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[期刊] 华北农学报
[作者]
姜北宇 刘月焕 郑世兰 景小冬 姚颖 白丽萍
用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76 V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒,分别接种鸡胚或鸭胚,制备各种病毒抗原液,经福尔马林灭活后,采用FILTRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩,然后按一定比例混合,以司本80及吐温80为乳化剂,10号白油为佐剂,制成ND-IB-EDS76-AE四联灭活疫苗。对四联苗各项技术指标进行了测定,证明本疫苗安全、无任何副作用;免疫10-14 d后产生免疫力;ND部分效检,攻毒100％保护,每羽份含ND效价达50-123 PD50;IB部分效检,免疫21-28 d后攻毒保护率达80％-100％,IB HI效价≥1:64;...
关键词：
鸡 四联疫苗 免疫 浓缩
[期刊] 华北农学报
[作者]
张安国 马衍忠 杨友民 左颖 邓云柱
以NDLaSota株 ,呼吸道型IB(RIB)H12 0 株或肾型IB(KIB)SN930 1株和EDSXN92 0 3株为制苗毒株 ,分别经鸡胚和鸭胚增殖后甲醛灭活。灭活毒液依毒价按比例混合加入油佐剂中 ,乳化制成“ND-RIB -EDS”和“ND -KIB -EDS两种三联油乳剂苗。测试结果表明 :三联疫苗安全性好 ,无毒副作用 ;乳化度、稳定性和通针性良好 ;免疫效果好 ,用三联苗免疫 2 0日龄鸡 ,免疫后 14、2 8、58d ,ND、RIB、KIB、EDS的HI抗体均可达 7 0和 9 2log 2以上。于免疫后 6 0d用相应强毒攻击 ,83 3%～10 0 %的鸡获有效保...
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘文惠 胡毓骥 曹春景 肖治军 赵金旺
通过近三年试验,研制出鸡传染性支气管炎毒株IB H_(120)细胞弱毒苗,经室内外近40万羽雏鸡免疫试验表明:该苗以每羽0.01ml滴鼻、点眼或口服免疫4～12日龄雏鸡,7d后产生免疫力;免疫后17d、32d、60d抗标准强毒攻击的免疫保护率分别为88.7%、87.5%、87.5%,免疫期可达二个月;其最小免疫量为0.001ml/羽;以10个免疫剂量接种雏鸡无任何不良反应,安全性能良好;-20℃保存半年、4℃保存一个月效力不变.
关键词：
鸡传染性支气管炎 鸡全胚细胞培养 疫苗
[期刊] 华北农学报
[作者]
苗得园 张培君 龚玉梅 冯文达 冯杉
应用 3批鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗进行了安全性和近期免疫效力检验 ,安全性试验采用 15只鸡进行 ,胸肌注射疫苗 4～ 5mL/只后 ,逐日观察 ,结果鸡只食欲、精神未见异常 ,2周后观察 ,注射部位未发现明显异常和病变。用该疫苗免疫 (0 5mL/只 )后的鸡只对A型高致病力菌株的攻击保护率可达 10 0 % ,对C型高致病力菌株的攻击保护率为 93 3%。采用B -ELISA和SPA对鸡群的抗体水平的评估表明该疫苗可激发产生较高的抗体水平
[期刊] 华北农学报
[作者]
邹立宏 翟含流 武现军 李玉荣 霍书英
从四川某鸡场疑似肾型传染性支气管炎病死鸡的肾脏中分离到一株病毒,经SPF鸡胚连续传代、血凝试验、鸡胚矮小化试验、鸡新城疫干扰试验、RT-PCR鉴定和动物回归试验,初步确定该病毒为传染性支气管炎病毒,并命名为SC0911株。
关键词：
肾型 传染性支气管炎 分离鉴定
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴延功 郑明球 蔡宝祥 陈薄言 吴增坚
