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[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄艳华 黄钧 胡大胜 施金谷 彭民毅 彭亚
以常规方法从患典型红底板病黄沙鳖的心脏、肝脏和腹水等处分离到5株病原菌,API 20NE、16S rRNA基因序列分析进行病原菌鉴定和确定其系统发育地位,PCR检测病原菌的6种毒力基因。结果表明,5株病原菌均为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),与Aeromonas hydrophila QDC01菌株的亲源关系最近。6种毒力基因的阳性率,hly、Aer和Act为100%,ahal、Alt和ahp为80%;毒力基因型共3种,在5株菌株中的分布情况为hly+Aer+Alt+Act+ahal+ahp+3株,hly+Aer+Alt-Act+ahal+ahp-1株,hly+Aer...
关键词：
黄沙鳖 红底板病 嗜水气单胞菌 毒力基因
[期刊] 水产学报
[作者]
韩书煜 梁静真 覃志彪 黄艳华 韦慕兰 蒙兰丽 黄维 胡大胜 黄钧
查明广西南宁、贵港和桂平养殖山瑞鳖细菌性败血症的病原菌及其6种毒力基因的携带情况,为有效防控山瑞鳖细菌性败血症提供参考。本研究以常规方法从患病山瑞鳖的心脏和肝脏取样、分离细菌,人工感染方法确定分离菌株的致病性,细菌鉴定采用API 20NE生化鉴定和16S rRNA分子鉴定相结合的方法进行,PCR扩增法对菌株的溶血素基因(hemolysin gene,hly)、气溶素基因(aerolysin gene,Aer)、细胞兴奋性肠毒素基因(cytotonic enterotoxin gene,Alt)、细胞毒性肠
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘杰 龙宜楠 黄钧 梁静真 胡大胜 龙苏 牛志伟 彭亚 植淇业
为查明黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)暴发性流行病的病原菌及其3种毒力基因的携带情况,以常规方法进行细菌分离,人工感染试验确定病原菌的致病性,API 20NE和16S rRNA基因序列分析进行细菌鉴定,PCR扩增法检测病原菌的3种毒力基因。结果显示,从发病症状典型的黄颡鱼肝脏中分离到1株嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)GXGP1,与嗜水气单胞菌标准株ATCC 7966T的同源性为99.9%,对黄颡鱼有很强致病力,是引起黄颡鱼暴发性流行病的病原菌,该菌携带有Aer、hly和ahp 3种毒力基因。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
叶巧真 何建国 翁少萍 张邦杰 叶普仁 梁仁杰 潘雷
利用含类呼肠孤病毒和类腺病毒 的患白底板病和红底板病 病鳖组织匀浆过滤液及从病鳖中分离的致病性嗜水气单胞菌， 进行病毒和细菌的相继 人工感染试验， 复制出典型的鳖红底板病和白底板病病症。研究发现， 细菌是红底板病的主要病原， 病毒是白底板病的主要病原，而病毒的感染不致死鳖， 细菌的继发感染是鳖最终死亡的因素。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
袁橙 郭长明 张步彩 左伟勇 唐晨晨 蔺辉星
从江苏省某水禽场的疑似感染致病性大肠埃希菌的病鸭中分离获得鸭致病性大肠埃希菌野毒株;通过玻板凝集和试管凝集试验确定其血清型,采用PCR进行分群分析和毒力基因检测;扩增φX_(174)噬菌体裂解蛋白E的基因序列,构建温控型表达质粒pBV221–E,并将其电击转化入分离毒株,升温诱导E蛋白表达制备菌蜕;通过测量菌液A600 nm值和在透射电镜下观察细菌形态,评估菌蜕构建效果;用该菌蜕进行灭活处理和无菌检测后,对雏鸭进行免疫,用间接ELISA法检测血清IgG水平。结果表明:该大肠埃希菌的血清型为O24,属于B1群,具有毒力基因fimC、csgA和iroN;获得的鸭致病性大肠埃希菌菌蜕裂解率为99.96%;经透射电镜观察发现,制备获得的菌蜕表面有明显孔道,细胞质从孔道溢出,细胞膜皱缩变形;抗体水平检测结果显示,二免后菌蜕免疫组雏鸭血清IgG水平显著提高。可见,通过将pBV221–E重组质粒转化至鸭致病性大肠埃希菌分离株,调节细菌培养温度诱导E蛋白表达,能制备鸭致病性大肠埃希菌B1群O24型野毒株菌蜕。该菌蜕可诱发机体产生体液免疫。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
