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[期刊] 淡水渔业  [作者] 梁利群  孙孝文  沈俊宝  闫学春  王鹏  
鲤鱼受精卵导入外源基因最佳时期的研究梁利群,孙孝文,沈俊宝,闫学春,王鹏(中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,哈尔滨150076)1985年以来,世界各国先后应用不同外源基因导入虹鳟鱼、鲤鱼、鲶鱼等人工养殖鱼类以提高鱼的质量和产量。但受精卵发育到何时...
[期刊] 水产学报  [作者] 章怀云  张学文  何铁林  陈立祥  陈韬  萧调义  李晋衡  
精子载体法将外源DNA导入草鱼受精卵获得性状转移GENETICTRAITSTRANSFERENCEAFTEREXOGENOUSDNAWASINTRODUCEDINTOGRASSCARPDURINGFERTILIZATIONWITHSPERMASTHE...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 祝东梅  吴志新  冯雪  王艳  庞素风  周金敏  王树云  陈孝煊  
对草鱼受精卵及所处水体的好氧及兼性厌氧菌的数量和组成进行了研究。结果表明:草鱼受精卵菌群的数量随受精卵的发育呈递增趋势,刚受精时每个受精卵的细菌数量为1.24×101cfu,出膜前增加到1.41×105cfu。水体中细菌的数量相对稳定,为1.05×104~3.85×104cfu/mL,只在受精卵出膜前的阶段急剧增加,为1.32×106cfu/mL。随受精卵的发育,受精卵的优势菌群先为气单胞菌属(Aeromonas)、肠杆菌科(Enterobac-teriaceae)、微球菌属(Micrococcus)和棒杆菌属(Corynebacterium),后为莫拉氏菌属(Moraxella)和不动杆菌属...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 王辉田  罗光彬  王忠彬  孙超  陈思  吴宏平  王娇娇  
为了建立一个完善的兔胚胎体外生产体系,探讨了TCM-199、M16和KSOM基础培养液对兔卵母细胞体外成熟,上游法和直接洗涤法洗涤处理精液的方法对卵母细胞体外受精及不同浓度的L-谷氨酰胺对受精卵发育的影响。结果表明:以TCM-199为基础培养液体外成熟率(72.29%)显著高于M16成熟率(59.11%)和KSOM成熟率(49.57%),三者之间彼此差异显著(p<0.05);上游法处理精子后,体外受精卵母细胞的卵裂率(64.89%)和囊胚发育率(18.56%)均高于直接洗涤法(51.9%,11.97%),且差异显著(p<0.05);0.5mmol.L-1L-谷氨酰胺受精卵培养液组的2~4细胞发...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 陈钢  张庆勤  
远缘杂交是创造新物种、新种质以及转移异源遗传物质的有效途径, 在理论和实践上都具有重要意义。本文综述了近年来小麦外源基因导入的研究进展概况,并根据我们多年的远缘杂交育种实践, 综合分析了当地的生态气候条件, 提出了生态环境与糖蛋白互作诱导远缘杂种育性假说。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 张建国  崔会平  何方  
以4年生黑宝石李Prunus salicina ‘Friar’为试材,采取不同时期喷洒20%灭扫利乳油2000倍液防治李实蜂Hoplocampa ninutominuto,评价不同处理的防治效果。2a的试验结果表明,在花前(花蕾处于露色期、个别单花开放)和花后(花基本落完时)各喷1次,可使黑宝石李受李实蜂危害而造成的虫果率下降到10.9%和10.6%,是防治李实蜂的最佳时期,花前用药可以防止成虫产卵,花后喷药防止幼虫蛀果。在生产上以物候期为指标指导李实蜂防治更具有实际意义。表1参9
[期刊] 西南农业学报  [作者] 杨华莲  何川  马立鸣  宣廷孝  
为持续保护和开发利用匙吻鲟资源,对匙吻鲟胚胎发育过程进行观察。对匙吻鲟亲鱼进行人工催产、人工产卵、取精,进行干法人工授精;人工授精后在双筒解剖镜下观察与研究,并用体视显微镜辅助拍摄并记录。结果表明,匙吻鲟的成熟卵为多黄卵,卵裂为特殊的辐射裂。匙吻鲟的胚胎发育可分为受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、卵黄栓期、神经胚期、心脏搏动期、孵出期。在水温为22~25℃时,匙吻鲟胚胎发育需要90~96 h,总积温为2112~2250℃.h。孵化出的仔鱼全长7.05~7.32 mm
