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[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 陆丽丽  陈舜胜  
比较了提取鲫鱼卵的脂质和磷脂的三种方法。酶水解-乙醇法提取的脂质和磷脂的颜色较浅、得率较高,提取的磷脂主要成分为磷脂酰胆碱;正己烷-乙醇-丙酮法提取总磷脂、富含固醇的中性脂和含少量固醇类的中性脂,丙酮洗涤能有效地去除磷脂中的中性脂,特别是易溶于乙醇的固醇和三萜系醇,最低限度地使用有毒有机溶剂;而Bligh-Dyer提取总脂后液液萃取的经典方法提取脂质虽也较简便,但其大量使用有毒溶剂,安全性低。此外,甲醇单溶剂洗脱,紫外检测器在线检测进行的低压柱层析,分离正己烷-乙醇分提的磷脂,制备了较高纯度的磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 杨明生  
20 0 1年 4月对彭泽鲫鱼卵感染水霉的问题进行了研究 ,设计了 11个处理组 ,对受精卵、未受精卵、死胚卵进行了观察 ,孵化 116h均未见到霉卵出现。另外探讨了孔雀石绿对胚胎发育的影响 ,使用孔雀石绿处理 ,浓度在 2 0mg L内 ,每次不超过 10分钟对胚胎发育是安全的 ,但会明显延迟出膜时间
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 沈蔷  章海敏  施旆旆  胡军祥  
以鲫鱼Carassius cuvieri未成熟的卵细胞为材料,研究了玻璃化冻存对鲫鱼卵细胞的存活率及琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响。结果表明:鲫鱼卵细胞存活率在1~6 d下降明显,6~8 d下降趋势减弱,保持相对稳定;琥珀酸脱氢酶活性呈显著下降(P
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 陈文娟  陈丽娇  
采用乙醇加热纯化提取的方法,从大黄鱼鱼卵中提取磷脂,研究乙醇含量、料液比、浸提温度、浸提时间、浸提次数对磷脂提取率的影响,并用正交设计优化提取工艺条件.结果表明,最佳工艺条件为:乙醇含量为92%、料液比1∶8、浸提温度45℃、浸提时间20 min、浸提3次,在该条件下产品的提取率可达47.73%.采用薄层层析法结合分光光度法分析测定大黄鱼鱼卵磷脂含磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、神经鞘磷脂、溶血磷脂酰胆碱5种组分,相对含量分别为69.38%、4.14%、8.52%、7.24%、10.72%.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 陈文娟  陈丽娇  曾稍俏  
为了充分提取和利用大黄鱼鱼卵中的磷脂,研究酶水解法提取大黄鱼鱼卵磷脂的工艺。通过单因素试验和响应面设计优化试验,确定酶水解法的最佳工艺条件,并比较酶水解法与溶剂法、超声波法的提取效果。结果表明,选用内切型木瓜蛋白酶、料液比1∶2、pH 6.0、酶解温度45℃、酶解时间1.5 h和加酶量125 U/g为较佳工艺条件。在此条件下,产品的平均提取率可达70.92%,表明响应面法用于对大黄鱼鱼卵磷脂提取条件的优化是可行的。工艺放大试验结果表明,酶水解法的提取率比溶剂法和超声波法分别提高了22.02%和9.6%,说明酶水解法是提高大黄鱼鱼卵磷脂提取率的较好方法。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 张敏  魏微  陆晓丹  张玲云  杜艳瑜  李淑卿  梁鹏  程文健  陈丽娇  
以大黄鱼鱼卵为研究对象,采用6种溶剂(正己烷、环己烷、异丙醇、乙酸乙酯、95%乙醇、氯仿—甲醇)提取鱼卵油,对所得鱼卵油的脂质得率和品质(磷脂含量、过氧化值、游离脂肪酸含量、硫代巴比妥酸值、脂肪酸组成)进行分析.结果表明:95%乙醇组的脂质得率(27.97%±0.40%)、磷脂含量(12.40%±0.35%)、游离脂肪酸含量(12.76%±0.33%)和硫代巴比妥酸值(2.76 mg·kg~(-1)±0.14 mg·kg~(-1))均显著高于其他溶剂组,过氧化值(1.33 mmol·kg~(-1)±0.38 mmol·kg~(-1))最低.氯仿—甲醇组的脂质得率(19.00%±0.57%)相对较低,但其磷脂含量(8.18%±0.62%)仅次于95%乙醇组,且过氧化值(2.22 mmol·kg~(-1)±0.32 mmol·kg~(-1))、游离脂肪酸含量(4.64%±0.05%)和硫代巴比妥酸值(0.97 mg·kg~(-1)±0.07 mg·kg~(-1))均较低.此外,二十碳五烯酸(EPA)含量和二十二碳六烯酸(DHA)含量之和在多不饱和脂肪酸(PUFA)中的占比分别为89.73%(氯仿—甲醇组)、88.49%(95%乙醇组)、87.59%(异丙醇组)、87.21%(正己烷组)、86.25%(环己烷组)、82.02%(乙酸乙酯组).综上,95%乙醇对大黄鱼鱼卵油的提取效果最好,但其氧化程度较为严重;氯仿—甲醇组鱼卵油的脂质得率低,但其氧化程度相对较低,品质较好.说明氯仿—甲醇是提取大黄鱼鱼卵油的最佳溶剂.
