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[期刊] 水产学报
[作者]
朱彦雨 刘晓莉 王亚坤 李伟 洪孝友 朱新平 徐红艳
性别异形在动物界广泛存在，长期以来一直是生物学中的热门话题。黄喉拟水龟性别分化属温度依赖型，其温度响应分子机制仍不清楚。为了进一步解析龟鳖动物性别分化的分子机制，本研究初步比较分析了黄喉拟水龟转录本中性别差异表达(different expressed, DE)的长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncRNA)及其调控的靶基因。首先，运用Illumina深度测序平台，通过转录组测序(RNA-Seqs)对黄喉拟水龟的精巢和卵巢进行了比较转录组学分析并筛选鉴定出雌雄差异转录本，共筛选获得8 237个DE mRNA和9 573个DE lncRNA。通过基因本体论(Gene Ontology, GO)功能注释及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析，发现了这些差异转录本主要参与龟鳖动物性别分化和性腺发育等相关信号通路。此外，通过顺式和反式作用分析，筛选获得了一系列与生殖发育相关的（性腺发育和性别分化）受DE lncRNAs调控的靶基因。本研究为进一步阐明黄喉拟水龟温度依赖型性别的分子机制提供了线索，特别是为进一步挖掘利用龟鳖动物性别决定因子，进行龟鳖动物性控育种技术研究奠定了基础。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
黎小正 韦信贤 童桂香 吴祥庆 庞燕飞
从广西某黄喉拟水龟(Mauremys muticaCantor)养殖场发病的黄喉拟水龟的肝、肺分离到一致病性的菌株(HX081027),经人工感染实验证实其为该病的病原菌。对该菌的形态、生理生化进行分析,试验结果与报道的摩氏摩根菌一致,表现为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌,无荚膜及芽孢,葡萄糖产酸产气,接触酶、脲酶、苯丙氨酸脱氨酶和鸟氨酸脱羧酶阳性,氧化酶、脂酶、DNA酶和赖氨酸脱羧酶阴性,甲基红阳性,VP反应阴性,MR阳性等特征。采用扩增细菌16S rDNA的通用引物对该菌的16S rDNA基因进行PCR扩增、克隆测序,得到1条长度为1506bp的核苷酸序列(GenBank登录号为FJ8581...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
朱新平 陈永乐 魏成清 刘毅辉
人工饲养新孵出黄喉拟水龟(MauremysmuticCantor)龟苗,试验期为44个月。观察与测量结果表明,雌、雄性别在背甲长、背甲宽、体高的形态参数及其与体重的相关关系上没有明显差异;雌、雄性别形态的区别在于第二性征的出现,即雌性腹甲平坦,尾巴短小,泄殖孔近尾基部;雄性腹甲内凹,尾巴粗壮,泄殖孔远离尾基部。雌、雄生长存在明显差异,雄性生长快于雌性。在试验期间,雄性个体增重为雌性个体的1.253倍。
关键词：
黄喉拟水龟 性别差异 形态参数
[期刊] 水产学报
[作者]
朱新平 陈永乐 刘毅辉 魏成清 陆小萏
本文对黄喉拟水龟、三线闭壳龟、鳄龟周年生长进行了研究与比较。在广州自然温度下 ,人工饲养黄喉拟水龟 343d ,平均体重由 10 .3g增到 71.9g ,生长率为 4 .37mg·g-1·d-1;三线闭壳龟 343d ,由 15 .6g增到 6 8.2g ,生长率为 3.6 8mg·g-1·d-1;鳄龟 36 3d ,由 10 .8g增到 2 6 3.1g ,生长率为 5 .0 8mg·g-1·d-1。即在生长速度上 ,鳄龟 >黄喉拟水龟 >三线闭壳龟。在周年生长中 ,三种龟体重、背甲长、背甲宽与日龄 ;背甲长与宽 ;背甲长、宽与体重 ;均有着显著的正相关关系。温度与龟的生长有密切关系 ,低...
