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[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈孝宇  陈鑫  王津津  范引光  曾宪东  郑剑  
鲤浮肿病(carp edema virus disease,CEVD)是在锦鲤中发现的一种传染性病毒病,近年来在全球传播迅速,对鲤养殖业造成严重损害。本研究设计CEV环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)引物,进行特异性实验;选取套式PCR、荧光PCR和LAMP三种检测方法,组织10家实验室进行室间比对测试:制备含CEV病毒核酸的测试样品,评价其均匀性和稳定性,通过测试结果分析方法检出限。结果显示,套式PCR的核酸样品检测限可达6.8×10~(-10) g。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 翟立文  刘文枝  许晨  范玉顶  江南  周勇  曾令兵  
本研究针对鲤浮肿病病毒(carp edema virus, CEV)基因组核蛋白编码基因P4a的序列,设计2对特异性引物,以克隆构建的重组质粒为标准模板,通过优化反应体系中引物浓度组合、Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、反应温度和扩增时间等参数,建立了CEV环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。结果表明,CEV-LAMP方法的最佳反应温度为62℃,引物浓度组合为引物F3/B3 0.2μmol/L,引物FIP/BIP 1.2μmol/L, Betaine0.7 mol/L, Mg~(2+) 8.0 mmol/L, dNTPs 1.2 mmol/L,反应时间60 min。反应产物经凝胶电泳呈现梯型条带,添加SYBR Green I荧光染料后,呈现明显的绿色阳性反应。CEV-LAMP法灵敏度高,最低检测限为10 copies/μL,较常规PCR法灵敏度高100倍; CEV-LAMP法特异性强,与锦鲤疱疹病毒(KHV)、鲤疱疹病毒Ⅱ型(CyHV-2)、鳜传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)及鲤春病毒血症病毒(SVCV)无交叉反应。CEV-LAMP应用于患病鲤样本检测结果准确,简便快速,可为鲤浮肿病的现场诊断与防控提供技术支撑。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 刘吕丹  白玉霞  丁延伟  
热分析技术在矿物、金属、石油、食品、医药、化工等与材料相关的领域中应用日益广泛。由于热分析技术的影响因素众多,因此缺乏统一的标准物质对仪器进行校准,造成实验室难以建立测量结果的溯源机制,无法把握结果的准确度。通过实验室间比对可以有效确定实验室的检测能力,保证实验数据准确。该文以中国科学院实验室间比对项目“热重法测定未知物的热分解百分比”的实施为例,通过分析比对数据的统计结果,发现比对结果一致性良好,各参比实验室测量结果偏差均在可接受范围内,验证了实验室间比对方法在热分析技术中应用的适用性和可靠性。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 赵杰  潘溪  金鑫  
实验室资质认定评审准则已经更改为检验检测机构评审,在名称和内容都发生变更的情况下,是否还能成为高校实验室管理的指南。从检验检测机构与高校实验室关系入手,说明高校实验室继续参照评审准则来发展管理的可行性和必要性,并根据实验室的功能提出3种不同的参照等级,形成科学合理的发展观。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 李明  杨凯  王军  杜文凯  
连续采集多帧视频图像,利用帧间滤波法建立背景图像,并通过改进背景差分算法尽可能地提取完整的目标轮廓,并用链表法表示轮廓特征。提取目标轮廓的HOG特征,通过SVM分类器进行分类,研究分析不同的人体异常行为。该方法可以有效识别出快速移动、弯腰行走、跌倒、跳跃、长时间停留等异常行为。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 魏峰  刘锦瑞  贾翠棉  刘伟  杜峰  张向丽  
