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[期刊] 中国农业科学  [作者] 马明  刘月焕  陈明勇  韩春华  林健  
【目的】检测鸡、鸽和虎体内的流感病毒受体的类型和分布,以期解释3种动物对禽流感病毒易感性差异的机制。【方法】使用地高辛标记的外源性凝集素染色方法检测这些动物的喉头、气管、肺脏和肠道(直肠)的上皮细胞表面SAα2,6Gal和SAα2,3Gal连接键的类型。【结果】SPF鸡的上呼吸道黏膜上皮细胞表面有大量的SAα2,3Gal和少量的SAα2,6Gal;肺房上皮细胞表面只有SAα2,3Gal;而直肠黏膜上皮中SAα2,6Gal和SAα2,3Gal都没有表达。成年鸽的上呼吸道黏膜上皮细胞表面只有SAα2,6Gal,而没有SAα2,3Gal;而下呼吸道中SAα2,6Gal和SAα2,3Gal都没有;直肠...
[期刊] 华北农学报  [作者] 张传美  罗瑶瑶  杨海燕  王建琳  单虎  
为了探究樱桃谷鸭体内流感病毒的类型和分布,利用亲和免疫组织化学法对樱桃谷鸭呼吸道和消化道2种流感病毒受体SAα2,3-GAl(禽流感病毒受体)和SAα2,6-GAl(人流感病毒受体)的分布进行了检测分析。结果显示,SAα2,3-GAl和SAα2,6-GAl这2种受体在樱桃谷鸭的呼吸道气管、支气管、肺泡表面呈强阳性分布,MAA-Ⅱ标记SAα2,3-GAl受体阳性信号黏膜下腺体也较强,分布相对较多。在消化道2种受体存在不同程度的表达,消化道的直肠SAα2,3-GAl受体阳性信号较强,受体分布较多,而SNA标记呈弱阳性分布,SAα2,6-GAl受体分布较少。提示樱桃谷鸭体内可以同时表达SAα2,3-...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 苏泽红  陈晓武  陈秋生  
用透射电子显微镜观察 15只健康中华鳖的胃黏膜上皮和腺上皮细胞的超微构造。结果显示 ,胃黏膜上皮为单层高柱状 ,细胞上部胞质中充满黏液性颗粒 ,其形状多样化 ;上皮中有少量淡染的亮细胞 ,其结构与周围细胞基本相同 ,只是数量有差异 ;上皮细胞之间具有明显的细胞连接。胃腺上皮细胞还未分化为独立的主细胞和盐酸细胞 ,但腺体细胞的结构同时具备两种细胞的特征 ,即既有发达的细胞内小管和丰富的线粒体 ,又有大量膜包分泌颗粒和粗面内质网。上述结果表明 ,中华鳖胃黏膜上皮具有分泌黏液的细胞结构 ;一种胃腺细胞可同时执行分泌盐酸和胃蛋白酶原的功能
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张民秀  谢芝勋  邓显文  谢志勤  谢丽基  黄莉  黄娇玲  
【目的】建立了一种同时鉴别H1、H3亚型猪流感、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪瘟、猪日本乙型脑炎、猪圆环病毒病、猪细小病毒病和猪伪狂犬病8种病毒性呼吸道和繁殖障碍病病原体的GeXP高通量检测方法。【方法】根据这8种病原体的基因保守序列,设计并合成了9对特异性引物,在每对特异性引物的5'端均加上一段通用引物,形成特异性嵌合引物。运用GeXP单重PCR方法,以单一病毒CDNA/DNA为模板验证引物的可行性;建立GeXP多重PCR方法,以单一病毒CDNA/DNA模板、阳性CDNA/DNA混合模板验证GeXP多重检测体系的特异性和准确性;将含猪圆环病毒、猪细小病毒和猪伪狂犬病病毒靶基因的克隆质粒及体外转录...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张晓文  杨倩  
分别在禽流感灭活抗原(H5N2)中添加黏膜免疫佐剂CpG(CpG佐剂组)和重组IL-2(IL佐剂组),经过鼻腔免疫鸡群后研究呼吸道各段抗体分泌细胞的分布和数量变化。结果发现:在鼻腔免疫后第3周和第5周CpG佐剂组肺单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(生理盐水)(P<0.05),CpG佐剂组和IL佐剂组肺和气管、气管叉单位视野中IgG分泌细胞面积和数量均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);免疫后第5周和第7周CpG佐剂组气管和气管叉单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(P<0.05)。免疫后第7周2个试验组气管叉中IgG分泌细胞数量极显著高于对照组(P<0.01)...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 孙裴  杨榕  顾超逸  张彦明  张琛  魏建忠  李郁  王桂军  
