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[期刊] 水产学报
[作者]
胡红霞 刘晓春 朱华 张勇
用蛋白质快速液相层析(FPLC)分离俄罗斯鲟鱼脑垂体促性腺激素(GtH),共获得GtH纯化蛋白4.6mg。用SDS-PAGE变性胶电泳图谱初步分析纯化蛋白,用反相高效液相色谱(rpHPLC)分离出两个亚基,质谱测定α亚基分子量:15 603ku,两个β亚基分子量分别为14 338ku和14 694ku。制备了鲟鱼GtH的兔抗血清多克隆抗体,采用氯胺T法用125I标记抗原,用羊抗兔γ球蛋白做二抗,建立鲟鱼GtH的放射免疫测定方法。测定了催产前后不同时间史氏鲟血清中GtH含量的变化,统计分析表明成功排卵的雌鱼比未排卵和阴性对照组在催产后12h和16h GtH分泌量升高显著,最高达到234ng.mL...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘根桃 陈伟华 郑元林 陈杰 韩正康
胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）分别与两种载体蛋白——牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和卵清蛋白（ＯＡ）用戊二醛连接，经紫外分光光度仪扫描确定偶联成功。以ＩＧＦ－１－ＢＳＡ作为免疫原，皮内多点注射免疫青紫兰兔，制备ＩＧＦ－１抗体，经ＥＬＩＳＡ法测定，血清效价为１∶２０００，放免工作浓度为１∶１５０００。采用氯胺－Ｔ标记ＩＧＦ－１，用酸醇抽提法处理样品，去除ＩＧＦ－１结合蛋白。所建立的ＩＧＦ－１放免标准曲线，其最小检测量为０．０６ｎｇ／ｍＬ，批内误差为４．８％，批间误差为８．２％（ｎ＝１０）。
关键词：
胰岛素样生长因子-1 放射免疫测定法
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
郭定宗 冯国亭
利用放射免疫法对36只昆明犬血清三碘甲状腺素(T_3)、四磺甲状腺素(T_4)水平进行了初步研究。测定结果:68日龄幼犬(n=8)的T_3为0.359±0.188 ng/ml血清,T_4为56.56±6.1 ng/ml血清;1～2岁的成年犬(n=28)T_3为0.206±01.09 ng/ml血清,T_4为13.47±4.21 ng/ml血清。该结果表明:昆明犬T_4含量明显高于T_3(P<0.01)。68日龄的幼犬T_3、T_4水平明显高于1～2岁成年犬(P<0.01)。还观察到个别(4~#、6~#)甲状腺素含量明显低于均值(P<0.01),犬体高、体重也低于同年龄犬。
关键词：
昆明犬 放射免疫测定 甲状腺素
[期刊] 水产学报
[作者]
刘红柏 张颖 杨雨辉 叶继丹 孙大江
采用饱和硫酸氨分步沉淀和Sephadex G-200凝胶层析的方法,首次分别纯化制备了健康非免疫状态下中华鲟(Acipenser sinensis)、史氏鲟(Acipenser schrenckii)和达氏鳇(Huso dauricus)的血清免疫球蛋白(Ig),并采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白免疫印迹(Western blotting)及免疫琼扩实验等方法对其Ig及Ig亚单位的分子量和部分特性进行了分析。PAGE及SDS-PAGE的结果显示:史氏鲟,中华鲟和达氏鳇IgM的相对分子量分别为867kD,896kD和924kD;3种鲟鱼Ig...
关键词：
史氏鲟 达氏鳇 中华鲟 免疫球蛋白
[期刊] 水产学报
[作者]
胡红霞 张勇 朱华 李立成 姚志刚
为了探讨在古老的软骨硬鳞鱼中促性腺激素(GtH)的双重内分泌调节作用,本实验设计用离体灌流的方法研究促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)和多巴胺(DA)对施氏鲟脑垂体碎片分泌GtH的影响。引入10、100和1 000 nmol/L 3个浓度的LHRH-A对施氏鲟脑垂体碎片3次脉冲式刺激实验;每次间隔1 h,持续5 min,研究不同剂量LHRH-A对鲟鱼脑垂体释放GtH的作用;用200 nmol/L DA对施氏鲟脑垂体碎片持续2 h灌流后引入5 min的1 000nmol/L LHRH-A刺激实验,研究DA如何抑制鲟鱼脑垂体释放GtH。每5 min收集一管灌流液,用放射免疫测定法(RIA)检测...