关键词：
黄喉拟水龟 三线闭壳龟 鳄龟 生长
[期刊] 淡水渔业
[作者]
朱新平 陈永乐 魏成清 刘毅辉
[期刊] 水产学报
[作者]
龙建杰 朱新平 史燕 赵建 洪孝友
巨噬细胞炎症蛋白-3α是一种可诱导的分泌蛋白,通过相应受体对多种免疫细胞产生趋化,在多种疾病的免疫反应和炎症损伤中发挥重要作用。实验采用RT-PCR技术克隆出黄喉拟水龟巨噬细胞炎症蛋白-3α(MaCCL20)的成熟肽基因序列,通过双酶切将目的基因序列插入到表达载体pET-32a上,然后转化进大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导后表达出了pET-32a-CCL20融合蛋白,以该融合蛋白为抗原制备多克隆抗体并进行Western-blotting鉴定及抑菌性检测。实验表明,融合蛋白在37℃、0.8 mmol/L IPTG,4 h条件下得到高效表达;经SDS-PAGE凝胶电泳和Western-blott...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
刘芳 马晓慧 孙伟 钱国英 葛楚天
温度依赖型性别决定（temperature-dependent sex determination， TSD）是一种奇特的表型可塑性现象，但其背后的分子机制尚不清楚。红耳龟（Trachemysscripta）是一种典型TSD动物，个体性别完全由胚胎发育时所处的环境温度决定。为提供更多能够解释TSD机制的基础数据，本研究选取红耳龟第16期产雄温度（male-producingtemperature，MPT）和产雌温度（female-producingtemperature，FPT）性腺，采用IlluminaHiseq2500高通量平台进行转录组测序，筛选出雌雄差异表达基因474个，其中，MPT高表达基因283个，FPT高表达基因191个。通过与NR、Swiss-Prot、GO、COG、KOG、KEGG数据库进行比对，获得60个GO功能注释分类和139条KEGG代谢通路。根据差异表达基因的功能注释分析发现：参与红耳龟性别决定和分化的候选基因，包括Dmrt1、Sox9、Foxl2等高度保守的性别分化基因，Cyp11b1、Hsd11b2等类固醇激素代谢相关基因，以及Hspb6、Dnaja4、Serpinh1等热敏性蛋白编码基因。最后，通过荧光定量PCR和免疫荧光染色对部分候选基因进行了表达验证，与转录组结果相一致。本研究挖掘了一些新的温度响应因子和激素代谢相关因子，为破译红耳龟TSD分子机制提供了基础。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
朱新平 陈永乐 魏成清 刘毅辉 黄善衔 陈炎星
在自然温度、人工环境及人工饲养条件下 ,黄喉拟水龟可以自然产卵 ,产卵高峰期在 5～ 6月份。产卵时间有逐年集中并前移的趋势。饲养 2年半中 ,产卵次数、产卵量及受精率逐年提高 ,产卵量增长了134 % ,受精率提高了 7.8% ,产卵次数增加了 99%。产卵高峰期、受精率高峰期与日粮需求高峰期时间一致。环境的适应及饲料的质和量是决定繁殖力高低的主要因子。
关键词：
黄喉拟水龟 人工饲养 繁殖力
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈敏瑶 梁健宏 刘汉生 连常平 梁春彩
本文通过对黄喉拟水龟产卵的观察及利用细沙、泥沙、黄土三种介质进行龟卵孵化试验 ,表明黄喉拟水龟产卵时间集中于 5、 6月份 ,平均年产卵窝数为 2 0 5 ,受精率为 6 6 9% ,三种介质孵化天数 6 6～82d ,其平均孵化率分别为 2 5 34%、 6 5 34%、 78 6 6 % ,黄土在三种介质中为最优孵化介质。
关键词：
黄喉拟水龟 介质 孵化率
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
赵密 朱新平 史燕 高明英
以致病黏质沙雷氏菌人工感染的黄喉拟水龟肝组织为材料,应用SMART(switching mechanism at 5’end of RNA transcript)技术,构建了黄喉拟水龟的全长cDNA文库。首先用SMARTTM PCR cDNA systhesis kit合成全长的双链cDNA,通过琼脂糖凝胶分级分离技术切除小片段的cDNA,将大于500 bp的cDNA连接到pGEM-T载体中,电转化到J M109感受态细胞。在构建好的文库中,经测定,文库约含有1.8×105个重组子,重组效率达90%,插入片段多在0.5～3.0 kb之间。对库中长度约为1 000 bp的80个基因进行了测序,结...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
韦信贤 黎小正 童桂香 吴祥庆 庞燕飞
从发生慢性致死性传染病的黄喉拟水龟肝、肺分离到一革兰氏阴性的菌株,经人工感染实验证实其为该病的病原菌。对该菌进行生理生化指标检验分析,结果与报道的摩根氏菌一致。采用BIOLOG自动微生物鉴定系统对该菌进行鉴定,结果显示为摩氏摩根氏菌摩根氏亚种(Morganella morganii ss morganii),可能性(PROB)为99%,相似性(SIM)和位距(DIS)分别达0.742和3.90。纸片扩散法药敏试验结果表明该菌对先锋必高度敏感,对氧氟沙星、恩诺沙星、阿米卡星中度敏感,对大多数药物存在耐药性。综合对该病病原的形态观察、生理生化特征及微生物鉴定系统鉴定结果,确定该病原是摩根氏菌,并根...
[期刊] 水产学报
[作者]
郭捡红 赵伟华 魏成清 朱新平
自然温度下,分别以泥土、沙子和蛭石为孵化介质,研究了三种孵化介质对黄喉拟水龟(Mauremysmutica Cantor)卵的孵化期、孵化成功率和孵出幼体特征的影响。用泥土、沙子和蛭石作为孵化介质时,孵化期依次缩短,平均孵化期分别为61.2 d、60.9 d、59.4 d,差异显著(P<0.05);孵化期间,卵壳外层出现龟裂现象的卵所占比率分别为0、12.5%、40%;孵化成功率分别为40%、75%、90%。三种孵化介质条件下孵出的幼体的平均体重、体高、尾长和运动能力均无显著差异,而平均背甲长、背甲宽和平均腹甲长、腹甲宽差异显著,其中以蛭石作为孵化介质时孵出的幼体的腹甲宽和背甲宽最大,且运动能...
关键词：
黄喉拟水龟 孵化 介质 孵出幼体
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