- 年份
- 2024(1437)
- 2023(1972)
- 2022(1731)
- 2021(1721)
- 2020(1459)
- 2019(3167)
- 2018(3307)
- 2017(5615)
- 2016(3653)
- 2015(4293)
- 2014(4332)
- 2013(4256)
- 2012(4352)
- 2011(3868)
- 2010(3974)
- 2009(3779)
- 2008(4149)
- 2007(3985)
- 2006(3578)
- 2005(3203)
- 学科
- 济(11179)
- 经济(11155)
- 管理(9465)
- 业(8080)
- 企(6999)
- 企业(6999)
- 学(6034)
- 方法(4569)
- 财(3486)
- 中国(3366)
- 数学(3356)
- 农(3299)
- 数学方法(3199)
- 制(3014)
- 理论(2855)
- 业经(2341)
- 教育(2291)
- 贸(2289)
- 贸易(2284)
- 务(2258)
- 银(2258)
- 财务(2250)
- 银行(2245)
- 财务管理(2240)
- 易(2222)
- 和(2176)
- 企业财务(2116)
- 体(2105)
- 融(2099)
- 金融(2099)
- 机构
- 大学(56753)
- 学院(55220)
- 研究(22336)
- 科学(17685)
- 中国(16805)
- 农(16723)
- 济(15649)
- 经济(15114)
- 管理(15087)
- 农业(13589)
- 所(13540)
- 京(13481)
- 理学(12495)
- 研究所(12338)
- 理学院(12243)
- 业大(12015)
- 管理学(11607)
- 管理学院(11530)
- 中心(10218)
- 江(9973)
- 省(8934)
- 室(8795)
- 农业大学(8792)
- 技术(8575)
- 北京(8353)
- 范(8296)
- 财(8290)
- 师范(8069)
- 实验(7867)
- 院(7741)
共检索到91870条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
卿素珠 杨延平
运用免疫组织化学超敏SP法对鸡不同生长阶段法氏囊中血管活性肠肽(VasoactiveIntestinal Peptide,VIP)的表达特点进行了研究。结果显示,法氏囊中VIP的表达范围广泛,涉及黏膜、黏膜下层和肌层,尤以黏膜上皮细胞和法氏囊小结髓质的表达为典型;随着日龄增加,黏膜上皮细胞VIP表达逐渐减弱,囊小结髓质一直保持较强的VIP阳性着色,囊小结皮髓质交界处上皮细胞层内VIP强阳性细胞有逐渐增多的趋势。鸡法氏囊中VIP阳性反应物质的广泛分布,提示法氏囊是神经系统以外产生VIP的又一个重要部位,法氏囊中的VIP可参与鸡免疫器官的功能调节,可作为一种信号分子介导神经内分泌系统和免疫系统间的...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
卿素珠 姜河 安源 曹峰
为探讨鸡肠道组织中肽能神经支配的途径及其功能,运用免疫组织化学超敏SP法,对不同生长阶段鸡肠道中血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)的分布特点进行了研究。结果显示,肠壁中VIP的表达范围较为广泛,涉及黏膜上皮和固有层、肌层和外膜,尤以固有层和肌层最为典型;随着日龄增加,黏膜上皮间VIP阳性细胞数量逐渐增多;从肠道不同部位的分布来看,十二指肠中VIP的表达强于同时期其他部位,空肠中的表达次之,回肠和盲肠的表达相对较弱。黏膜固有层和肌层一直分布有染色较深的VIP阳性神经纤维,呈串珠状、细线状或膨体状。提示鸡肠道是产生VIP的又一个重要部位,肠道中的VI...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
郭锋 武琪 胡斌 王邦娟 赵子曼 贾梦岩 李哲 张艳红
[目的]探讨IBDV感染过程中凋亡相关基因启动子5-mC甲基化水平的变化,为揭示IBDV引起细胞凋亡的细胞内调节机制提供理论基础。[方法]采用21日龄母源性抗体检测为阴性的商品肉鸡,随机分为对照组(control)和病毒感染组(IBDV),病毒感染组肉鸡用IBDV CJ801毒液进行点眼滴鼻攻毒0.1 mL/只,对照组以同样方式给予PBS。IBDV感染后5 d收集法氏囊组织,采用HE染色观察法氏囊组织病理变化,采用qRT-PCR检测凋亡相关基因的表达,并应用MeDIP-PCR技术检测差异基因启动子的甲基化水平。[结果]与对照组相比,IBDV感染后5d肉鸡法氏囊出现明显的组织水肿,滤泡面积明显降低,滤泡中出现大量固缩细胞核。促凋亡基因Caspase-8和Caspase-3的表达极显著降低(P<0.01),抑制凋亡基因Bcl-2的表达极显著升高(P<0.01)。MeDIP-PCR发现,Caspase-3基因启动子的甲基化水平显著升高(P<0.05),而Bcl-2基因启动子的甲基化水平极显著降低(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王俊全 王韦华 刘桂梅