【目的】研究IBV感染鸡气管黏膜上皮细胞(Chicken trachea epithelium cells,CTECs)中基底细胞的特性,以进一步揭示IBV感染与α-2,3-唾液酸受体之间的关系。【方法】利用光学显微镜观察、电子显微镜技术、RTPCR方法,对接种IBV的细胞进行观察和检测,研究IBV对基底细胞的感染特征。【结果】与CTECs感染IBV结果相反,单独培养的基底细胞接种IBV后,无明显的形态学损伤和亚细胞结构(溶酶体、细胞核)的损伤,细胞中也检测不到IBV的增殖。【结论】气管黏膜上皮细胞可以被IBV感染,单独的基底细胞不能被IBV感染,提示α-2,3-唾液酸受体是否存在与IBV感染...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 王红  余丽芸  侯喜林  朴范泽  翟延庆  
【目的】以纯化的牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)HJ株重组N蛋白作为包被抗原,对各项条件进行优化,确定判定标准,建立检测BRSV抗体的间接ELISA方法。【方法】将已构建的重组菌BL21(DE3)进行诱导表达,获得重组N蛋白。利用电洗脱法对表达产物进行纯化,并用Western blot对表达产物进行鉴定。以纯化后的重组N蛋白作为诊断抗原,对ELISA反应条件进行优化,初步建立检测BRSV抗体的间接ELISA诊断方法。【结果】成功表达并纯化了BRSV HJ株重组N蛋白,Western blot检测结果证明表达产物具有良好的反应原性。以重组N蛋白作为诊断抗原,建立了间接ELISA诊断方法。交叉试验结...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 金光明  刘胜兵  杨倩  李玉磊  
16头 5月龄长白×大约克夏二元杂交母猪 ,通过不同途径接种猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)弱毒疫苗 ,采用组织学方法研究其对母猪生殖道黏膜淋巴细胞分布的影响。结果表明 ,与对照组相比 ,鼻腔和肌注接种可使猪子宫角、子宫体和子宫颈黏膜上皮内淋巴细胞的数量极显著增加 (P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李乙江  杨晶晶  牛自兵  创向辉  杨倩  
[目的]IgA在呼吸道抵抗外来病原微生物的黏膜免疫中发挥着至关重要的作用,了解黄牛呼吸道IgA分泌细胞和淋巴组织的分布尤为重要。[方法]本试验运用免疫组织化学技术和组织学技术对5头7岁健康婆罗门黄牛的鼻黏膜、气管、肺内支气管、肺组织的IgA分泌细胞和淋巴组织的分布进行了详细研究。[结果]黄牛的鼻黏膜、气管、肺内支气管、肺中均分布有IgA分泌细胞,且主要分布于黏膜上皮下以及腺体周围。其数量在鼻黏膜中最多,气管次之,肺内支气管和肺组织中IgA分泌细胞较少。此外,从鼻黏膜到肺内支气管黏膜下均分布有较多的淋巴组织
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 何志全  沈文正  窦忠英  
为探讨昆白系孕鼠子宫内膜上皮细胞的分离与体外培养条件、生长特点及其增殖规律,采用2.5 mg/mL胰蛋白酶+0.4 mg/mL EDTA分别以20,30,40 min消化子宫内膜,结合刮取法,对昆白系孕鼠子宫内膜上皮细胞的分离培养进行了研究。结果表明,随着消化时间的增加,所获得的细胞数目也增多,但细胞活力下降(噻唑兰法检测);消化30min所获得的细胞活力高、数目多,细胞比较单一;子宫内膜上皮细胞的活力随着细胞培养代数的增加而下降。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 周传丽  刘铮铸  俞英  张勤  
【目的】阐明产肠毒素大肠杆菌F18(ETEC F18)引发仔猪腹泻的机理,针对其候选基因FUT1的CDS区第307位点处的突变(G→A),建立3个仔猪小肠黏膜上皮细胞系(GG、GA和AA)。【方法】首先以胎鼠和仔猪为试验材料,确定小肠上皮细胞的最佳分离方法。采用XI型胶原酶和I型中性蛋白酶的联酶混合液,将胎鼠小肠组织机械剪碎后用联酶进行消化和直接将联酶灌注到仔猪小肠腔内消化的两种方法进行比较。针对仔猪小肠黏膜上皮细胞体外培养过程中成纤维细胞污染难以消除的问题,本研究采用局部画圈法逐步去除成纤维细胞。最后,用电镜和CK18免疫荧光染色对纯化后的原代仔猪小肠黏膜上皮细胞进行鉴定。【结果】两种小肠上...
