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[期刊] 华北农学报
[作者]
范书曦 张方亮 周蛟 李汉秋 姚炜光
鸡IBD(BKF株)油佐剂灭活疫苗是1986年研制成功的.至今,从制苗工艺研制、改进及乳化设备换型共经历了三个阶段.①开始使用的设备为组织捣碎机或高速匀浆机,其额定转(?)大都在0～2万转.此阶段完成了疫苗制造工艺的研究、检验及制造规程,但疫苗产量少,属实验室规模.②引进了胶体磨,使该疫苗的乳化工艺及生产能力均有大幅度的提高.试制出的油佐剂疫苗经实际测定,其液珠直径一般在1～5μm之间.多数集中在2～5μm之间.③引进小型高压均质机.
[期刊] 华北农学报
[作者]
苗得园 张培君 龚玉梅 冯文达 冯杉
应用 3批鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗进行了安全性和近期免疫效力检验 ,安全性试验采用 15只鸡进行 ,胸肌注射疫苗 4～ 5mL/只后 ,逐日观察 ,结果鸡只食欲、精神未见异常 ,2周后观察 ,注射部位未发现明显异常和病变。用该疫苗免疫 (0 5mL/只 )后的鸡只对A型高致病力菌株的攻击保护率可达 10 0 % ,对C型高致病力菌株的攻击保护率为 93 3%。采用B -ELISA和SPA对鸡群的抗体水平的评估表明该疫苗可激发产生较高的抗体水平
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘爵 刘有昌 姚炜光 周蛟 王平
使用ＳＰＦ雏鸡进行鸡传染性囊病二价活疫苗的攻击保护滴度的测定。ＳＰＦ雏鸡１４日龄免疫，于免疫后７ｄ、８ｄ、９ｄ、１０ｄ、１２ｄ、１４ｄ采血进行ＩＢＤ中和抗体的测定，同时分别进行标准Ｉ型强毒ＣＪ８０１株和标准变异株强毒１０８４Ａ株的攻击，建立抗体滴度与攻击保护率之间的直线回归方程。二价苗免疫后１４ｄＩＢＤ中和抗体滴度达到２９６８（ＧＭＴ），其对ＣＪ８０１株和１０８４株的攻击保护率分别为８９２１％和８２５９％，从而表明在免疫抗体达到２９６８时，免疫鸡表现对ＩＢＤ强毒良好的攻击保护效果，并将此抗体滴度暂定为鸡传染性囊病二价活疫苗的中和保护滴度。
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘爵 刘有昌 姚炜光 周蛟 王平
使用ＳＰＦ雏鸡进行了鸡传染性囊病二价活疫苗攻击保护效果的观察。１４日龄免疫２０００ＴＣＩＤ５０剂量的二价苗或ＢＪ８３６单价苗，免疫后１４ｄ（２８日龄）分别用不同剂量（１∶１、１∶１０、１∶１００）的标准Ⅰ型强毒株ＣＪ８０１株或标准变异株强毒１０８４Ａ株进行攻击，攻击后５ｄ剖杀观察。二价苗免疫组能抵抗极高剂量（１∶１）的ＣＪ８０１株及高剂量（１∶１０）的１０８４Ａ株的攻击，但不能抵抗极高剂量（１∶１）的１０８４Ａ株攻击。ＢＪ８３６疫苗免疫组能抵抗高剂量（１∶１０）的ＣＪ８０１珠及低剂量（１∶１００）的１０８４Ａ株的攻击，但不能抵抗极高剂量（１∶１）的ＣＪ８０１株及高剂量（１∶１０）的１０８４Ａ的...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
罗霞 付小哲 林强 刘礼辉 牛银杰 梁红茹 李宁求
[目的]建立鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)和弹状病毒(SCRV)二联灭活疫苗毒种库及种子批。[方法]以ISKNV-QY0910株和SCRV-GM1503株为原始毒种,扩繁10代(F1～F10)后检测各代病毒对鳜鱼脑组织细胞系(CPB)的致病性及其滴度,并检测其对鳜鱼的毒力。PCR扩增ISKNV的主衣壳蛋白(MCP)基因、RT-PCR法扩增SCRV G蛋白基因序列,检测ISKNV和SCRV毒种的特异性。对F1、F5和F10代ISKNV、SCRV毒种进行细菌、霉菌、支原体及鳜鱼蛙病毒(RANA)和神经坏死病毒(NNV)检测,检验毒种的纯粹性。分别将F1、F5和F10代ISKNV、SCRV病毒液用甲醛灭活后制备灭活疫苗,免疫鳜鱼21 d后攻毒,连续观察14 d,待鱼体稳定后统计死亡率并计算免疫保护率(RPS)。将ISKNV和SCRV毒种湿毒保存于-80℃冰箱,每6个月取3支检测病毒滴度,以确定毒种的保存期。[结果]各代次毒株感染CPB细胞后产生的CPE形态及病变速度基本相同,SCRV滴度为10~(8.58)～10~(8.875) TCID_(50)/mL,ISKNV滴度为10~(7.38)～10~(7.625) TCID_(50)/mL。F1、F5和F10代ISKNV按10~4 TCID_(50)/mL、SCRV按10~(6.5) TCID_(50)/mL对鳜鱼攻毒(每尾0.1 mL),致死率均超过90%。ISKNV和SCRV各代次毒种可分别扩增出1 300bp的MCP基因和1 500 bp的G基因,特异性良好。ISKNV、SCRV毒种无细菌、霉菌、支原体及鳜鱼蛙病毒和神经坏死病毒污染。各代次病毒灭活疫苗对鳜鱼安全有效,免疫保护率ISKNV可达92%以上,SCRV可达84%以上;湿毒-80℃保存,保存期为36个月。[结论] 10代以内ISKNV和SCRV的生物学特性稳定,可用于鳜鱼ISKNV和SCRV二联灭活疫苗的制备与检验。
