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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王洪亮  仵均祥  王丙丽  
对不同滞育阶段麦红吸浆虫海藻糖酶和山梨醇脱氢酶的活性进行了测定。结果表明,麦红吸浆虫落土滞育前,其幼虫的海藻糖酶活性最高,入土后其活性迅速下降,到9月中旬活性开始上升,随后呈下降趋势,之后又迅速升高至滞育年周期中的最高水平;不同滞育阶段麦红吸浆虫从脱离麦穗到当年11月以前,一直未检测到山梨醇脱氢酶活性,翌年2~4月,山梨醇脱氢酶的活性急剧增加,至04-20达到整个滞育期间的最高值(0.504 2OD/(mL.m in));相同滞育阶段,裸露幼虫海藻糖酶活性和山梨醇脱氢酶活性较结茧幼虫略高,并表现出相同的变化趋势;不同滞育年限麦红吸浆虫海藻糖酶活性和山梨醇脱氢酶活性无明显差异。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 杨国婵  谢银鹏  马锋旺  梁东  邹养军  
【目的】研究6-磷酸山梨醇脱氢酶基因启动子(S6PDHP)的组织表达特点。【方法】利用Gateway技术构建了S6PDHP与GUS基因的融合表达载体,然后通过农杆菌介导法转化番茄"中蔬5号",对转基因植株进行PCR检测,对鉴定为阳性的植株进行GUS组织化学染色,验证S6PDHP的组织表达特性。【结果】将S6PDHP-GUS融合表达载体转化番茄,经PCR检测显示,成功获得了转S6PDHP基因的阳性番茄植株。对阳性植株各组织器官的GUS化学染色和活性检测结果显示,除叶片外许多器官都有很强的GUS活性,且在转基因番茄成熟期植株的茎部活性最高,根部活性最低;叶片从新叶到老叶的各个时期,GUS活性持续降...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 梁东  吴钐  王素芳  马锋旺  
【目的】进一步探明苹果中山梨醇脱氢酶(sorbitol dehydrogenase,SDH;EC 1.1.1.14)基因家族的分子特性。【方法】从‘嘎拉’苹果中克隆SDH基因家族全长cDNA序列和gDNA序列,检测它们在叶片和果实不同生长时期的表达模式。【结果】获得了12个苹果SDH基因家族cDNA序列,依次命名为MdSDH7—MdSDH18。除MdSDH18基因的全长gDNA序列由6个外显子和5个内含子组成,其余基因的全长gDNA序列由2个外显子和1个内含子组成。根据氨基酸序列相似性可以将这些SDH基因分为A和B两类。所有SDH基因在果实不同生长期均有表达,且中后期表达高于初期,但果实初期的...
[期刊] 林业科学  [作者] 杨爱珍  张志毅  孟海玲  王一鸣  李楠  关伟  王有年  
The sorbitol,fructose and glucose contents and the changes in activities of sorbitol oxidase (SOX),sorbitol dehydrogenase (SDH),which are the enzymes participated in sorbitol metabolism,were investigated respectively in the endocarp,mesocarp,leaf and phloem during the development of fruits of 'Jingy...
[期刊] 林业科学  [作者] 汪志辉  熊碧玲  刘燕  赵瑾  范娜娜  蒋黎黎  
以鲜黄梨为试材,应用WinsCanopy2005a冠层分析仪和光合测定仪对平棚形、V字形和疏散分层形3种树形的冠层结构特点和光合能力进行比较,测定果实发育过程中糖分含量及山梨醇转化酶活性,研究树形对果实中糖分积累及山梨醇转化相关酶活性的影响。结果表明:平棚形冠层开度和冠下直射、散射及总光合光量子通量密度显著高于其他2种树形,其透光性最好,光合能力最强。果实中可溶性总糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、山梨醇的含量及山梨醇转化酶活性均以平棚形最高,V字形次之,疏散分层形最低且差异显著。果实在发育前期均以积累山梨醇和淀粉为主,后期以积累果糖为主;山梨醇脱氢酶和山梨醇氧化酶在果实发育早中期活性逐渐增加,后期二者...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 梁银娜  李宝  
以磨盘柿(Diospyros kakiThunb.)果皮为试材,提取乙醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase)并进行纯化。经过30%~70%硫酸铵沉淀分离、Sephadex G-25脱盐柱脱盐、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析纯化后,研究温度、pH、金属离子、底物对乙醇脱氢酶活性的影响。结果表明,纯化后乙醇脱氢酶纯化倍数为41.80倍,活性回收率为44.73%。将乙醇脱氢酶酶液分别置于20、30、40、45、50、55和60℃温育后测定,其最适反应温度为45℃;在pH 5.0、7.0、8.0、9.0、10.0和11.0下乙醇脱氢酶的最适pH为10.0;...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 周燕  杨习文  周苏玫  王言景  杨蕊  徐凤丹  梅晶晶  申冠宇  李秋杰  贺德先  