[期刊] 华北农学报  [作者] 苏岭  李绍戊  王荻  刘红柏  卢彤岩  尹家胜  
依据GenBank已公布的鲫鱼热激蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)和beta-actin mRNA序列,分别设计两对引物,应用半定量RT-PCR方法检测应激处理后不同恢复时期鲫鱼(Carassius auratus)肝脏中HSP70 mRNA的表达情况。结果表明,诱导后肝脏组织中HSP70 mRNA的表达量呈现时间依赖性,存在先升高后回落的趋势。在诱导后1h即有所升高,在4h时达到最高值,之后逐渐降低,至48h,表达量降至最初值。研究结果为鲫鱼HSP70的研究提供了基础数据,也为将HSP70用作鱼类生理状态的诊断提供了理论依据。
[期刊] 海洋渔业  [作者] 高露姣  夏永涛  黄艳青  师伟  庄平  张涛  宋超  
采用生化方法分析了俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)和西伯利亚鲟(Acipenser baerii)鱼卵的营养成分,并对两者的营养品质进行了比较。结果表明:这两种鱼卵的水分含量平均值为62.83%~64.88%,粗蛋白平均含量为20.38%~20.77%,粗脂平均含量为10.41%~13.58%。统计分析表明,俄罗斯鲟鱼卵的粗脂肪含量显著低于西伯利亚鲟鱼卵,而粗蛋白、水分和灰分含量略高于西伯利亚鲟鱼卵。俄罗斯鲟鱼卵和西伯利亚鲟鱼卵的氨基酸组成一致,均含有17种氨基酸,必需氨基酸指数(EAAI)分别为50.66和44.43。两种鲟鱼卵的脂肪酸中,均以C16∶0、C18∶...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 程新伟  梁鹏  孙鹤  赵卉双  金红  程文健  陈丽娇  
以氯仿/甲醇法提取的大黄鱼鱼卵粗磷脂为原料,研究柱层析固定相种类、粒度,洗脱剂流速、配比及样品上载量等因素对分离纯化的鱼卵磷脂酰胆碱(Roe-PC)纯度和回收率的影响,以确定最佳的工艺参数.结果表明,在固定相为200300目硅胶,流动相为氯仿/甲醇(3∶2),流速为2 m L·min(-1),上载量为0.035 g·g(-1)(样品/硅胶)的条件下,分离纯化的大黄鱼Roe-PC的纯度可达96.34%,回收率为85.18%.
[期刊] 淡水渔业  [作者] 屈长义  王宗斌  惠筠  
[期刊] 水产学报  [作者] 王煜恒  王爱民  刘文斌  於叶兵  韩光明  臧旸  
为了探讨不同脂肪源对异育银鲫生长、消化率和体成分的影响,在基础饲料中分别添加4%的鱼油、豆油、猪油、花生油和混合油(鱼油∶豆油∶猪油=3∶4∶3)制成5种等氮试验饲料,饲喂均重为(6.04±0.05)g的异育银鲫60d。结果表明,混合油组的增重率、特定生长率(SGR)显著高于鱼油组和猪油组(P0.05);蛋白质效率(PER)、饲料系数(FCR)各组间均无显著性差异(P>0.05);豆油组的肠体比显著高于鱼油组和猪油组(P<0.05);猪油组的肝体指数(HSI)显著高于鱼油组(P<0.05),猪油组的内脏指数显著高于混合油组(P<0.05);不同脂肪源对肥...