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘文惠 胡毓骥 曹春景 肖治军 赵金旺
通过近三年试验,研制出鸡传染性支气管炎毒株IB H_(120)细胞弱毒苗,经室内外近40万羽雏鸡免疫试验表明:该苗以每羽0.01ml滴鼻、点眼或口服免疫4～12日龄雏鸡,7d后产生免疫力;免疫后17d、32d、60d抗标准强毒攻击的免疫保护率分别为88.7%、87.5%、87.5%,免疫期可达二个月;其最小免疫量为0.001ml/羽;以10个免疫剂量接种雏鸡无任何不良反应,安全性能良好;-20℃保存半年、4℃保存一个月效力不变.
关键词：
鸡传染性支气管炎 鸡全胚细胞培养 疫苗
[期刊] 水产学报
[作者]
陈桂花 徐黎明 赵景壮 任广明 邵轶智 卢彤岩
为了研发用于预防传染性造血器官坏死病(infectious hematopoietic necrosis,IHN)灭活疫苗,实验以不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)在胖头鱥上皮细胞(Epithelioma papulosum cyprinid,EPC)上对传染性造血器官坏死病毒(infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)进行连续传代培养,通过测定各代病毒滴度,结合病毒收获时间确定最佳增殖方案;采用不同浓度的β-丙内酯(β-propanolactone,BPL)在24℃下灭活,经安全性实验验证后确定最佳灭活条件。以不同剂量腹腔注射免疫虹鳟,以磷酸盐缓冲溶液(PBS)为阴性对照组,通过检测攻毒后相对免疫保护率(relative percent survival,RPS)、免疫相关因子表达量及血清中和抗体效价来分析该疫苗的保护效果。结果显示,最佳增殖方案为以MOI为0.000 1接种,15℃培养3 d;最佳灭活条件为以终浓度3.0 mmol/L的BPL将IHNV在24℃下灭活24 h;以最佳免疫剂量10μL/尾腹腔注射免疫虹鳟,免疫后7、21、45和60 d的相对免疫保护率分别为91.37%、84.28%、84.15%和47.5%,免疫后60 d时RPS显著低于其他时间点免疫组;免疫相关基因的实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR,RT-qPCR)结果显示,与阴性对照组相比,Mx-1和IFN-γ表达量在免疫后7、15和30 d脾脏和头肾中均显著上调,在第7天时达到最大值(5倍);CD4和IgM表达量在免疫后15 d脾脏和头肾中均显著上调;在免疫后第30、45和60天虹鳟血清IHNV中和抗体效价依次为67.25、43.40和29.78,呈下降趋势且各组间差异显著。研究表明,该灭活疫苗可诱导虹鳟产生特异性免疫和非特异性免疫反应,对虹鳟具有显著的免疫保护作用。本研究为IHNV灭活疫苗研发提供参考。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈明勇 高齐瑜 郭建华 王彩虹
[期刊] 华北农学报
[作者]
姜北宇 刘月焕 郑世兰 景小冬 姚颖 白丽萍
用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76 V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒,分别接种鸡胚或鸭胚,制备各种病毒抗原液,经福尔马林灭活后,采用FILTRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩,然后按一定比例混合,以司本80及吐温80为乳化剂,10号白油为佐剂,制成ND-IB-EDS76-AE四联灭活疫苗。对四联苗各项技术指标进行了测定,证明本疫苗安全、无任何副作用;免疫10-14 d后产生免疫力;ND部分效检,攻毒100％保护,每羽份含ND效价达50-123 PD50;IB部分效检,免疫21-28 d后攻毒保护率达80％-100％,IB HI效价≥1:64;...
