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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李冰  李梁  王露露  董思敏  黄宝亮  张晶  
【目的】对鹿茸胶原多肽进行复合酶水解,优化水解工艺,并测定水解液分子量分布。【方法】以碱性蛋白酶和胰蛋白酶为供试酶类,选用酶解时间、pH值、酶解温度、加酶量为影响因素,采用响应面试验设计优化单酶水解条件,根据响应面试验所得到的单酶水解的最适条件,确定双酶复合水解方案。通过SepHadex G25测定鹿茸胶原多肽的分子量分布。【结果】碱性蛋白酶最优水解条件为:酶解时间3.6H,pH值10.50,酶解温度55℃,加酶量4%,水解液的水解度为22.03%;胰蛋白酶最优水解条件为:酶解时间3.2H,pH值8.00,酶解温度50℃,加酶量4.4%,水解液的水解度为15.81%。复合酶水解条件:酶解温度为...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 卫功庆  刘少华  范宁  李梁  赵岩  张连学  
【目的】采用响应曲面法对鹿角盘胶原蛋白酶解提取工艺进行优化。【方法】以马鹿鹿角盘为原料,胶原蛋白提取率为指标,选取料液比、pH值、加酶量、酶解温度、酶解时间5个因素进行单因素试验,确定各因素的最优提取条件。在单因素试验的基础上,选取pH值、加酶量、酶解温度、酶解时间为影响因素,进行4因素3水平的Box-Behnken试验设计,采用响应曲面法分析4个因素对胶原蛋白提取率的影响。【结果】单因素试验结果表明:料液比1∶20、pH值1.8、加酶量4%、酶解温度37℃、酶解时间为6h时胶原蛋白提取率最高。响应曲面法得到的最佳提取工艺为:pH 1.77、加酶量3.94%、酶解温度36.78℃、酶解时间5....
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 申锋  杨莉莉  熊善柏  赵思明  
以草鱼鱼鳞为材料,研究蛋白酶种类、酶解条件对鱼鳞酶水解的水解度、氮收率和凝胶强度的影响,并采用正交试验对鱼鳞胶原肽制备工艺进行优化,以获得较高凝胶强度的鱼鳞胶原肽。结果表明:在胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶4种蛋白酶中,采用胃蛋白酶水解鱼鳞胶原蛋白时氮收率较高,且水解产物具有凝胶形成能力;酶解条件对鱼鳞胶原蛋白的水解度、氮收率和凝胶强度均有显著影响;胃蛋白酶在底物质量分数为5%、起始pH值为4.0、加酶量为140 U/g、水解温度为65℃条件下,水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的凝胶强度和氮收率都较好,其中水解度为1.46%、氮收率为64.38%、凝胶强度为2 051 g。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 洪惠  罗永康  吕元萌  刘栋  尤娟  
以鲽鱼骨为原料,采用酶法制备鲽鱼骨胶原多肽螯合钙,优化鲽鱼骨胶原多肽螯合钙合成工艺参数。分析pH与酶解时间对鲽鱼骨胶原多肽功能特性的影响,在单因素试验的基础上采用正交试验,以螯合率为指标,研究多肽液与骨粉酸解液体积比、pH、反应温度和反应时间对骨胶原多肽与鲽鱼骨粉酸解液螯合反应的影响。结果表明:采用碱性蛋白酶为酶制剂,pH为8,温度60℃条件下酶解1h所得的骨胶原多肽具有良好的溶解性、热稳定性和乳化性。采用体积比为3∶1的多肽液与骨粉酸解液为螯合反应液,pH 8,反应温度40℃,螯合40min得到的产品螯合率最高,为98.64%。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 李莉  顾赛麒  王锡昌  刘源  高榕  
为了优化人工养殖大鲵(Andrias davidianus Blanchard)皮中胶原蛋白的提取工艺,以加酶量、液料比和酶解时间为试验因素,胶原蛋白提取率为响应值,采用Box-Behnken设计进行试验。通过响应面法考察了3个因素对胶原蛋白提取率的影响,建立了胶原蛋白提取率的二次多项式回归模型,并对提取工艺进行了优化。试验结果表明,3个因素对鲵皮中胶原蛋白提取率的影响大小次序为:液料比>酶解时间>加酶量;交互项中"液料比-酶解时间"项对提取率影响显著,其他交互项对提取率影响不显著。为满足实际需要,对模型预测得到的大鲵皮胶原蛋白最优提取工艺稍做调整,具体参数为:加酶量16.5%、液料比15 m...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 付彩霞  赵思明  熊善柏  
以静脉采集的抗凝梅花鹿血为材料,考察了蛋白酶种类、酶解条件对鹿血中血红蛋白水解度、氮收率和血红素含量的影响,优化了碱性蛋白酶(Alcalase)和风味蛋白酶(Flavorzyme)的分步酶解工艺,以获得具有良好感官品质和富含血红素的鹿血酶解产品。结果表明:蛋白酶种类和酶解方式对鹿血血红蛋白水解效果有明显影响,采用Alcalase和Flavorzyme分步水解的效果最好。Alcalase和Flavorzyme的最适酶解温度分别为55℃和50℃,最适酶解起始pH值分别为8.0和6.5,2种酶的适宜底物浓度为8%(m/m),适宜加酶量为6 000U/g。采用分步酶解工艺时,在底物浓度8%、酶解温度5...
