用免疫金 银法 (IGSS)和免疫胶体金细胞化学方法 ,对人工感染的大肝和大脾 (BLS)病鸡免疫器官作BLS抗原(BLSAg)定位、分布及其动态研究。结果感染后第 1,7,19周 ,在脾脏、盲肠扁桃体、胸腺、法氏囊、红骨髓和哈德尔氏腺组织中均检查到BLSAg ,主要分布在淋巴细胞、网状细胞、网状上皮细胞、巨噬细胞、单核细胞、浆细胞的胞浆、内质网、线粒体和一些空泡内。BLSAg阳性淋巴细胞早期主要分布在胸腺和外周免疫器官的T 淋巴细胞区 ,第 7周在胸腺、法氏囊和外周免疫器官的T、B淋巴细胞区。结果初步表明BLS病毒定位于胞浆。机体在抗BLS病毒方面 ,早期以体液免疫为主 ,而中期的体液免疫...

对自然感染和人工感染的大肝和大脾病鸡进行了超微结构的研究。根据超微结构的变化，肝和脾是本病的靶器官，有时胰也受到损害。主要特征性变化是：肝和脾细胞的核周间隙增加，核染色质边移，线粒体浓缩，内质网扩张和空泡化，有时细胞器消失。在自然病例和接种后４周病鸡的肝和脾细胞的内质网池和胞浆中均见有大量病毒颗粒，间质有大量浆细胞、淋巴细胞和巨噬细胞增生。

为了明确猪在免疫旋毛虫抗原和感染旋毛虫肌幼虫后的抗体应答反应,应用 ELISA 法,肌幼虫凝胶层析纯化抗原、新生幼虫和成虫可溶性抗原,对用肌幼虫可溶性抗原、肌幼虫 ES 抗原、成虫可溶性抗原、成虫 ES 抗原、灭活新生幼虫抗原制备的免疫原免疫后猪血清抗体以及攻击感染后的猪血清抗体进行了检测。用肌幼虫纯化抗原检测时,感染猪在感染后7d 抗体即出现变化,第14～21d 时上升较快,第28d 达最高值,抗体可持续6个月以上;各免疫组在第1次免疫后抗体滴度有不同程度升高,第2次免疫后上升较快,其中肌幼虫可溶性抗原及其 ES 抗原免疫组抗体应答较其它几种抗原免疫组强。用成虫可溶性抗原检

为研究饲粮中不同水平钙对麒麟鸡胫骨性能及免疫器官指数的影响，从中选取评价麒麟鸡钙需要量的敏感指标，推荐１～２８日龄麒麟鸡饲粮适宜的钙水平，选用１日龄麒麟母鸡２４０只，随机分为５个处理组，每个处理６个重复，每个重复８只鸡，分别饲喂钙水平为０．７５％、０．９０％、１．０５％、１．２０％和１．３５％（可利用磷水平为０．４５％）的玉米－豆粕型试验饲粮，试验期２８ ｄ。结果表明：饲粮钙水平对麒麟鸡胫骨鲜重、脱脂重、胫骨灰分含量及灰分钙磷比没有显著影响（Ｐ＞０．０５），而对胫骨强度、胫骨灰分重、胫骨钙磷含量有显著影响（Ｐ＜０．０５）。随着饲粮钙水平的提高，胫骨强度、胫骨灰分重、胫骨磷含量呈线性和二次曲线变．．．

将400只1日龄艾维茵肉仔鸡随机分成4个处理,每处理5个重复,每重复20只鸡(公母各半);在 基础日粮——小麦-酪蛋白-鱼粉型日粮中分别添加0．3,0．9和2．7 mg／kg生物素,以基础日粮为对照,系统研究了 生物素对肉仔鸡免疫器官发育、机体免疫反应和神经内分泌激素的影响。结果表明:(1)生物素缺乏可抑制免疫器 官的发育,降低其重量指数;添加生物素可促进免疫器官发育,提高其重量指数。(2)添加生物素可促进细胞免疫反 应和体液免疫反应,提高血清中球蛋白水平及新城疫抗体滴度和IgG水平,极显著提高血液中T、B淋巴细胞转化 率。(3)添加生物素后,血清甲状腺素T4、三碘甲状原氨酸T3、生长激素和皮...