[期刊] 华北农学报  [作者] 贾睿  曹丽萍  丁炜东  杜金梁  徐跑  殷国俊  
通过不同的分离方法和培养条件探索鲫鱼肝细胞的原代培养,以建立稳定的鲫鱼肝细胞原代培养模型。用台盼蓝染色检测细胞存活率;用WST-1检测细胞活力,同时观察长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果显示:组织块培养4~5 d后肝细胞从组织块中迁出并增殖,但这种方法所需时间长且细胞不易收集;机械分散法收集的细胞少,细胞存活率低;而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的分离和培养效果。用0.1%胰蛋白酶消化30 min,每克肝重可收集1.47×108个细胞,平均存活率为91.43%。培养基和血清浓度均会影响肝细胞的贴壁和生长。在含有10%(V/V)胎牛血清(FCS)M199培养基中,4%CO2、28℃,肝细胞培养8~...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 杨坤  翟凯旋  习丙文  陈凯  谢骏  潘良坤  
洪湖碘泡虫(Myxobolus honghuensis)是引起异育银鲫(Carassius auratus gibelio Bloch)“喉孢子病”的重要病原, 每年导致养殖苗种和成鱼大量死亡。本研究通过隐性感染异育银鲫母本人工受精、实验室条件下受精卵孵化和幼鱼培育, 采用单管半巢式PCR、荧光定量PCR和寡核苷酸荧光原位杂交等检测手段进行亲本、卵和幼鱼等环节的检测分析, 探究异育银鲫寄生洪湖碘泡虫是否存在经卵传播途径。结果表明, 实验所采用34尾异育银鲫母本(A1~A22, B1~B12)的洪湖碘泡虫隐性感染率达50%~75%, 其中, 卵和伪鳃检出率高于卵巢组织样品; 特异性寡核苷酸探针荧光原位杂交在隐性感染母本的卵巢、伪鳃、肾、脾组织检测到洪湖碘泡虫前孢子生成阶段营养体; 实验室条件下阳性母本所产的卵经孵化和培育出的幼鱼15 dph和30 dph样品可以检出阳性(A1、A18、B8和B9); 荧光原位杂交显示15 dph幼鱼在伪鳃、鳃和肾脏组织检测出阳性信号。本研究进一步揭示了异育银鲫寄生洪湖碘泡虫存在经鱼卵传播途径; 研究结果为相关疾病制定防控措施奠定重要的理论基础。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 胡秀彩  边延峰  胡宏晓  王艺  吕爱军  
从市售鲫鱼(Carassius carassius)鳃中分离获得一株细菌,暂时编号为CG-2,进行细菌形态观察、理化特征、16S rRNA基因测序以及系统发育树构建等系统鉴定。结果表明,CG-2菌株为革兰氏阴性杆菌,进一步采用PCR方法扩增16S rRNA基因,测序片段大小为1501 bp,与维罗纳假单胞菌(Pseudomonas veronii)的序列同源性达99.5%~99.7%;系统发育树分析表明,CG-2菌株与P.veronii(AF064460)亲缘关系最近,自然聚类为一支,因此,鉴定CG-2菌株为维罗纳假单胞菌。首次报导鲫鱼鳃中维罗纳假单胞菌,为进一步研究鱼类鳃中细菌分布及生态功能...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 单瑞后  王松  王骏  王军  汝少国  
采用Sephacryl S-300过滤层析和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析相结合的方法从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)成熟卵子匀浆液中分离纯化出了一种高分子量的蛋白。该蛋白能被Schiff试剂、甲基绿和苏丹黑B着色,Western blot显示能被金鱼卵黄脂磷蛋白(lipovitellin,Lv)多克隆抗血清特异性识别,在非变性条件下分子量约为560 k D,在SDS变性条件下分子量约为112 k D,结果表明分离纯化的蛋白是一种含有糖、磷、脂基团的蛋白,符合鱼类Lv的性质,且与金鱼Lv有免疫交叉反应,从蛋白的性质和免疫原性以及分子量大小...
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