邓小红 梁静真 黎姗梅 吕小丽 韦慕兰 韩书煜 蒙兰丽 黄钧 蒋经运
【目的】对广西全州县飞机坪鱼种场患病禾花鲤进行病原菌的分离鉴定,并对其致病性、耐药特性及6种毒力基因进行检测,为细菌引起的禾花鲤疾病及防控技术研究提供理论参考。【方法】从患病禾花鲤的肝脏、心脏和肾脏等部位取样分离细菌,人工感染确定菌株的致病性,API生化鉴定和16S rRNA分子鉴定相结合进行细菌鉴定,细菌的耐药特性试验为K-B纸片扩散法,毒力基因以PCR扩增法检测。【结果】从患病禾花鲤中分离到2株致病力很强的病原菌株TH1和TH3,对健康禾花鲤的致死率均为100.00%;经生化和分子鉴定,2株分离菌株均
关键词：
禾花鲤 嗜水气单胞菌 耐药性 毒力基因
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘杰 黄艳华 黄钧 胡大胜 梁静真 彭亚 龙苏 牛志伟 韩书煜 植淇业
为探明黄沙鳖(Truogx sinensis)源嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)所携带毒力基因种类对其致病力的影响,以从广西各地患病黄沙鳖中分离得到的嗜水气单胞菌为材料,通过对黄沙鳖和小鼠进行人工感染测定试验菌株的致病力,PCR检测供试菌株的hly、Aer、Alt、Act、ahal和ahp 6种毒力基因。结果表明,47株黄沙鳖源嗜水气单胞菌共包含9种毒力基因型,48.94%的菌株携带全部6种毒力基因,基因型为hly+Aer+Alt+Act+ahal+ahp+,是主要的毒力基因型;95.79%的菌株携带hly基因,均为有毒株;嗜水气单胞菌对黄沙鳖的致病力是多个毒力基因共同...
关键词：
黄沙鳖 嗜水气单胞菌 毒力基因 致病力
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
徐先栋 付辉云 饶毅 盛银平 王海华 傅义龙 李彩刚 周永灿
从草鱼体内分离到致病菌株Ｊｘｓｋｓ１，该菌株对草鱼的ＬＤ５０值为２．３×１０３ＣＦＵ／ｇ鱼体质量，为强致病菌；经生理生化、１６ｓ ｒ ＤＮＡ和ｇｙｒ Ｂ基因序列测序鉴定为嗜水气单胞菌。ＥｒＩＣ－ＰＣｒ分型结果表明，该菌株为迄今未见报道的类型。选取丝氨酸蛋白酶ＡｈＰ、热稳定性肠毒素Ａｓｔ、气溶素ＡＥｒ Ａ、热不稳定性肠毒素ＡＬｔ、鞭毛基因ＦＬＡ、脂酶ＬＩＰ等６种毒力基因特异性引物对该菌株进行ＰＣｒ检测，结果表明其毒力基因型为ＡＥｒ Ａ～＋、ＡＬｔ～＋、Ａｓｔ～＋、ＡｈＰ～＋、ＬＩＰ～＋、ＦＬＡ～－。选取２８种抗生素进行药敏检测结果表明，该菌株对喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类、氯霉素、第二代和第三．．．
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
张晓君 毕可然 阎斌伦 陈丽 白雪松 秦蕾
2011年春季对江苏连云港某对虾育苗场中国对虾Fenneropenaeus chinensis病死糠虾幼体分离到优势生长菌,对分离菌进行致病性、形态与生理生化特征及16S rRNA和gyrB基因同源性与系统发育分析。结果显示,引起糠虾幼体大量死亡的病原为哈氏弧菌Vibrio harveyi,菌株kx1对中国对虾仔虾和日本对虾仔虾的半数致死量LD50分别为2.0×106CFU/ml和7.0×105CFU/ml。为进一步明确分离菌株毒力基因的携带情况,进行了分离鉴定的4株病原菌对群体效应调节基因(luxR)、毒力调控基因(toxR)、溶血素基因(vhhA和vhhB)、金属蛋白酶基因(vhpA和vh...