【目的】深入了解MDV与REV人工共感染肉种鸡后疾病的发生、发展状况,为二者临床复杂的混合感染提供确实的鉴别诊断方法和明确的诊断时间。【方法】MDV和REV强毒株人工共感染1日龄肉种鸡,定期剖检,进行病理组织学、细胞凋亡、免疫组化和肿瘤组织的超微结构观察。【结果】肝、胰腺、腺胃、盲肠扁桃体、心肌在感染后1周出现以小淋巴细胞浸润为主的炎症,2～9周时,大部分实质器官出现以幼稚淋巴细胞、大中小淋巴细胞为主的渐进性增生灶,部分增生灶中可见原始网状细胞和马立克氏病细胞;10周后免疫器官实质细胞出现明显的凋亡;免疫组化显示,肝、脾、法氏囊、胸腺等在2周时呈双抗原阳性;电镜下,肝脏肿瘤组织中可见多形态淋巴...

试验设对照组、抗生素组和美洲大蠊虫粉组(分别添加2%、1%和0.5%美洲大蠊虫粉)5个处理,每处理设3个重复,将495羽1日龄快长黄羽肉鸡(公鸡)随机分为15组,每组33羽,测定肉鸡免疫功能和抗氧化能力指标.结果表明:(1)6和10周龄鸡均以2%虫粉组的免疫器官指数最高,与对照组的差异均显著(P<0.05);淋巴细胞刺激指数以2%虫粉组最高,与其他4组的差异均显著(P<0.05);血清球蛋白含量均以2%虫粉组最高,与对照组的差异均显著(P0.05);流感抗体和新城疫抗体效价以2%虫粉组最高,攻毒后鸡的发病率和死亡率以2%虫粉组最低,...

选取1日龄黄羽肉鸡250羽,随机分为5个处理组,每处理组设5个重复,每重复10羽.处理Ⅰ为对照组,饲喂基础日粮;处理Ⅱ为抗生素对照组,在基础日粮中添加30 mg.kg-1杆菌肽锌和6 mg.kg-1硫酸抗敌素;处理Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ为试验组,分别在基础日粮中用3%、6%、9%发酵豆粕替代部分普通豆粕,试验期4周,研究发酵豆粕对1-4周龄黄羽肉鸡生长性能、消化酶活性、抗氧化能力和免疫器官指数的影响,为发酵豆粕应用于肉鸡配合饲料提供科学依据.结果表明:在1-4周龄黄羽肉鸡日粮中用9%发酵豆粕替代普通豆粕,提高肉鸡平均日增重(P<0.05)、十二指肠中的胰蛋白酶活性(P<0.01)、血清中的总抗氧化能力(T...

[目的]在前期研究中,筛选到了存在于多种鸡球虫间的共同抗原泛素缀合酶结构域蛋白(UCE),本研究进一步分析其免疫原性,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。[方法]提取纯化的堆型艾美耳球虫孢子化卵囊总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增堆型艾美耳球虫UCE基因(EaUCE),插入pVAX1质粒,构建真核表达质粒pVAX-EaUCE,通过RT-PCR和Western blot检测pVAX-EaUCE在鸡体内的转录和表达情况。经流式细胞术和间接ELISA法检测pVAX-EaUCE免疫后鸡体细胞免疫和体液免疫水平变化,分析其免疫原性。分别采用柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫及三者的混合卵囊人工感染雏鸡,观察感染前、后雏鸡体质量变化和排出卵囊减少量,评估其对多种球虫感染的免疫保护效果。[结果]EaUCE基因开放阅读框为444 bp,编码148个氨基酸,BLAST分析显示,柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫UCE氨基酸序列同源性均大于95%。pVAX-EaUCE能够在鸡体内成功转录和表达。pVAX-EaUCE免疫后,鸡体的CD_4~+/CD_3~+和CD_8~+/CD_3~+细胞比例显著升高,IFN-γ、IL-2、IL-4、TNFSF15、IL-17D、TGF-β4 mRNA和IgY抗体水平显著升高,表明免疫该质粒能诱导细胞和体液产生免疫反应(P<0.05)。pVAX-EaUCE免疫后,与对照组相比,免疫组鸡体质量显著增加,卵囊产量明显下降,肠道损伤也相应减轻。[结论]鸡球虫共同抗原UCE具有良好的免疫原性,可对多种球虫感染提供部分免疫保护力,有望成为抵抗多种球虫感染的候选抗原。