从制度管理和体系架构的角度,探讨了检验检测实验室安全管理体系的构成,介绍了检验检测实验室安全管理体系应该具有的特点及与质量管理体系的关系,重点讨论了管理体系中的各种管理制度,列举了各类操作规程。这对各类检验检测实验室以体系化、制度化的思路建立安全管理体系具有积极意义。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 寇昆湖  陈勇  张春平  于进勇  
针对当前无人机训练缺乏实装、实装部件拆装训练损耗大等问题,开展用于模拟机务训练的无人机地面检测与维护实验室建设研究,采用Leap Motion、虚拟现实等技术,以互动操作方式,对三维全息成像互动装配操作台、综合检测台和机务训练台3个主要组成部分进行方案设计。实验室建成后,可开展无人机整体及部附件的拆装教学训练、性能检测、地面设备外场维护与飞行准备训练等内容。
[期刊] 科技管理研究  [作者] 吕雪  顾轶卓  张佐光  
高校检测实验室在仪器设备、人员素质、开放性等方面具有独特优势,为保证检测数据准确、客观,建立完善的实验室质量管理体系,实现检测质量有效控制至关重要。在总结分析我国高校检测实验室特点和管理体系中存在问题的基础上,针对实验室认可制度,结合北京航空航天大学碳纤维检测评价中心的工作,提出高校检测实验室质量管理体系的建设方法,阐述检测质量控制的关键要素,总结相关经验。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 程红  严定策  宋武林  孔翦  曾艳  
圆二色(CD)光谱是一种广泛使用的测量蛋白质结构和构象变化的方法,可以提供除其他生物物理、化学和结构生物学技术以外的辅助结构信息。为了评价各实验室间CD测量结果的准确性,由教育部高等学校科学研究发展中心、国家计量认证高校评审组组织,华中科技大学分析测试中心承担并负责实施了2022年度高校实验室间比对项目“α-螺旋主导蛋白质的圆二色光谱测定”,项目以一种α-螺旋为主导的蛋白质(细胞色素C)在波长222 nm处的圆二色值作为考核参数,共有来自12个国内高校测试平台和科研院所的实验室参加了此次比对活动。通过基于经典统计法对比对数据的统计分析,表明各参加实验室测量结果偏差均在可接受范围之内,有效验证了不同实验室间进行CD光谱测量的可比性和可靠性。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 许骏  魏阙  张敬天  
对省级重点实验室建设的科学评价和指导,是实验室建设与发展的迫切要求。针对吉林省重点实验室评价方法存在的一些不足,设计了省级重点实验室分类评价体系和实施路径,以期提升重点实验室评价工作的针对性和指引性。通过完善重点实验室评价体系,结合区域特色,认真谋划、加大投入、连续支持、积极推动,为创新驱动省级重点实验室高质量发展作出相应贡献。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 刘增再  朱中武  唐连飞  胡述光  刘毅  徐霞  李娜  彭运潮  
参考GenBank中发表的猪瘟病毒(CSFV)序列,设计一对CSFV特异性引物;从CSFV感染猪盐渍小肠中提取总RNA,经逆转录后进行PCR扩增,在盐渍小肠中成功扩增出与预期大小(168bp)一致的特异性条带,而正常猪和感染猪伪狂犬病病毒的猪小肠扩增结果均为阴性.用此方法对40例盐渍猪肠衣样本进行检测,结果与经典抗原检测方法(抗原捕获ELISA法)一致,而兔体交叉反应试验的阳性检出率为RT-PCR的66.7%,表明本RT-PCR技术能应用于盐渍猪肠衣的CSFV检测.
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 蔡伊娜  彭礴  何晓燕  包先雨  彭智彬  丘雀灵  蒙家辉  
针对现有食品检测实验室数据人工录入差错率高、样品流转管理难、云端管控差等问题,提出构建基于SaaS的食品检测实验室三级云服务体系,包括设备云、系统云和平台云。实践结果表明,通过数据采集系统实现数据采集自动化,多载体标签实现样品流转信息可视化及样品管理的有序化,云端上实现对数据和样品的管控智能化,该服务体系比传统实验室管理具有明显的优势。
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 李钰琛   麦晓霞   谭智毅   徐金梅   席静   刘佳  