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 王永波  陈国华  王珺  骆剑  黄宗文  尹绍武  
采用阿立新蓝过碘酸雪夫试剂染色法,研究了波纹唇鱼消化道黏液细胞的类型和分布规律。波纹唇鱼黏液细胞在消化道各部位均有分布,不同部位黏液细胞密度和类型均有差异。在靠近消化腔的部位分布Ⅱ型黏液细胞;在黏膜层基部多分布Ⅲ型和Ⅳ型黏液细胞。口咽腔、舌和食道部位主要分布Ⅱ型和Ⅳ型黏液细胞;小肠和直肠黏膜层顶部主要分布Ⅱ型和Ⅳ型黏液细胞,基部主要为Ⅲ型和Ⅳ型黏液细胞。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李正平  杨倩  
为研究胆酸钠促进山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮吸收禽流感灭活病毒的形态学机制,经鼻腔接种胆酸钠和禽流感灭活病毒后,用组织学光镜和电镜制片技术研究山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体上皮结构的变化以及灭活病毒的吸收情况。结果表明:单独应用灭活病毒后扁桃体黏膜上皮结构完整;而应用胆酸钠或胆酸钠配合灭活病毒后扁桃体中可观察到较多脱离黏膜上皮的细胞,脱落的细胞大部分是上皮细胞和淋巴细胞,上皮细胞间间隙增大,紧密连接被打开。应用胆酸钠配合灭活病毒后可观察到部分细胞内含有病毒的囊泡。鼻腔接种后第3天,应用胆酸钠的扁桃体黏膜上皮结构基本恢复,几乎没有观察到脱离上皮的细胞。结论:胆酸钠通过打开山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮细胞...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 陈家祥  王全溪  蔡晓华  王长康  
将162只1日龄健康麻羽肉用仔鸡随机分成3组,每组3个重复,每个重复18只,CK组饲喂基础日粮,A、B组在基础日粮中分别添加50 mg.kg-1地衣芽孢杆菌制剂、30 mg.kg-1杆菌肽锌,饲养期28 d,观察3组肉鸡肺、气管、初级支气管肥大细胞、浆细胞的数量,淋巴组织的分布及气管SIgA阳性细胞的数量,研究地衣芽胞杆菌对鸡呼吸系统黏膜免疫的影响.结果表明:A组肺、气管、初级支气管浆细胞及气管SIgA阳性细胞的数量显著多于CK组(P<0.05),肥大细胞的数量显著低于CK组(P0.05);A、B组均能增加肺、气管、初级支气管中淋巴...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 黄志坚  董瑞兰  罗刚  江和基  
采用体外细胞黏附模型,研究菠萝蛋白酶对K88+产肠毒素大肠杆菌(ETEC)黏附大鼠小肠黏膜上皮细胞的抑制作用.结果表明:菠萝蛋白酶能显著降低K88+ETEC的黏附率,且与庆大霉素的抑菌效果相当(P>0.05).由此可以推测,菠萝蛋白酶能体外抑制K88+ETEC菌毛黏附上皮细胞,阻止K88+ETEC对肠道的侵袭,为临床提供一定的理论依据.
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