【目的】在黄淮平原典型农田氮肥减施条件下,探索决定小麦根系活力的关键脱氢酶种类及酶活性变化及其对籽粒产量的影响。【方法】采用大田试验方式,运用裂区设计,主处理为施氮量,设0(N0),135(N1),157.5(N2),180(N3),202.5(N4),225(N5)kg·hm~(-2) 6个施氮水平,副处理为半冬性品种矮抗58和周麦27号。对小麦越冬期、返青期、拔节期、挑旗抽穗期、灌浆期和蜡熟期根中异柠檬酸脱氢酶(NADP-ICDH)、NADP-苹果酸酶(NADP-ME)、戊糖磷酸途径总脱氢酶(G6PDH+6PGDH)活性与根系活力(改良TTC法)和产量间的关系进行分析。【结果】小麦关键生育时期根系活力呈"高-低-高-低"变化,NADP-ICDH,NADP-ME和(G6PDH+6PGDH)活性变化均表现为先上升后下降的趋势,灌浆后活性变化不明显。越冬前后,不同施氮处理间根中NADP-脱氢酶系统关键酶活性表现为不施氮处理(N0)大于施氮处理(N1—N5);拔节—抽穗期,NADP-脱氢酶系统关键酶活性和根系活力均表现为施氮处理(N1—N5)显著高于不施氮(N0)处理,随着施氮水平逐步降低不同酶活性随之降低,与N5处理相比,N4处理NADP-ICDH和NADP-ME的活性未达显著水平,同时(G6PDH+6PGDH)活性和根系活力降幅最少。施氮量显著影响小麦籽粒产量及其构成因素,与不施氮处理(N0)相比,施氮处理(N1—N5)下的单位面积成穗数、穗粒数显著提高。综合两年度产量平均值可知,N5处理下籽粒产量最高,达9 238.02 kg·hm~(-2),N4处理次之,较N5处理仅下降0.3%且差异未达显著水平。进一步分析表明,不同生育时期根中NADP-ICDH、NADP-ME与(G6PDH+6PGDH)三者之间呈显著或极显著正相关关系;NADP-脱氢酶系统关键酶活性与根系活力呈正相关关系,其中生育中、后期达显著或极显著水平;根系活力及NADP-ICDH,NADP-ME和(G6PDH+6PGDH)活性与产量呈显著或极显著正相关关系。通径分析表明,两年度NADP-ICDH,NADP-ME和(G6PDH+6PGDH)活性在拔节期和挑旗抽穗期对产量有较大的正向作用;挑旗抽穗期根系活力对产量的直接作用较小,但其通过NADP-ME和戊糖磷酸途径总脱氢酶(G6PDH+6PGDH)活性对产量所产生的间接正向作用较大,因而根系活力对产量的影响达极显著水平。【结论】本试验条件下,综合考虑NADP-脱氢酶系统关键酶活性和根系活力变化及籽粒产量表现,黄淮平原麦田施氮水平由N5减至N4水平当是最佳选择。NADP-ICDH,NADP-ME和(G6PDH+6PGDH)活性与采用改良TTC法测定的"根系活力"密切相关,其中NADP-ME和(G6PDH+6PGDH)活性对根系活力影响最大,实践中可通过分子育种手段和有效栽培措施实现NADP-ME和(G6PDH+6PGDH)在根中的高表达以提高小麦根系活力。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 钟国华  胡美英  林进添  周利娟  
闹羊花素 Ⅲ (Rhodojaponin Ⅲ ,简称R Ⅲ )能显著降低 5龄菜青虫血淋巴和肌肉海藻糖含量。R Ⅲ以每虫 1~ 10 μg处理试虫后 6 0h ,血淋巴海藻糖酶活性明显受抑制。R Ⅲ对肌肉海藻糖酶活性的影响依剂量不同而异。处理后 6 0h内 ,10 μg处理时无明显影响 ,3~ 5 μg处理则有可逆性激活作用 ,1μg处理则在 6 0h内保持激活作用
[期刊] 中国农业科学  [作者] 姜姗  李帅  张彬  李洪刚  万方浩  郑长英  
【目的】西花蓟马(Frankliniella occidentalis)是中国的重要外来入侵和检疫性害虫,对各地的蔬菜和花卉造成了巨大的经济损失。明确极端高温(45℃)对西花蓟马存活率、繁殖力以及体内海藻糖、山梨醇含量的影响,为西花蓟马的防治提供理论依据。【方法】设置45℃条件下高温热激西花蓟马当代成虫、2龄若虫2h,经过24 h变温模式22℃(4 h)-25℃(8 h)-28℃(4 h)-25℃(8 h)培养后再进行一次45℃2 h的热激处理。研究热激处理后其亲代、F_1代和F_2代的种群参数(亲代各虫态存活率、雌成虫寿命,F_1和F_2代种群数量、存活率、性比)以及2龄若虫和成虫体内海藻糖...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 任珊珊  赵艳玲  白华  蒋湘宁  盖颖  