关键词：
鸡 四联疫苗 免疫 浓缩
[期刊] 淡水渔业
[作者]
索钰杰 林格 江南 李逸群 范玉顶 刘文枝 孟彦 薛明洋 曾令兵 周勇
为了探明大鲵虹彩病毒病灭活疫苗的安全性与免疫效力,采用β-丙内酯(β-propiolactone, BPL)灭活鲤上皮瘤细胞(Epithelioma papilloma cyprini,EPC)内增殖的大鲵虹彩病毒(giant salamander iridovirus, GSIV),制备成大鲵虹彩病毒病灭活疫苗,利用免疫剂量为1.0×10~6 TCID_(50)/mL的灭活疫苗腹腔注射健康大鲵(Andrias davidianus),研究疫苗的安全性和免疫效力。结果显示:一次单剂量注射、单剂量重复注射和超剂量注射后,大鲵的行为和摄食均正常,未见不良反应,证明了制备的大鲵虹彩病毒病灭活疫苗安全;用不同剂量的疫苗(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL/尾)免疫健康大鲵,在免疫后第28 d用GSIV进行攻毒,当免疫剂量为0.1 mL/尾时,相对免疫保护率为44.44%,其它4种免疫剂量的相对免疫保护率相似,均高于70%。大鲵在免疫后7 d已开始产生免疫应答,21 d血清抗体效价达到最高值252.48±28.01。在免疫后两周内,MyD88基因、TLR9基因和MHCIIA基因均显著上调。免疫后150 d进行攻毒实验,大鲵的相对免疫保护率为62.5%。二次免疫实验中,大鲵分别在第一次免疫7、14、21、28、56 d后进行第二次免疫。结果显示,第一次免疫21 d后进行二次免疫,其血清抗体效价可以较长时间维持在最高水平,最高血清抗体效价为274.37±25.23,第二次免疫后的第150 d用GSIV进行攻毒,存活率为86.67%。研究结果表明,大鲵虹彩病毒病灭活疫苗最佳免疫方式为腹腔注射疫苗0.2 mL/尾后,21 d进行第二次免疫,免疫剂量为0.2 mL/尾。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈明勇 陈德威 高齐瑜 张冰
研究了传染性法氏囊病病毒 (IBDV)变异 E株人工感染体外培养法氏囊细胞的凋亡。电镜观察和DNA电泳分析表明 ,IBDV感染后 4～ 2 4 h,法氏囊培养细胞呈现典型细胞凋亡的形态学特征和生化特征。经流式细胞计检测、荧光染色观察和统计学分析表明 ,IBDV感染后 4～ 2 4 h,法氏囊培养细胞凋亡数量显著增加 (P
[期刊] 淡水渔业
[作者]
杨先乐 夏春 左文功
旋转培养优于静置培养,它不仅表现在可形成细胞单层的面积大,单层细胞的产量高,单位面积所需的培养液(维持液)少,而且细胞生长的速度较快,细胞形成单层的时间较短,接种病毒后收获的病毒滴度也相应较高,它适宜于疫苗工厂化生产。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
罗毅志 杨广智 叶雪平
[期刊] 华北农学报
[作者]
詹丽娥 陆冰洋 刘华栋 王彩先 唐娟 詹海杰 李芹 王建忠 丁壮
通过RT-PCR方法从山西省不同地区养鸡场病、死鸡法氏囊组织中扩增得到IBDV SX/12 VP2基因全长,将其克隆至pMD18-T载体。测序分析结果表明,IBDV SX/12 VP2全长为1 356 bp,推导其编码452个氨基酸;核苷酸与氨基酸同源性分析显示,二者均与超强参考毒株同源性较高,分别为99.2%和99.6%;遗传进化树分析结果表明,IB-DV SX/12与超强参考毒株位于同一进化分支,IBDV SX/12高变区关键氨基酸具有以下特征:222S,249Q,254G,256I,279D,284A,294I,299S以及SWSASGS七肽区不变,超强参考毒株高变区关键氨基酸为:222...
关键词：
传染性法氏囊病病毒 VP2基因 分子鉴定
[期刊] 华北农学报
[作者]
王文科 陈冠春 王笑梅
从暴发鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）死亡率６３．５１％的病死鸡中，分离出一株ＩＢＤ病毒（ＩＢＤＶ）９０１株。经检测，９０１株是一株ＩＢＤＶ超强毒株，可使３１日龄健康雏鸡７１．４％死亡，１０日龄ＳＰＦ鸡胚和３０日龄ＳＰＦ雏鸡１００％死亡。死亡鸡再现了自然暴发ＩＢＤ的典型病变。
关键词：
鸡传染性法氏囊病,超强毒,感染
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