[期刊] 水产学报  [作者] 宋永相  孙谧  王海英  王跃军  李伟  袁翠  
以富含胶原的海产品下脚料为原料,用海洋碱性蛋白酶894水解,得到具有清除羟自由基活性的酶解液。采用一次正交回归实验设计及结果分析,建立回归方程,研究了活性炭、β-环糊精、酵母三者用量及温度、pH和作用时间6因子及其可能存在交互作用的变化关系对该酶解液综合脱色脱腥效果的影响。结果表明,在给定取值范围内,pH对综合脱色脱腥效果影响高度显著,酵母添加量、pH与酵母添加量的交互作用影响显著,其它因子及其可能的交互作用影响不显著,得最佳工艺为:温度37℃、pH4.0、活性炭0.8%、β-环糊精和酵母分别为0.1%,作用30min。此时,综合脱色脱腥效果值为90.90,蛋白回收率为98.02%,羟自由基清...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 王茵  黄煜  许永安  吴成业  
以罗非鱼Tilapia mossambica鱼鳞为原料,经低温酶解提取鱼鳞Ⅰ型胶原,将鱼鳞Ⅰ型胶原与壳聚糖进行混合交联,冻干后制成胶原-壳聚糖止血海绵。以止血海绵的密度、吸水倍数、保水率、透气率和止血时间为指标,通过单因素实验和正交试验优化获得最佳的制备工艺:胶原与壳聚糖配比7∶3、制备液总浓度1.4%、交联剂添加量0.015%。在该最佳工艺下制备的止血海绵密度为22.95mg/cm3、吸水倍数为45.34、保水率为55.83%、透气率为46.36%、止血时间为68.0s,呈蜂窝状多孔结构,具有优良的持水性和透气性。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 卢黄华  李雨哲  刘友明  熊善柏  
以酸-酶法提取的草鱼鱼鳞胶原蛋白为材料,采用倾注法制备胶原蛋白膜,研究成膜条件、多糖等对鱼鳞胶原蛋白膜(fish scale collagen film,FCF)特性的影响,考察鱼鳞胶原蛋白膜制备条件。结果表明:成膜条件、多糖等对鱼鳞胶原蛋白膜特性有显著影响,适宜的制备工艺条件为成膜温度45℃p、H 5、胶原蛋白与壳聚糖配比6∶4,该条件下胶原蛋白膜的抗张强度为61.27 MPa,断裂伸长率为5.17%。
[期刊] 水产学报  [作者] 杨勤子   陈丽丽   张照森   吴思雨   汪冰涛   赵利  
为提高鳙鱼骨的高值化利用,实验以鳙鱼头骨粉为原料,胶原多肽得率为指标,筛选最佳水解蛋白酶,进行鳙鱼头骨胶原多肽的工艺优化,并对骨胶原多肽的氨基酸组成、相对分子质量、粒径、电位、显微结构等理化性质进行分析。结果显示,胰蛋白酶为最佳水解酶,骨胶原多肽的最佳酶解工艺为:初始pH 8,酶添加量2.5%,酶解时间5 h,酶解温度50°C,料液比1∶10 (g/mL),胶原多肽得率为52.19%。骨胶原多肽水解后含有17种氨基酸,总含量为76.15 g/100 g,其中酸性氨基酸含量较高。鳙鱼头骨胶原多肽相对分子质量主要在5 000 u以下,占比高达97.81%,表明主要为小分子肽,其平均Z-粒径为(399.90±2.70) nm,多分散指数(PDI)为0.40±0.01,表明物质分布较均匀,并且骨胶原多肽粒子表面呈负电荷状态,具有疏松多孔的结构。研究表明,鳙鱼头骨胶原多肽营养物质较丰富,其小分子肽易于人体吸收,疏松多孔的结构也有利于肽钙螯合物的制备。本研究不仅为鳙鱼骨类产品的精深加工提供理论依据,也为新型钙制剂的制备提供优良原料。
[期刊] 水产学报  [作者] 麻金花  翁凌  颜龙杰  张凌晶  刘光明  曹敏杰  