关键词：
中国对虾 糠虾幼体 哈氏弧菌 毒力基因
[期刊] 西南农业学报
[作者]
江紫薇 陈选鹏 马恩耀 周劲松 冯冲 陈玉娥 周淑瑶 黄海波
【目的】明确黑老虎炭疽病原菌种类，筛选出适宜的防治药剂，为黑老虎炭疽病的识别和大田防治提供理论依据。【方法】采用组织块分离法对广东省云浮市黑老虎炭疽病原菌进行分离，基于科赫法则确定其致病菌，采用形态学和分子生物学相结合的方法对菌株进行种类鉴定，并采用菌丝生长速率法对其进行生物学测定及不同药剂的室内毒力检测。【结果】通过对病叶分离纯化共获得6种菌株，选取具有代表性的典型菌株A1进行形态鉴定以及ITS序列分析，确定黑老虎炭疽病原菌属炭疽菌属（Colletotrichum sp.）。通过对菌株A1进行生物学测定，明确其以PDA培养基为最适生长培养基，以28 ℃为最适生长温度，以53 ℃水浴处理10 min为菌株致死条件，以pH 6.0为菌丝最适宜生长pH，以连续黑暗（暗24 h）为最适光照条件，以麦芽糖和酵母粉分别为最佳碳、氮源。同时，在福美双、溴菌腈、多菌灵和嘧菌酯4种供试药剂中，多菌灵的抑菌效果最佳，EC_(50)值为0.14 μg/mL；其次是福美双和溴菌腈，EC_(50)值分别为55.26和55.32 μg/mL，抑菌效果较好；嘧菌酯的EC_(50)值为791.95 μg/mL，EC_(50)值在100～1000 μg/mL，抑菌效果不明显。【结论】广东省云浮市黑老虎炭疽病原菌为炭疽菌属。多菌灵、福美双及溴菌腈对黑老虎炭疽病原菌菌丝生长具有较好的抑制作用，可以作为黑老虎炭疽病的候选田间防治药剂。
关键词：
黑老虎 炭疽病 病原菌鉴定 室内毒力检测
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李萌悦 张晓勇 迟乃玉 杨友联
【目的】探明引起贵州省六盘水市猕猴桃根腐病的病原菌，筛选对其有效的防治药剂，为防治该病害提供依据。【方法】采用组织分离法从猕猴桃根腐病患病根部分离其致病病原菌，结合形态学特征和多基因（ITS、COXⅡ）系统发育分析对致病病原菌进行分类鉴定和生物学特性测定，采用菌丝生长速率法测定5种化学杀菌剂〔10%苯醚甲环唑（WG）、98%噁霉灵（SP）、72%唑醚·代森联（WG）、30%精甲·噁霉灵（SLX）和15%三唑酮（WP）〕对其室内毒力。【结果】猕猴桃根腐病病原菌为隐地疫霉（Phytophthora cryptogea）、樟疫霉（Ph. cinnamomi）、钟器腐霉（Pythium vexans）和菜豆壳球孢（Macrophomina phaseoli），其中，隐地疫霉和菜豆壳球孢为优势病原菌，其检出率分别为34%和23%；首次报道菜豆壳球孢是引发猕猴桃根腐病的致病菌。4种致病菌株的生物学特性存在一定差异，其最适生长温度为25～35 ℃，存在较大差异，其中，隐地疫霉KFR03-15菌株和樟疫霉KFR03-34菌株较低，为25 ℃，菜豆壳球孢KFR02-17菌株最高，为32～35 ℃；最适生长pH均为近中性且差异较小。30%精甲·噁霉灵对隐地疫霉、樟疫霉和钟器腐霉有较好的防治效果，其室内毒力EC50均＜0.3 μg/mL；72%唑醚·代森联对菜豆壳球孢防效最好，EC50为0.331 2 μg/mL。【结论】明确猕猴桃根腐病病原菌为隐地疫霉、樟疫霉、钟器腐霉和菜豆壳球孢，生产上可根据实际病原菌选择适宜的药剂进行猕猴桃根腐病的化学防治。
