研究表明：油菜籽单宁最佳提取条件为７０％的丙酮水溶液，温度３０℃，粒度为０．３ｍｍ以下。单宁回收率为８３％，此条件下饼粕中硫代葡萄糖苷只残留６．４７μｍｏｌ／ｇ，植酸几乎没有被提取
关键词：
油菜籽饼 单宁 提取 纯化
[期刊] 水产学报
[作者]
林华娟 秦小明 章超桦 长岛裕二
为了获得麻痹性毒素标准品,以毒化扇贝为试验材料,对扇贝中的麻痹性毒素(PSP毒素)进行了提取和分离纯化。以酸性80%乙醇溶液反复提取麻痹性毒素,得到了总毒性为6170MU的毒素粗提液。毒素粗提液经过超滤、Bio-GelP-2凝胶柱层析和Bio-Rex70离子交换柱层析等二次层析柱分离纯化后得到以膝沟藻毒素群(GTXs)为主的纯化PSP毒素。HPLC分析结果显示,扇贝中主要含有膝沟藻毒素GTX3,GTX1、GTX2、GTX3、和GTX4的组成比例约为2∶4∶14∶1(以HPLC上的峰面积比例计)。纯化后的毒素可以作为标准物质用于GTX1-4的HPLC分析。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周裔彬 汪东风 杜先锋 倪晓波
建立了一套用酸化法提取、纯化海带中多糖类化合物的方法。结果表明:在75℃、4 h的反应条件下,海带多糖的提取率较高,粗糖可达35.10%;纯化后的多糖含量可达96.60%;经薄层层析、高效液相色谱、Sephadex G洗脱分析,海带多糖含有2-3种多糖,是一种混合多糖。
关键词：
海带多糖 提取 纯化
[期刊] 海洋渔业
[作者]
王晓梅 张忠山 周俊波 潘伟成 孙斯麒 徐年军
红藻龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)是沿海地区重要的经济海藻,含丰富的蛋白质、碳水化合物、钙、铁等。近年来,龙须菜在食品、化工、医药领域得到广泛应用,引起越来越多研究者的关注。其中,龙须菜中丰富的多糖成分是主要研究对象。综述了近20年来龙须菜多糖的提取纯化方法及其生物活性的研究进展,旨在为龙须菜多糖的应用开发提供参考,也为龙须菜的高值化综合利用提供借鉴。
关键词：
龙须菜 多糖 提取 活性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王坤波 刘仲华 黄建安
综述了国内外茶黄素的提取和分离纯化方法的研究成果和研究现状 ,并分析评价了柱层析法和高速逆流色谱法的优缺点 ,认为两者结合是理想的分离纯化工艺
关键词：
茶黄素 提取 分离 纯化
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张欣 吕作舟
采用水浸法、碱浸法从香菇菌盖中提取粗多糖 ,经乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白、CTAB络合沉淀、氯化钠溶液溶解、透析 ,得到 2种多糖 :Lew(水浸物 )和Lea(碱浸物 )。经PAGE电泳、纸层析、紫外光谱分析鉴定 ,两者都为均一组分。Lew的纯度为 79.1% ,Lea为 83.2 %。改良型膜渗透压法测分子量 ,Lew的分子量为 8.31× 10 4 ;Lea为 9.4 0× 10 4 。经红外光谱分析 ,Lew、Lea具相似结构 ,但不是同一物质 ,它们具多糖的特征吸收峰 ,是 β 酸性异多糖。采用纸层析、气相色谱分析 ,检测多糖的单糖组成及其摩尔比 ,Lew为Ara∶Rha∶Xyl∶...
关键词：
香菇 菌盖 多糖 纯化 理化性质
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吴洪新 呼天明 张存莉 贾红勋 鲁友均
以普那菊苣为原料,对菊苣菊粉提取、纯化工艺进行了优化研究。结果表明,菊粉提取的最佳工艺条件为:原料为粉状,温度85℃,固液比为1∶30,提取时间为60 m in,菊粉的提取率达58.58%。纯化时石灰乳脱蛋白的最佳处理温度为70~80℃。提取液最佳脱色工艺条件为:脱色温度70℃,脱色时间50 m in,活性碳用量为20 g/L,脱色率为69.13%,菊粉损失率为7.93%。
关键词：
菊苣 菊粉 提取工艺 纯化工艺
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