针对海参自溶现象,研究海参内脏中与胶原降解相关蛋白酶的存在情况,以期了解内源性蛋白酶在海参自溶过程中发挥的作用,为解明自溶的内在机理提供理论依据。通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤柱层析、Phenyl Sepharose FF疏水柱层析及M ini Q离子交换柱层析等方法,从海参内脏中分离纯化出降解明胶的蛋白酶。利用荧光底物研究其酶学性质及其对海参体壁胶原蛋白的降解情况。结果表明,该酶最适温度为30℃,最适p H为7.5,可被金属蛋白酶抑制剂EDTA、EGTA完全抑制,亦可被PM SF、Pefabloc SC等丝氨酸蛋白酶抑制剂...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 于修烛  张莉  杜双奎  李志西  魏宗萍  
为了确定复合酶法提取苹果籽油的工艺条件,以秦冠苹果籽为原料,通过单因素试验和正交试验,对其工艺条件进行了优化。结果表明,复合酶法提取苹果籽油的优化工艺条件为:苹果籽破碎度≤0.6 mm,料液比1∶8,复合酶添加量0.8%(纤维素酶与酸性蛋白酶质量比1∶1),酶处理时间8 h,pH值4.6,常压蒸汽处理20 min,在该提取工艺条件下苹果籽出油率高达21.44%。与溶剂浸出法相比,复合酶法具有出油率高和油品质好等特点。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 李晓敏  杨晨宇  邓云  陶宁萍  李立  邱伟强  金银哲  
利用响应面法对日本鳗鱼皮胶原蛋白的提取工艺进行优化,并对其理化性质和致敏性进行研究。采用酸酶浸提法提取鱼皮胶原蛋白,基于单因素试验,以料液比、提取液浓度和提取时间作为考察因素,以胶原蛋白得率为指标,得到最佳提取工艺为:料液比1:30 g/mL,提取液浓度0.6 mol/L,提取时间48 h,胶原蛋白得率为32.89%。将优化后得到胶原蛋白进行理化性质表征分析,SDS-PAGE结果表明,胶原蛋白含有五个条带,属于Ⅰ型胶原蛋白;必需氨基酸和药用氨基酸占比分别为19.61%和11.04%;傅里叶红外光谱(FTIR)光谱显示其保留了完整的三螺旋结构;在230 nm处有最大的紫外吸收峰;由扫描电镜(SEM)显示胶原蛋白的微观结构呈现出纤维状结构;胶原蛋白的热转变温度和热变性温度分别为38.5 ℃和28.3 ℃;酶联免疫吸附反应(ELISA)和模拟胃肠液实验可知胶原蛋白具有一定的致敏原性,为鳗鱼皮胶原蛋白的进一步研究提供理论基础。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 张国权  史一一  魏益民  罗勤贵  杜双奎  秦清翠  
为探索荞麦淀粉酶水解特性及工艺条件,试验采用中温α-淀粉酶、真菌α-淀粉酶及其不同组合对荞麦淀粉进行水解,并在水解温度、pH、底物浓度及酶用量等单因素试验的基础上进行了二次回归正交旋转试验,确定了荞麦淀粉酶解工艺条件。结果表明,真菌α-淀粉酶适用于荞麦淀粉水解,其淀粉转化率和DE值均较高;各因素对真菌α-淀粉酶水解荞麦淀粉影响程度大小依次为pH>水解温度>酶用量>底物浓度;真菌α-淀粉酶水解荞麦淀粉的适宜工艺条件为:水解温度54℃,pH 6.0,底物浓度50 g/L,酶用量100~130 U/g,水解时间为75 m in,在此工艺条件下荞麦淀粉酶水解度为66.05%。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 张国权  丰凡  高梅  魏益民  杨康  唐菊  
为确定木瓜蛋白酶水解荞麦蛋白的最佳工艺条件,以水解度(DH)为指标,系统分析了pH、温度、酶用量、时间、底物浓度等5个因素对木瓜蛋白酶水解荞麦蛋白的影响,并在此基础上进行了二次回归正交旋转试验(4因素全面试验),建立了木瓜蛋白酶水解荞麦蛋白的数学模型。结果表明,木瓜蛋白酶在底物浓度80 g/L、温度45℃、酶用量20 000 U/g、pH值7.0、反应时间为3 h时,荞麦蛋白的水解度可达14.38%。各因素对荞麦蛋白水解的影响顺序依次为:温度>pH值>酶用量>底物浓度。
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