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[期刊] 水产学报
[作者]
岳玉环 黎诚耀 杨盛华 卢强 陶增思 王文东 邹啸环 杨振国 王振英 殷震
实验选用４种鱼类传代细胞，对首次发现的鳗鲡“狂游病”的病原鳗鲡冠状病毒样病毒进行了细胞分离与培养。本研究在鲤上皮乳头状瘤细胞（ＥＰＣ）中复制了鳗鲡冠状病毒样病毒粒子，并经病毒细胞培养物的电镜负染和超薄切片法检查得到了证实。
关键词：
欧洲鳗鲡,冠状病毒样病毒,细胞培养
[期刊] 水产学报
[作者]
葛均青 杨金先 龚晖 林天龙
为获知鳗鲡"脱粘败血病"与病毒的关系,实验用蔗糖密度梯度离心的方法从发病的欧洲鳗鲡内脏器官组织匀浆液中纯化了病毒粒子,负染后利用电镜观察;进一步用EO细胞对病毒进行了分离、培养,并对感染病毒的细胞进行超薄切片,电镜观察;然后,提取病毒DNA,利用鳗鲡疱疹病毒的PCR检测方法对其进行了鉴定。结果显示,接种匀浆上清液的EO细胞出现细胞融合的病变效应;分离病毒的病毒粒子具囊膜,大小约为200 nm;从感染病毒的细胞上清液DNA中扩增出特异性条带,序列测定与比对分析表明,该序列与鳗鲡疱疹病毒欧洲株(AngHV-1)的序列完全一致。研究表明,利用EO细胞分离了一株鳗鲡病毒,经形态观察和DNA分析,确认该...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
石迎 陶洁 李本强 程靖华 刘惠莉
为分析适应肠道细胞的猪德尔塔冠状病毒（Porcine deltacoronavirus, PDCoV）对仔猪的致病性，本研究首先用ST细胞分离培养的PDCoV感染IPEC-J2细胞进行适应性试验，通过间接免疫荧光试验（IFA）检测PDCoV抗原，然后绘制病毒生长曲线，最后分析适应IPEC-J2细胞的PDCoV对仔猪的致病性。结果表明：1）经ST细胞分离培养的PDCoV可以感染IPEC-J2细胞并出现CPE，可在细胞内检测到PDCoV抗原，PDCoV在感染IPEC-J2细胞后48 h达到增殖高峰。2）适应IPEC-J2的PDCoV对仔猪具有肠致病性，仔猪出现明显腹泻症状，甚至出现死亡；剖检可见明显的肠道病变，病理组织学显示肠上皮细胞及肠绒毛病变，并通过免疫组化对抗原进行定位，发现PDCoV广泛分布于肠道上皮细胞。3）肠道免疫细胞因子分析发现PDCoV感染仔猪后肠道I型干扰素表达上调，同时激活体内Th1和Th2型肠道细胞免疫反应，诱导感染仔猪产生免疫细胞因子发挥抗病毒作用。综上，经ST细胞分离培养的PDCoV对IPEC-J2细胞具有较强的适应性，并对仔猪产生较强的致病性。本研究为PDCoV致病机制及抗病毒免疫进一步研究奠定基础。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
方谱县 刘康 张蕙畅 夏思进 张健淞 任杰 肖少波 方六荣
通过RT-PCR对采集自河北省2个猪场的5份腹泻仔猪小肠内容物进行检测,结果均为猪δ冠状病毒(PDCoV)阳性。将病料处理后接种LLC-PK1细胞,从2个猪场的病料中各成功分离到1株PDCoV,分别命名为PDCoV CHN-HeB-A1株和CHN-HeB-B2株。通过间接免疫荧光试验(IFA)、Western blot和电镜观察对分离的病毒进一步鉴定,IFA和Western blot结果证实2株病毒都能与PDCoV M蛋白的单克隆抗体发生特异性反应,电镜下可观察到直径100～150 nm、呈典型皇冠状的病毒粒子,证实所分离的病毒为PDCoV。全基因组测序以及遗传进化分析结果表明,2株PDCoV与中国大陆毒株相似性较高,为98.7%～99.1%,与中国香港毒株处于同一簇。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
徐文忠 陆承平 杜念兴 徐为燕 陈溥言
以纯化的牛冠状病毒(BCv)免疫 BALB/c 小鼠,取其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0融合,用间接 ELISA 筛选,获得了4株分泌 BCV 特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞:C_(12)、C_(31)、C_(42)和C_(54).它们系针对 BCV 不同表面抗原决定簇的.用 C_(12)和 C_(31)两株细胞制备的腹水混合包被聚苯乙烯微孔板,建立了以生物素标记的兔抗 BCV IgG 和酶标亲和素介导的 BAS—ELISA,并对 BCV 标准毒株和临床犊牛腹泻粪样作了检测.