【目的】克隆鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)BJ-10株VP2基因,构建其原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行高效表达。【方法】根据IBDVVP2基因序列设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术克隆IBDV BJ-10株VP2基因;将目的基因插入pMD18-T连接载体,筛选出阳性重组质粒;将该质粒克隆至原核表达载体pET-32α中,转化入JM109,经IPTG诱导表达,对产物进行SDS-PAGE电泳分析,确定IPTG的最佳诱导表达时间和浓度。【结果】克隆到了全长1 356bp的IBDV BJ-10株VP2基因;PCR、酶切鉴定分析表明,成功构建了重组质粒pET-32α-VP2;SDS-PAGE电...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
缪德年 樊生超 姚惠娟 苏小运 陈溥言
应用薄层层析技术分析鸡法氏囊提取物的组分 ,并用体内和体外免疫试验测定其活性。实验结果表明 ,相对分子质量为 10 0 0以下的鸡法氏囊提取物中共有 9种成分的氨基酸或小肽 ,其中第 3组分与囊素标准品具有相同的迁移率(0 6 9)。适当浓度的囊素和法氏囊提取物均能促进杂交瘤细胞分泌抗体 ,与对照组相比差异显著 (P
关键词：
法氏囊提取物 组分 活性 薄层层析
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吴方丽 金伟波 王保莉
为了得到具有生物学活性的人表皮生长因子(hEGF),将含有人表皮生长因子基因的原核表达载体pGEX-4t-1(+)-hEGF转化入BL21-CodonPlusTM-RP表达宿主菌进行大量表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在。收集包涵体,用氧化复性的方法,加入还原型的谷胱甘肽进行复性,之后通过GlutathioneSepharoseTM4B纯化柱,分离纯化得到复性的融合蛋白。以兔抗人EGF单克隆抗体为一抗,进行Western blotting鉴定,证明分离纯化得到的融合蛋白含有目的蛋白hEGF。最后对复性的融合蛋白进行了活性分析,表明该融合蛋白具有良好的hEGF生物学活...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李荣荣 和祯泉 鲍恩东 陈溥言
【目的】研究鸡源重组抗菌肽Fowlicidin-3的生物学特性,并为重组抗菌肽在临床上的应用奠定基础。【方法】根据抗菌肽数据库中Fowlicidin-3的氨基酸序列,选用毕赤酵母的偏嗜密码子,设计抗菌肽的基因,通过SOE法合成得到全长为114bp的Fowlicidin-3基因。将Fowlicidin-3基因克隆入pPICZα-A质粒,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα-A-F。将线性化重组表达载体pPICZα-A-F通过电击法转入毕赤酵母宿主菌X-33中,构建分泌型重组酵母表达菌株。【结果】获得分泌型重组酵母表达菌株,Fowlicidin-3多肽表达量达到170mg·L-1,对致病性大肠杆...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
柳金雄 冯亚玫 张晖 陈秋生
应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增血管活性肠肽(VIP)基因片段,将其连接于pGM-T easy。分别利用pGM-T easy中T7和SP6启动子及其RNA聚合酶,以线性化的VIP/pGM-Teasy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针。通过原位杂交方法将合成的探针用于探查VIP-mRNA在鸡肠Remak神经(INR)中的分布情况。结果表明,INR的神经元胞体中有VIP-mRNA的转录,且这种神经元数量众多;原位杂交阳性神经元胞体大部分是大型神经元细胞,呈圆形或椭圆形;阳性神经元胞体在INR神经节中呈层状或成群分布。INR的神经纤维呈弱阳性。在节间束也有少量的阳性细胞分布。本研究从基因水平...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
蒋静 孙建和 陆苹
应用Long and Accurate—PCR(LA-PCR)技术,扩增克隆了鸡传染性法氏囊病病毒上海超强毒(wIB-DV)的VP2—4—3基因。应用粘性末端连接策略,将VP2-4-3基因克隆人真核表达载体pALTER-MAX。经酶切鉴定,表明VP2-4-3基因为正向插入,位于CMV启动子下游。该真核表达质粒在脂质体的介导下转染Vero细胞,经特异性抗IBDV抗体的免疫荧光检测,发现在细胞内有特异蛋白表达。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
俞英昉 王安如 张爽 宋路莎 韩德平 马海燕 张涛 滕可导
为建立传染性法氏囊病的动物模型,将法氏囊病病毒(IBDV)BC6/85毒株人工感染5周龄的SPF鸡,采用组织病理学和免疫组织化学的方法,用打分的形式研究攻毒后2～432h,感染鸡法氏囊中病毒的定位以及法氏囊组织病变和IBDV免疫反应阳性细胞的变化过程。结果显示感染鸡的法氏囊与法氏囊腔中都能检测出病毒和有病理损伤的现象,且IBDV检出的时间迟于损伤出现的时间。法氏囊小结中IBDV免疫反应阳性细胞密度和损伤程度的变化趋势有一定的规律性,表现出先协同增长后有所不同的变化趋势。并在感染后期发现感染鸡法氏囊中仍能检测出病毒且有少量新生的淋巴小结。通过详细记录鸡感染IBDV BC6/85后的整个病程,初步...