根据纺织实验室认可领域存在的问题以及纺织行业技术的变化,中国合格评定国家认可委员会(CNAS)对《检测和校准实验室能力认可准则在纺织检测领域的应用说明》(CNAS-CL01-A010)进行了修订。该文针对该文件2023版与2018版应用说明,从框架和条款内容对比《应用说明》2023版和2018版,对范围、结构要求、人员、设施设备、样品、检测方法、监控方法等变化条款逐一解读,分析2023版《应用说明》的修订特点,并针对新版变化提出改进建议,以更好地规范纺织实验室活动,提高管理水平。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 邵震  刁有祥  
【目的】经长期对中国国内各省市的规模化鹅场常见病毒性疫病核酸检出率进行调查,发现国内许多规模化鹅场均可同时检出多种病毒核酸,并且这种现象非常普遍,鉴于目前国内关于规模化鹅场多种病毒性疫病核酸同时检出的相关数据较为匮乏,论文旨在了解规模化鹅场多种病毒性疫病核酸同时检出的情况并进行分析,为规模化鹅场病毒性疫病的防控提供理论指导和科学依据。【方法】2021年5—10月,自山东、黑龙江、四川、吉林、广西、河南、安徽、辽宁、河北、贵州、湖南及内蒙古等省市的47个规模化鹅场采集737份病料,对其采用普通PCR及RT-PCR方法进行番鸭呼肠孤病毒(muscovy duck reovirus, MDRV)、鸭呼肠孤病毒(duck reovirus, DRV)、鹅星状病毒(goose astroviruses, GAstV)、禽腺病毒(fowl adenovirus, FAdV)、禽网状内皮增生病毒(reticuloendotheliosis virus, REV)、新城疫病毒(newcastle disease, ND)、鹅细小病毒(goose parvovirus, GPV)、鹅圆环病毒(goose circovirus, GoCV)、鹅出血性多瘤病毒(goose hemorrhagic polyomavirus, GHPV)、坦布苏病毒(tembusu virus, TMUV)及H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus H9, H9-AIV)等11种规模化鹅场常见病毒性疫病的检测。每份病料剖取完整的肝脏、脾脏、肺脏及肾脏,利用Trizol法提取总RNA;以总RNA为模板逆转录合成cDNA的一条链,而后以cDNA为模板继续扩增获得完整的cDNA,随后以该cDNA为模板利用番鸭呼肠孤病毒、鸭呼肠孤病毒、鹅星状病毒、禽腺病毒、禽网状内皮增生性病毒、新城疫病毒、鹅细小病毒、鹅圆环病毒、鹅出血性多瘤病毒、坦布苏病毒及H9亚型禽流感病毒的特异性引物,通过普通PCR反应扩增目的片段;所有扩增片段均进行琼脂糖凝胶电泳,对部分阳性样品进行测序;将所获得的测序结果与GenBank上发表的相应病毒基因序列进行比较,应用MEGA 6.0软件中的邻接法(neighbor-joining, NJ)绘制系统发育进化树进行分析。【结果】番鸭呼肠孤病毒、鸭呼肠孤病毒、鹅星状病毒、禽腺病毒、禽网状内皮增生性病毒、新城疫病毒、鹅细小病毒、鹅圆环病毒、鹅出血性多瘤病毒、坦布苏病毒及H9亚型禽流感病毒感染情况检测结果显示,GAstV核酸检出率最高,为58.21%;REV及NDV核酸检出率最低,分别为1.36%及1.50%;鹅群不同程度上均可同时检出多种病毒核酸,尤其以2种或3种病毒核酸同时检出的情况较为普遍,占样品总数的67.44%。两种病毒核酸同时检出率中GAstV与GoCV同时检出所占比例最大,为18.44%;3种病毒核酸同时检出率中MDRV、GAstV及GPV同时检出所占比例最大,为36.28%。【结论】明确了我国规模化鹅场可以同时检测到多种病毒核酸这一特征,这可能是我国规模化鹅场病毒性疫病复杂化和防控难度加大的重要原因之一。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李琼  岳志芹  凌宗帅  刘荭  梁成珠  陈晓  陈昌福  
根据淋巴囊肿病毒的主要衣壳蛋白(major capsid protein,MCP)基因保守序列,利用PrimerExplorer 3软件设计了5条引物,对LAMP反应温度和反应时间等参数进行了优化。与流行性造血器官坏死病毒、虎纹蛙病毒、蛙虹彩病毒、新加坡石斑虹彩病毒、鳜传染性脾肾坏死病毒、真鲷虹彩病毒等其它虹彩病毒及对虾白斑综合症病毒都没有交叉反应。将LAMP检测方法与常规PCR进行灵敏度的比较分析,结果显示LAMP的检测灵敏度约为15 fg,比常规PCR灵敏度高一个数量级。该方法检测时间短,在1 h内即可完成检测。用建立的LAMP方法对临床鱼样进行了检测,结果表明12尾外观有淋巴囊肿病症状的...
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