关键词：
牛冠状病毒 单克隆抗体 ELIsA
[期刊] 统计与决策
[作者]
李栋 白瑞瑞
文章提出了一个新型病毒传播仿真组合模型SISR-HHO有效模拟新型冠状病毒(COVID-19)的传播过程,帮助公众研判疫情发展趋势。其中,SISR模型是SEIR模型的改进模型,它具有更好的灵活性,但参数也更多,这些参数一旦设置不当,SISR模型的仿真效果将大打折扣。为此,使用改进的哈里斯鹰优化算法对SISR模型的参数进行寻优。最后,通过实验对比了SISR-HHO模型与其他几种常用模型对COVID-19传播过程的仿真效果,结果显示建立的模型具有更好的仿真精度,更适合模拟COVID-19的传播过程。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
严玉宝 陆承平 徐为燕 杜念兴
牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCV)是已知新生犊牛腹泻的主要病原之一,同时也感染成年牛、猪、马及多种家畜和人,感染相当普遍。为了深入了解 BCV 的生物学特性,国外学者对其病毒结构多肽进行了研究,而国内迄今尚未见此类报道。本实验则对 BCV MUC-270株进行了结构多肽分析,建立了非放射性标记 BCV 多肽的研究方法,为今后进一步研究打下基础。
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
刘欣然 陈桐 张煜 陈红
干扰素刺激基因15(ISG15,interferon-stimulated gene 15)是一种泛素样蛋白，在调节机体天然免疫和抗病毒感染过程中发挥重要作用。ISG15在针对流感病毒、乙型肝炎病毒、HIV病毒、埃博拉病毒、SARS病毒、中东呼吸综合征冠状病毒、巨细胞病毒等病毒的抗病毒研究已有文献报道。除此以外，最新的研究表明ISG15分子会在新型冠状病毒的木瓜蛋白酶样蛋白酶的作用下失活，从而抑制其抗病毒功能。因此抑制新型冠状病毒木瓜蛋白酶样蛋白酶，除能直接阻断病毒的生命周期、抑制病毒在体内的复制以外，同时也会提升ISG15分子水平，继而间接提升机体免疫能力，降低感染风险。该文介绍ISG15抗新冠病毒的过程，重点介绍ISG15抗冠状病毒作用的特异性，此外，总结新冠病毒通过木瓜蛋白酶样蛋白酶阻断ISG15介导的天然免疫实现免疫逃避的机制，并罗列了潜在的木瓜蛋白酶样蛋白酶的抑制剂。本文从ISG15抗病毒天然免疫的分子机制角度，总结抗SARS-CoV-2药物的最新进展，并对相关药物的研发前景进行展望。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周斌 郑其升 刘华雷 曹瑞兵 陈溥言
为进一步研究的生物学特性,应用鸡胚成纤维细胞(CEF)和鸡胚肾细胞(CEK)培养禽腺病毒江苏分离株,进行培养特性、血凝特性、理化特性、超薄切片观察和PCR检测。实验结果表明,CEF感染病毒后没有出现病变。CEK感染病毒后则表现出很强的聚集性并形成细胞团,有的成束状,最后脱落;ReedMuench方法测得其TCID50为每0.1mL10-5.4。CEK核内存在大量70～80nm、呈典型的晶格状排列的腺病毒颗粒。
关键词：
禽腺病毒 细胞培养 细胞病变 PCR
[期刊] 中国科技论坛
[作者]
本刊编辑部 张九庆
自1965年人体内的冠状病毒(Corona Virus)被分离和命名到现在,科学家对冠状病毒的研究不过55年的历史,但冠状病毒对人类的伤害似乎越来越严重。2002年冬至2003年春,严重急性呼吸综合征(SARS)肆虐中国的广东和北京; 2012年中东呼吸综合征(MERS)在沙特阿拉伯传染扩散; 2019年底至今中国遭遇了从武汉爆发并扩散的严重肺炎疫情。2020年2月11日,世界卫生组织将这一疾病正式命名为COVID-19,即2019年冠状病毒疾病;引发疾病的病毒则被国际病毒分类委员会命名为SARS-CoV-2,与引发SARS的病毒属同类冠状病毒。经过多方努力,相信中国的此次疫情会很快得到控制并结束。
关键词：
冠状病毒 公共研发 重新审视
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张帆帆 宋德平 周信荣 黄冬艳 李安琪 彭棋 陈燕君 吴琼 何后军 唐玉新