关键词：
鸡 法氏囊病病毒 HE染色 免疫组织化学
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘亚杰 花雯 蒋书东 崔培 宋爽 方富贵 李福宝
【目的】对青春期和休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中血管活性肠肽的分布与表达进行研究。【方法】采集青春期和休产期皖西白鹅的下丘脑和垂体,应用免疫组织化学PV-9000二步法并结合DAB显色技术,对血管活性肠肽的免疫反应阳性分布进行定位,并用Image-Pro Plus 6.0软件分析阳性区域的累积光密度值。【结果】血管活性肠肽免疫反应阳性细胞主要分布于青春期和休产期皖西白鹅下丘脑的弓状核、室旁核、内侧核、视上核、乳头体内侧核等处及腺垂体中;休产期皖西白鹅下丘脑和垂体中的血管活性肠肽的累积光密度值显著高于青春期。【结论】血管活性肠肽可能对皖西白鹅的休产状态有一定的调控作用。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
仇知光 刘庆慧 黄倢
选用对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)囊膜蛋白VP37的功能区段,利用大肠杆菌密码子偏爱性,在氨基酸不变的情况下将VP37中的密码子通过人工合成改为大肠杆菌偏爱型密码子,并克隆至表达载体pBAD/gIIIA中,构成重组载体pBAD/gIIIA-VP37p′。将重组载体转化入大肠杆菌Top10中,在相同条件下用L-阿拉伯糖与未优化的重组菌株Top10-pBAD/gIIIA-VP37p一同诱导。结果显示,与野生型基因VP37p相比,经密码子优化的VP37p′基因表达目的蛋白量占总蛋白的40.5%,明显高于野生型6.5%的目的蛋白表达量。
关键词：
偏爱密码子 VP37 大肠杆菌 表达
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黎相广 严会超 曾佩玲 张德祥 王修启
【目的】研究温氏土鸡(WYFC)和隐性白洛克(WRRC)鸡胚小肠酸性氨基酸转运载体EAAT2(SLC1A2)和EAAT3(SLC1A1)mRNA的表达差异和发育性变化。【方法】选取蛋重相近的两品种纯系种蛋各96枚,每个品种随机分为6组,每组16枚,在相同的条件下进行孵化。分别就每个品种在9(E9)、12(E12)、14(E14)、17(E17)和19胚龄(E19)及出壳当天(DOH)选取16枚鸡胚,称重后采集小肠样品,采用real-time RT-PCR方法检测小肠EAATs mRNA的相对表达丰度。【结果】(1)9、12、14、17和19胚龄隐性白洛克胚蛋重量及出壳当天雏鸡体重极显著高于温氏...
[期刊] 华北农学报
[作者]
黎相广 严会超 曾佩玲 束刚 张德祥 罗庆斌 王修启
为研究温氏土鸡和白洛克鸡胚小肠寡肽转运载体PepT1(Solute carrier family 15 member 1)以及Na+/H+交换载体NHE2(Solute carrier family 9 member 2)和NHE3(Solute carrier family 9 member 3)mRNA的表达规律,选取产蛋日龄相近的温氏土鸡和白洛克鸡所产种蛋各96枚,每个品种随机分为6组,每组16枚,在相同的条件下进行孵化。分别在9,12,14,17,19胚龄(E)和出壳当天(DOH),每个品种选取16枚鸡胚,采集小肠样品,采用Real-time RT-PCR方法检测小肠PepT1、NHE...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
葛金英 温志远 高宏雷 王永 胡森 鲍恩东 王笑梅 步志高
【目的】重组新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)作为新型的活病毒载体疫苗具有巨大的优势和应用前景,本研究旨在探讨新城疫病毒作为防制传染性法氏囊病超强毒(very virulent infectious bursal disease virus,vvIBDV)及新城疫重组二联活病毒载体疫苗的可行性。【方法】采用单股负链RNA病毒反向遗传操作技术,救获野生型NDV LaSota疫苗株rLaSota及表达vvIBDV Gx株VP2基因的重组疫苗株rLaSota-VP2,分别经滴鼻点眼途径免疫SPF雏鸡,免疫后21d分别以vvIBDVGx超强毒和新城疫强毒进行攻击。【结...
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