关键词：
猕猴桃 根腐病 生物学特性 室内毒力
[期刊] 水产学报
[作者]
邓梦玲 耿毅 刘丹 周燕 汪开毓 黄小丽 陈德芳 余泽辉 陈成
2013年8—9月,四川雅安汉源湖养殖的西伯利亚鲟发生一种以体表溃疡、内脏出血和心外膜囊肿为特征的传染病。为明确其病因,本研究从自然发病鱼的肝、脾和肾进行了病原菌的分离、人工感染、分离菌的表型特征和分子生物学特征的检测。结果从患病鱼体内分离到一株G+链状球菌(Ab130920),人工感染实验证实了其病原性,生理生化特性与海豚链球菌(ATCC29178)基本一致;16S r DNA序列(Gen Bank登录号:KJ162337)与Gen Bank中S.iniae16S r DNA序列同源性最高,在以16S r DNA序列及其Gen Bank中同源性较高的相关序列构建的系统发育树上,分离菌与海豚链...
[期刊] 水产学报
[作者]
张晓君 白雪松 毕可然 阎斌伦 秦蕾 陈丽 徐静
为明确牙鲆及大菱鲆病原迟钝爱德华菌毒力基因的携带情况并建立分子检测方法,实验以迟钝爱德华菌fimA、fimB、gadB及citC为靶基因设计特异性引物,进行PCR扩增及环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),并对其特异性、灵敏性和实际应用进行了比较。结果显示,10株病原迟钝爱德华菌均扩增出fimA、fimB、gadB及citC 4种毒力基因,目的条带大小分别为240、217、171及119 bp,4株对照菌无任何扩增条带;以fimA和gadB设计的两对引物进行的双重PCR扩增,同一PCR反应体系中病原迟钝爱德华菌可扩增出240和...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
阮柳 马占鸿 刘振宇 秦丰 王海光
为了解河北苜蓿根腐病病原种类，以便有目的地加以防治，对从河北采集的苜蓿根腐病样品进行了病原分离、鉴定以及致病性和室内毒力测定。根据形态学和核糖体内转录间隔区ＩＴＳ４和ＩＴＳ５、延伸因子ＥＦ－１Ｈ和ＥＦ－２Ｔ序列作为引物鉴定，分离出的７１株致病菌株均为镰孢菌属（ＦｕＳａｒＩｕｍ），其中，木贼镰孢（Ｆ．ＥｑｕＩＳＥＴＩ）５５株，尖孢镰孢（Ｆ．ｏｘｙＳｐｏｒｕｍ）７株，层出镰孢（Ｆ．ｐｒｏｌＩＦＥｒａＴｕｍ）６株，变红镰孢（Ｆ．ＩｎｃａｒｎａＴｕｍ）２株，茄镰孢（Ｆ．ＳｏｌａｎＩ）１株。尖孢镰孢菌株Ｄ１９－２、层出镰孢菌株Ｓ４５和茄镰孢菌株ｑ１的致病性最强。通过含毒介质法测定，结果表明，４０％腈菌唑．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
丁雷 岳永生 宋憬愚 谢光伟 赵德炳
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