用中国和澳大利亚分离的Ａ型魏氏梭菌培养液、Ⅰ型卵磷酯酶Ｃ和胰酶处理鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ），制备的血凝抗原能凝集鸡红细胞，为鸡传染性支气管炎的诊断提供了方法。对鸡传染性支气管炎Ｍ（４１）、Ｈ（１２０）、Ｈ（５２）、Ｇｒａｙ、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、Ｔ、ＧＩＢＶ等７个毒株进行了血凝性的比较，以Ｈ（１２０）毒株血凝价最高，其次是Ｍ（４１）、ＧＩＢＶ、Ｇｒａｙ，而Ｈ（５２）、Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ、Ｔ等毒株血凝性低或无血凝性。作者还对影响鸡传染性支气管炎病毒血凝试验的各种因素进行了研究。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李刚 郑明球 蔡宝祥 吴连清 唐敬东
减蛋综合征（ＥＤＳ）病毒南京毒株（ＮＥ４）在鸭胚中增殖后，用甲醛灭活，加入７号白油，制成ＥＤＳ油佐剂灭活疫苗，抗原量为每头份５０００血凝（ＨＡ）单位。经１２００万只鸡的试用表明，该苗能够有效地预防ＥＤＳ的发生。
关键词：
鸡 减蛋综合征(EDS) 灭活疫苗
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴增坚 丁承英 郭长明
从具有传染性支气管炎肾炎临床特征的病鸡体内,分离到一株病毒,该分离株通过鸡胚传代(6～8代),能引起半数以上的鸡胚卷缩,发育阻滞和死胚;鸡胚适应毒能在鸡胚肾细胞(CEK)培养中生长繁殖;产生细胞病变(CPE)的病毒在 CEK 培养中传5代以后,能形成融合细胞,具有较高的感染滴度。病毒粒子具有典型的冠状结构,核酸型为 RNA,有囊膜,对氯仿和乙醚敏感,经反复冻融后,毒力下降,而 pH 3和 pH 11,在56℃经30min即被灭活,无血凝发生。本分离株与 IB-M_41株有明显的抗原差别,但用它攻击经 H_52疫苗免疫的鸡,可获得部分保护。综合本分离株的特性,初步鉴定为肾病变型 IBV。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
陈昌英 王泽洲
用血凝试验（ＨＡ）来测定肾病变型传染性支气管炎地方毒株（ＩＢＶ—Ｌ）的半数感染量（ＥＩＤ＿（５０））。对ＩＢＶ的ＨＡ试验进行初步研究的结果表明，ＩＢＶ—Ｌ株未经胰酶处理不具有血凝性，经１％～２％胰酶处理２～３，小时具有凝集鸡红细胞的特性，且以０．７５％鸡红血球悬液凝集状态最佳，１％以上者血凝价明显降低，对于不同孔型微量反应板进行测定，以Ｕ型板凝集效果最好。在建立ＨＡ试验的基础上，作者利用ＨＡ试验和特征性病变两种方法分别测定ＩＢＶ—Ｌ的ＥＩＤ＿（５０），两种方法对比的结果相似。
[期刊] 华北农学报
[作者]
郑世兰 姜北宇 刘福致 景小冬 姚颖 李林 李艺娟
采用ＮＤＬａｓｏｔａ株为种毒，福尔马林为灭活剂，７号白油为佐剂，吐温８０、司本８０为乳化剂，硫柳汞为防腐剂，高压匀浆泵为乳化工具，研制出ＮＤ油性剂灭活疫苗。其剂型为双相型（Ｗ／Ｏ／Ｗ），呈稀薄乳状液，粒度为１μｍ左右，粘度≤１ｓ，通针性好。４～８℃有效保存期１年。效力≥７０ＰＤ５０，最早产生免疫时间为１２天（１００％保护），生产中常用免疫剂量为２月龄内每只０．５ｍｌ，２月龄以上每只１．０ｍｌ皮下注射，对各日龄鸡安全无副作用。与ＮＤ活毒疫苗同时免疫可使各日龄鸡产生高效价的ＨＩ抗体，雏鸡免疫期为２．５～３个月，成年鸡为１２个月。此苗可有效地预防强毒力嗜内脏型ＮＤ及“非典型”ＮＤ。
关键词：
新城疫(ND),灭活疫苗,油佐剂
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
焦铁军 李河林 张浩 李健强