为了探索大鳞鲃经盐度驯化后的血液生理生化、免疫应激的适应性变化，选择体长为(15.09±3.54) cm，体重为(13.66±1.26) g的幼鱼，设置了3个组别，空白组一直处于淡水中养殖，驯化组经4 g/L的盐度适应性驯养7 d后再放入8 g/L的盐度水体中，未驯化组直接放入8 g/L的盐度水体中，测定比较鱼体放入8 g/L盐度水体中第0、6、12、24、48、96和168 小时幼鱼血液生理生化和免疫应激相关指标变化。结果显示：① 驯化组和未驯化组幼鱼血液中的血常规指标(WBC、Lymph、Mon、Gran、RBC、HGB含量)、血浆生理生化指标(UREA浓度、GLU-G和ALB含量、血浆渗透压)、鳃组织中的ACP、AKP、LDH和肝脏组织中抗氧化指标(SOD、CAT、GSH-Px、MDA含量)在盐度为8g /L的水体中，均随着胁迫时间的延长呈现出先升高后降低的现象。② 胁迫初期，驯化组和未驯化组幼鱼的各生化指标在相同组织内到达峰值的时间相同，但驯化组幼鱼血浆中的生理生化指标(WBC、Lymph、Gran、Mon、UREA、GLU-G、ALB、渗透压)和转氨酶(AST、ALT)、肝组织中的抗氧化酶(SOD、CAT、GSH-PX、MDA)上升幅度和峰值大小均显著性小于未驯化组。③ 在8 g/L NaCl盐度胁迫168 h后，驯化组和未驯化组均能够恢复到对照组水平，但驯化组的大鳞幼鱼血浆渗透压、血浆ALB含量均早于未驯化组恢复到对照组水平。研究表明，经4 g/L的盐度驯化后的大鳞鲃幼鱼遭受8 g/L NaCl盐度环境胁迫时，显示出较好的生理生化自我调节和恢复能力。

【目的】明确鸡肿瘤坏死因子受体相关因子相互作用的具有叉形头相关结构域蛋白(TIFA)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的分子特征及其基因在鸡免疫器官中的表达特性，为后续深入研究TIFA和TRAF6相互作用调控家禽病毒NDV复制的作用机制提供理论依据。【方法】采用生物信息学软件结合实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法结合，通过分析鸡TIFA和TRAF6蛋白的理化性质、二级结构、三级结构、氨基酸同源性和结构域保守性及其在1～6月龄白来航鸡和新城疫病毒(NDV)感染SPF鸡后第3天至第5天的免疫器官(脾脏、胸腺和法氏囊)，分别检测鸡免疫器官中TIFA和TRAF6基因的表达水平，进而研究鸡TIFA和TRAF6蛋白的分子特征及其基因在免疫器官中的表达特性。【结果】鸡TIFA和TRAF6蛋白分别含有187个和545个氨基酸残基，相对分子量约为21.8 kDa和61.9 kDa，其二级结构均主要由无规则卷曲和α-螺旋组成。氨基酸同源性分析结果表明，鸡与火鸡TIFA和TRAF6蛋白的氨基酸同源性最高(分别为97.3%和98.2%)，而与猪TIFA及小鼠TRAF6蛋白的氨基酸同源性最低(分别为51.1%和74.7%)。同时，鸡TIFA蛋白的FHA结构域及TRAF6蛋白的RING、Zinc finger和MATH结构域均在禽类中保守性高。RT-qPCR分析结果表明，鸡TIFA和TRAF6基因在1～6月龄鸡免疫器官中均存在表达，但以脾脏中的相对表达量最高（为47.94和10.84），而在法氏囊中最低（为8.08和2.01），其中，TIFA基因在1月龄鸡免疫器官中表达量最高（为22.15），在6月龄时最低（为1.11），呈先减后增再减趋势，整体表达趋势呈倒“N”型模式；TRAF6基因在4月龄鸡免疫器官中表达量最高（为7.13），在5月龄时最低（为1.05），呈先降后升再降再升趋势，整体表达趋势呈“W”型模式。在NDV感染SPF鸡后的免疫器官中，TIFA和TRAF6基因的相对表达量均显著高于对照，其中，TIFA基因在第3天的鸡脾脏、第4天的鸡胸腺和法氏囊中的表达量最高，而TRAF6基因则在第3天的鸡脾脏、第5天的鸡胸腺和法氏囊中的表达量最高。【结论】鸡TIFA和TRAF6蛋白在禽类中的保守性高，两者在不同月龄鸡和NDV感染鸡的免疫器官中呈现不同的表达水平和表达变化趋势，其参与的先天性免疫应答可能在抵抗NDV感染过程中发挥一定的作用。