[期刊] 淡水渔业  [作者] 黄斌  黄勇  郭旭升  龚睿  
研究了黄缘闭壳龟(Cistoclemmys flavomarginata)孵化积温。结果显示:在孵化床平均温度为29.3℃、28.7℃时,受精卵在常温与控温条件下的平均孵化期分别为76.7 d、75.8 d,孵化率为84.9%与92.5%,孵化积温分别为47491.2~57741.1℃.h、45460.8~56088.0℃.h,最短孵化期为66 d,最长孵化期为82 d,常温孵化比控温孵化的平均孵化积温高1803.8℃.h,孵化率低7.6%。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 马保华  王建华  史志诚  严兴荣  冯若鹏  冉林武  王志东  
采用腹腔注射染毒法研究了Aroclor1254对公鼠精子受精能力及受精卵发育的毒性。将体重(18±3)g的性成熟期公鼠随机分为1/10LD50,1/50LD50,1/250LD50和1/1250LD504个染毒组及稀释剂对照组,染毒组公鼠于试验的第0,3,6天,按照0.01mL/g的注射量,分别注射用灭菌花生油稀释的20,4,0.8,0.16mg/mLAroclor1254溶液,稀释剂对照组注射灭菌花生油。试验开始40d后,用各组公鼠对未染毒的超排母鼠配种。结果表明,用高剂量Aroclor1254染毒公鼠对超排的正常母鼠进行配种时,会显著降低受精卵比例(P<0.01)和受精卵的卵裂率(P<0....
[期刊] 华北农学报  [作者] 李远新  王关林  葛晓光  
以黄瓜 (CucumissativusL .)栽培品种津研四号为受体 ,以质粒 pBI12 1为供体进行授粉后外源DNA直接导入技术的研究 ,建立起高效的黄瓜子房注射转化系统 ,获得了不同的转基因植株。试验表明 ,子房注射法的坐果率和结种率最低 ,但其转化率最高 ;黄瓜授粉后 12h注入外源基因的转化率最高 ;外源DNA溶液的浓度、pH值及DNA溶液注射体积是影响黄瓜坐果结实及基因转化率的重要因素。GUS组织化学染色结果以及Southernblot印迹杂交表明 ,标记基因NPTⅡ和GUS基因均转化到黄瓜植株中
[期刊] 淡水渔业  [作者] 董宏伟  郭维士  于科  付增才  
[期刊] 水产学报  [作者] 苏建明  章怀云  肖调义  张学文  陈韬  苏建通  王跃智  
通过体外重组,将绿色荧光蛋白基因编码序列克隆到鲤鱼肌动蛋白基因启动子下游,构建成能在鱼体内表达绿色荧光蛋白的重组分子。用限制性内切酶PvuI酶切线性化后,通过显微注射法导入金鱼受精卵内,在转化后48h,可观察到绿色荧光,经PCR初步筛选后,对显阳性个体进行Southern杂交检测,结果表明,转化个体表现出较强的杂交信号。这说明绿色荧光蛋白基因能在金鱼体内整合、表达。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 苏胜彦  陈为先  马佳璐  张勇  胡鹏晨  闻剑旻  张成锋  董在杰  袁新华  徐跑  
以水母绿色荧光蛋白基因为模板进行PCR扩增得到目的基因(Green fluorescence protein,GFP),然后加上酶切位点BamHI和NheI,构建pLenti6.3-IRES-EGFP载体,转染DH5α感受态细胞进行菌落PCR,取阳性进行酶切鉴定,再取呈阳性的质粒进行测序,使用浓度为1μg/μL的质粒与慢病毒表达载体进行连接,通过荧光显微镜观察到绿色荧光,表明本实验获得的GFP和慢病毒载体整合成功;用此转染293T细胞,通过荧光显微镜同样检测到了绿色荧光。使用建鲤的组织提取RNA,然后按照Fermentas公司的M-MLV操作说明书进行反转录,得到IGF2b基因后加酶切位点进行...
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 秦志华  李健  刘淇  
用PHMB(聚六亚甲基双胍)对中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)受精卵和无节幼体进行消毒处理,并与二氯异氰尿酸钠进行比较。结果显示,用PHMB对中国对虾受精卵消毒,其对孵化率无显著影响(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王锋  
利用屠宰牛的卵巢 ,研究了卵巢内 (IO)卵母细胞体外成熟、受精及发育能力。结果表明 ,成熟培养液中添加FSH (10 μg·mL-1)、hCG (2 0 μg·mL-1)和E2 (1μg·mL-1)等激素对IO卵母细胞受精发育能力有极显著促进作用(P
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