检测了4批自制禽脑脊髓炎冻干活疫苗的安全性和最小免疫剂量,并对疫苗进行了病毒含量测定和攻毒保护试验。结果表明,鸡接种疫苗后精神、食欲及发育均正常,疫苗安全性良好;接种病毒剂量为500 E ID50时,可使免疫鸡产生可靠的免疫力,抵抗AEV VR株强毒的攻击,降低鸡群发病率,所以该疫苗的最小免疫剂量≤500 E ID50/羽。4批疫苗病毒含量均大于103.5E ID50/羽份,攻毒后保护率均在87.5%以上。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张玉杨 肖治军 王四保 郭成留 王治方 刘文惠 曹春景 李丽
以IBH120鸡胚毒适应成纤维细胞(CEF)单层,培养出IBH120细胞弱毒株。电镜观察,可见典型的冠状病毒粒子。IBH120细胞弱毒株经细菌、霉菌、支原体、鸡白血病病毒检测均为阴性,且具有IB病毒特异性。CEF单层接毒后48h左右病毒增殖达到高峰。随着细胞传代次数的增加,C4~C10代H120株细胞毒的毒价(TCID50)逐步增高而趋于稳定,C4~C10代细胞毒的TCID50稳定在107.35~8.0mL之间,而C5~C10代IBH120细胞毒的EID50呈下降趋势,变动范围在107.3~106.5mL。以103.5TCID50/只和104.5TCID50/只的剂量,C4,C8,C10代毒分...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴延功 郑明球 吴增坚 蔡宝祥 陈溥言
将６株鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分别接种鸡胚肾细胞（ＣＥＫＣ）和气管环培养（ＴＯＣ）。６株病毒无论是否已经适应于鸡胚，都在气管环培养中能引起病变。病毒适应于ＣＥＫＣ，是与病毒在鸡胚和细胞培养上的传代次数有关。分别用ＳＰＦ鸡胚、非免疫鸡胚和普通鸡胚制备的ＴＯＣ测定ＩＢＶ－Ｍ４１株的ＩＤ５０，结果用ＳＰＦ鸡胚和非免疫鸡胚制备的ＴＯＣ测定的ＩＤ５０都获得较高滴度，而在普通鸡胚制备的ＴＯＣ中ＩＤ５０明显低。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张淑霞 贺秀媛 崔保安 王建华
鸡传染性支气管炎病毒HN99株核蛋白(N)基因PCR产物经BamHⅠ、HindⅢ双酶切,克隆入大肠杆菌原核表达载体pMAL-p2X,构建重组表达质粒pMAL-p2X-N,转化大肠杆菌TB1并进行诱导表达。通过pMALTM融合蛋白纯化系统对表达产物进行非变性纯化,将纯化的N蛋白按常规方法免疫新西兰大白兔,制备兔抗鸡传染性支气管炎病毒N蛋白的多克隆抗体,并用ELISA法检测其生物活性。结果表明,表达的重组核蛋门纯化后出现2条带,相对分子质量分别约为92和82 ku,与Western blot出现的2条蛋白带一致;纯化的重组蛋白经裂解因子作用后,出现2条蛋白带,相对分子质量分别为45和35 ku,与...
关键词：
鸡传染性支气管炎病毒 N基因 免疫活性
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙涛 王欣 陆苹
根据已报道的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)基因序列设计了 1对可用于扩增不同病毒株N基因片段的引物 ,得到了预期的 438bp长的产物 ,并将此RT PCR方法与鸡胚盲传法结合用于分离、检测IBV。分离病毒的扩增条带经纯化和回收以后 ,克隆到pMD18 T质粒载体中。在对插入片段进行序列测定后 ,我们将测序结果与已发表的IBVN基因序列进行了比较 ,证实具有极高的同源性 ,表明分离的是IBV。据此建立起一种更加快速、有效的分离、鉴定IBV的方法。
关键词：
IBV N基因 RT-PCR
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