３日龄雏鸡按两个剂量组分别于皮下注射淫羊藿－蜂胶佐剂（简称淫蜂佐剂）０．２ｍＬ和０．４ｍＬ，２４日龄时重复注射１次。于７，１４，２１，２８，３５，４２日龄时随机抽样扑杀，采取免疫器官称重并进行光镜和电镜检查，比较不同剂量的淫蜂佐剂对雏鸡免疫器官的增重以及形态结构的影响。结果表明，淫蜂佐剂能显著促进雏鸡免疫器官的早期发育，并能刺激Ｔ、Ｂ淋巴细胞活化。重复注射后，可再次引起脾脏增重，且与剂量有相关性，０．４ｍＬ／羽优于０．２ｍＬ／羽。

用一步法从17 日龄来克亨SPF鸡胚和90 日龄成年鸡的法氏囊、脾脏和胸腺组织中提取总RNA(TRNA),用鸡B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因 (bcl-2) cDNA探针进行Northern blot杂交。发现bcl-2 在成年和胚胎鸡的不同免疫器官中表达量不同, 成年鸡bcl-2 的表达量多少依次为胸腺、脾脏、法氏囊, 而胚胎鸡则是胸腺、法氏囊、脾脏。同时用流式细胞法测定这些器官的细胞凋亡情况, 胚胎鸡法氏囊、脾脏和胸腺的细胞凋亡率分别是0.40% , 0.68% 和0.38% ; 成年鸡则是6.98% , 1.17% 和0.61% 。结果表明, 鸡bcl-2 基因通过阻抑细胞凋亡直接调控正...

【目的】探讨固始鸡免疫器官内细胞凋亡基因Fas和FasL的动态表达。【方法】应用免疫组织化学技术和Leica显微图像处理系统,对细胞凋亡基因Fas和FasL在固始鸡免疫器官内的动态表达进行研究。【结果】Fas在不同发育阶段固始鸡免疫器官内均有表达,但表达量均不相同,呈波浪样动态变化;Fas表达于固始鸡免疫器官内淋巴细胞细胞膜和细胞质,不表达于细胞核;Fas表达阳性细胞在固始鸡不同免疫器官内分布位置不同,呈散在或簇团状分布:法氏囊内阳性细胞主要分布于黏膜靠近上皮细胞的固有膜层内、淋巴小结与淋巴小结之间区域、淋巴小结边缘,淋巴小结内少量淋巴细胞也有Fas表达;胸腺内主要分布于胸腺小叶髓质,极少出现...

为研究复合微生态制剂对肉雏鸡免疫器官指数、肠道菌群和死亡率的影响，选用１日龄健康爱拔益加（ＡＡ）肉鸡１２６００只，随机分为３组，分别饲喂基础日粮（对照组）、基础日粮＋１０ｇ·４０ｋｇ－１乳酸环丙沙星（抗生素组）、基础日粮＋１００ｍ Ｌ·２００Ｌ－１复合微生态制剂（微生态制剂组），每个处理３个重复，每个重复１４００只鸡。试验期１４ｄ。结果表明：抗生素对肉雏鸡胸腺的发育具有抑制作用；复合微生态制剂组与对照组、抗生素组相比，可显著提高肉雏鸡免疫器官指数（ｐ＜０．０５），促进免疫器官发育；复合微生态制剂可以促进肉雏鸡盲肠内乳酸杆菌、双歧杆菌增殖，对大肠杆菌的增殖起到一定的抑制作用；使用复合微生态制剂使．．．