应用生物信息学方法从杨树基因组数据库中筛选出19个杨树肉桂醇脱氢酶基因,它们聚为3类。序列分析表明,杨树CAD基因家族主要通过全基因组加倍和串联复制的方式进行扩张。杨树和拟南芥CAD家族共6对旁系同源基因,在较强的净化选择压力下进化。19个基因在杨树不同组织中均有表达,表达量较高的是PoptrCAD17、PoptrCAD4、PoptrCAD10和PoptrCAD7,其他基因表达相对较少,相同亚类的CAD基因表达变化趋势接近。从毛白杨中克隆得到PoptrCAD4,体外表达的CAD4酶催化活性很强,具有明显的松柏醇底物偏好。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 马鑫  高卉  张俊会  薛泉宏  
【目的】探究酶液制备及测定条件对真菌粗酶制剂脱氢酶活性的影响,确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定方法。【方法】采用氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法测定真菌粗酶制剂的脱氢酶活性,分析粗酶制剂与去离子水质量比、活化时间、活化温度、振荡速率、搅拌时间、固液分离方法、活化剂种类、过滤介质及显色时间对脱氢酶活性的影响。【结果】①真菌粗酶制剂活化、分离方式及显色时间对真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定有明显影响。②确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定优化方法为:将粗酶制剂与去离子水按照质量比1∶40装入三角瓶,在28 ℃、120 r/min恒温摇床中振荡15 h,用快速滤纸过滤获得酶液;将酶液与TTC葡萄糖溶液混匀,在40...
[期刊] 华北农学报  [作者] 张涛  陈建武  何力  
为了了解尖裸鲤的生化遗传特性,丰富尖裸鲤种质资源研究的内容,通过配制不连续浓度聚丙烯酰胺凝胶,采用聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对尖裸鲤5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)进行了电泳。结果表明:所测样本鱼心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中的LDH酶带数分别为:12~16条,17~18条,6~13条,6~10条和12~17条; MDH酶带数分别为3条,4条,3~5条,2条和4~7条。LDH在尖裸鲤厌氧器官(骨骼肌和肝脏)中表达的酶带数总体少于非厌氧器官(心脏和肾脏)。尖裸鲤的MDH分为上清液型(s-MDH)和线粒体型(mMDH)。尖裸鲤的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性,尖裸鲤相对较多的LDH酶带数可能与其独特的栖息环境和A亚基与B亚基的变异共同作用有关。本研究可从生化遗传角度为尖裸鲤的资源保护和利用提供一定理论依据。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘晓健  孙亚文  崔淼  马恩波  张建珍  
【目的】海藻糖酶(trehalase)可专一性地将一分子海藻糖水解成为两分子葡萄糖,在昆虫能量代谢和几丁质合成过程中发挥重要作用,因此,海藻糖酶已成为害虫控制的潜在靶标。本研究以重要农业害虫飞蝗(locusta migratoria)为材料,探讨海藻糖酶基因的分子特性及生理功能,为飞蝗的有效治理提供理论依据。【方法】通过搜索飞蝗转录组和基因组数据库,获得4个海藻糖酶基因cDNa全长序列,运用blast、tmhmm和sigNalP等相关软件分析其序列特征;利用clustalW进行海藻糖酶全长氨基酸序列比对,mega7构建海藻糖酶的系统进化树;运用reverse traNscriPtioN-qua...
[期刊] 华北农学报  [作者] 倪志勇  李波  吕萌  王娟  白岩  范玲  
肉桂醇脱氢酶(CAD)是木质素生物合成过程中的一个关键酶类。根据棉花纤维特异表达cDNA文库分析得到的肉桂醇脱氢酶基因EST序列设计引物,采用RT-PCR技术从棉花中克隆了一个CAD基因,命名为GhCAD5(GenBank登录号为FJ848868)。研究结果表明:GhCAD5全长1488bp,具有一个1068bp的开放阅读框,5′非编码区为140bp,3′非编码区为280bp,编码355个氨基酸,预测分子量约为38.403kDa,等电点为7.67。氨基酸同源性分析发现,GhCAD5与拟南芥AtCAD1和水稻OsCAD4的同源性较高。利用PCR方法克隆了GhCAD5基因的基因组序列,长度为169...
[期刊] 水产学报  [作者] 吴婷婷  张燕生  薛国雄  夏德全  
哺乳类动物各种组织和器官的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶较稳定,酶带分布非常有规律,同源组织的LDH同工酶酶谱通常相似和稳定。鱼类LDH同工酶复杂得多,有三分之二品种中,其LDH同工酶类似哺乳类动物的酶谱;但在其余三分之一种类中,两个亚基随机结合受到限制,出现了不规则酶谱,有的只有2—3条酶带,有的超过5条酶带。即使具有5条酶带的鱼中,其骨骼肌和心肌LDH在电泳酶谱上迁移快慢正好与哺乳类动物相反。此外鱼类C基因产物并不特定在某一组织或器官中,一些鱼的
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