【目的】猪Ｄｅｌｔａ冠状病毒（Ｐｏｒｃｉｎｅ Ｄｅｌｔａｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ，ＰＤｃｏｖ）是近年来新发现的可引起猪只，特别是新生仔猪腹泻的冠状病毒，其引发的腹泻具有较高的发病率和死亡率，是造成新生仔猪死亡的重要原因之一。试验拟建立新现ＰＤｃｏｖ ｒｔ－Ｐｃｒ检测方法，并调查当前江西腹泻猪群中ＰＤｃｏｖ的感染情况。【方法】通过对Ｇｅｎ Ｂａｎｋ数据库中ＰＤｃｏｖ全基因组序列的比对分析，找出保守序列，用Ｐｒｉｍｅｒ ３．０在线软件设计１对扩增ＰＤｃｏｖ核衣壳（ｎ）蛋白基因片段的特异性引物，基于该引物建立ＰＤｃｏｖ ｒｔ－Ｐｃｒ检测方法；用建立的方法检测腹泻猪粪便及肠道样品，挑选阳性扩增产物进行克．．．
[期刊] 中国科技论坛
[作者]
本刊编辑部 张九庆
从2020年3月以来,中国新冠肺炎疫情逐渐得到控制,而全世界范围内的新冠病毒感染者却增加迅猛,形势更加严峻。各国科学家们一直在努力探索,但是科学研究和技术开发并没有像人们翘首期盼的那样,短时间内在病毒溯源、病毒变异规律、特效药物开发、疫苗研发等方面取得实质性的巨大进展。政府投入了大量的公共研发资金,仍然收效缓慢,科技界不得不面对被某些政治人物和公众质疑。殊不知,投入大产出慢正是前沿科技研发特别是医学研究与药物开发的真相。生命科学研究
关键词：
冠状病毒 导向型 公共研发
[期刊] 经济师
[作者]
郭尔卓 郝艺婷 张佳伟 张琦
智能化的世界正逐步向人们走来,也逐渐成为新的科技潮流。文章从新型冠状病毒疫情的物流末端配送为切入点,从中观察物流末端配送状况,并就此分析我国物流末端配送存在的普遍问题,经分析研究后最终提出加快智能配送设备的应用,并对其未来进行了展望。
关键词：
新型冠状病毒 物流末端 智能配送
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙裴 张彦明 张浩 高春生 张为民 王晶钰 郭抗抗 党如意
【目的】探索鸡气管上皮细胞(chicken trachea epithelium,CTE)分离培养技术,并研究传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)在CTE中培养特性。【方法】利用气管灌注冷消化法分离培养CTE,对CTE特异性8/18角蛋白作免疫组化鉴定上皮细胞。培养的CTE分别接种IBVM41株和T株,分别在接种后第12～96小时观察接毒细胞形态学变化,应用电镜技术观察CTE细胞病变和病毒粒子结构,利用RT-PCR技术检测CTE中病毒核酸并对CTE中IBV的血凝性和鸡胚致病性进行检测。【结果】利用灌注冷消化法可以获得形态完整并带有纤毛的CTE,细...
[期刊] 水产学报
[作者]
杨金先 陈强 李英英 宋铁英 葛均青
为了明确鳗鲡疱疹病毒（Anguillid herpesvirus, AngHV）的生物学及理化特性，利用一株从欧洲鳗鲡“脱黏败血综合征”病料中分离的AngHV病毒株研究了其增殖特性及其对主要鱼类细胞系的感染敏感性，进一步分析了其对热、酸碱、氯仿和乙醚等理化因子的耐受性。结果发现，AngHV感染的鳗鲡卵巢细胞系（Eel ovary, EO）内可见许多典型的疱疹病毒样颗粒，细胞出现时序性细胞病变; AngHV可在EO细胞系内稳定传代，较适宜扩繁温度为25 ℃～27 ℃，而不能在鲤上皮瘤细胞系（Epithelioma papilloma cyprinid cell , EPC）、草鱼卵巢细胞系 (Grass carp ovary cell, CO)、胖头鱥肌肉细胞系 (Fathead monow cell, FHM)、大鳞大麻哈鱼胚胎细胞系（Chinook salmon embryo cell, CHSE-214）、虹鳟性腺细胞系（Rainbow trout gonad cell, RTG-2）、蓝鳃太阳鱼细胞系(Bluegill fry cell, BF-2)等鱼类细胞内增殖；理化特性分析表明，37℃处理30 min，AngHV滴度降低不明显，而56 ℃处理30 min可完全灭活AngHV；AngHV对酸（pH 3.0）敏感，而对碱（pH 10.0）较耐受，且对氯仿和乙醚敏感。本研究结果可为AngHV病的综合防控及疫苗的开发提供参考依据。
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