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵圣国 王加启 张春刚 卜登攀 刘光磊 张春林 章玉涛 周凌云
为了探讨免疫刺激后昆明小白鼠乳腺pIgR基因mRNA转录和特异性IgA含量变化。选择48只健康受孕昆明小白鼠,分为A、B、C、D组,分别于分娩后第4天注射灭菌生理盐水、Lipase+灭菌生理盐水、空ISCOM和Lipase+LTB+ISCOM,每组注射12只,并于分娩后第8天和12天采集小鼠乳样、血样和乳腺组织,用间接ELISA法测定乳和血浆中的特异性IgA含量,用Real Time-PCR检测小鼠乳腺中pIgR基因的相对转录水平。结果表明,免疫刺激对小鼠血浆中特异性IgA的含量无显著性影响(P>0.05),但是免疫B组和D组中小鼠分娩后12 d的乳中特异性IgA含量显著高于8 d乳中的特异性...
关键词：
pIgR mRNA IgA 乳腺
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘芬 孙晓杰 朱文嘉 郭莹莹 何柳 杨祯祯 王媛媛 文艺晓 王联珠
本研究建立了高效阴离子交换–脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)分析海参(Apostichopus japonicus)多糖的单糖组成及含量测定。通过比较3种蛋白去除法对海参多糖含量的影响,优化海参多糖纯化方法;比较淋洗液浓度对单糖分离效果的影响,优化海参中单糖分离的色谱条件。结果显示,Sevag法去蛋白的效果最好,在淋洗液为20 mmol/L NaOH的条件下分离岩藻糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖和乳糖;在淋洗液为160 mmol/L NaOH和200 mmol/L NaA
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
刘芬 孙晓杰 朱文嘉 郭莹莹 何柳 杨祯祯 王媛媛 文艺晓 王联珠
本研究建立了高效阴离子交换–脉冲安培检测法(HPAEC-PAD)分析海参(Apostichopus japonicus)多糖的单糖组成及含量测定。通过比较3种蛋白去除法对海参多糖含量的影响,优化海参多糖纯化方法;比较淋洗液浓度对单糖分离效果的影响,优化海参中单糖分离的色谱条件。结果显示,Sevag法去蛋白的效果最好,在淋洗液为20 mmol/L NaOH的条件下分离岩藻糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、葡萄糖和乳糖;在淋洗液为160 mmol/L NaOH和200 mmol/L NaA
[期刊] 中国水产科学
[作者]
冯文荣 柳淑芳 庄志猛 马骞 苏永全 唐启升
本研究旨在应用实时荧光定量PCR技术,建立半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)线粒体DNA(mtDNA)含量测定方法并进行优化。通过质粒标准品的线性化处理、模板DNA的酶切和超声处理、mtDNA和核DNA(nDNA)基因引物的筛选实验,建立半滑舌鳎mtDNA含量测定方法。结果表明,质粒标准品的构象对荧光定量PCR标准曲线影响较大,线性化的质粒更适合用作标准品;酚-氯仿方法提取的模板DNA适用于mtDNA含量测定,无需进行预处理;用D-loop和ND1这2对引物所得的拷贝数较小且结果一致,适用于mtDNA拷贝数的测定;以不同核基因为参照所得的mtDNA含量可能存在差异,当以单...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李斌 杨军 黄建华 韩文利 何洪超
通过在杂交鲟(达氏鳇(Huso dauricus)♀×史氏鲟(Acipenser schrenckii)♂)((50.26±0.55)g)饲料中分别添加2000 mg/kg的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、光合细菌和酵母多糖三种微生态制剂,研究其对杂交鲟的生长指标、血液指标和消化酶活性的影响。结果显示,与对照组相比,添加微生态制剂明显提高了杂交鲟的存活率,其平均增重率分别提高了31.95%、21.06%、45.09%,饵料系数分别降低了22.04%、7.50%、28.49%,蛋白质转化效率分别提高了22.90%、13.76%、26.61%;各项血液指标得到明显优化,其中,红...
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
冯广朋 庄平 赵峰 章龙珍 张涛 黄晓荣
研究了不同盐度海水驯养中史氏鲟血清激素催乳素、皮质醇、胰岛素样生长因子-I、四碘甲状腺原氨酸和三碘甲状腺原氨酸的变化规律及其对渗透压的调控作用。随着海水盐度逐渐升高,史氏鲟催乳素含量随之下降。从淡水刚进入海水中时史氏鲟的皮质醇含量下降,在进入盐度为25的海水中皮质醇含量上升。驯养过程中胰岛素样生长因子-I的含量变化较小,四碘甲状腺原氨酸和三碘甲状腺原氨酸的含量在进入海水中后有所升高。这5种激素协同作用,共同增强史氏鲟对海水的适应性和渗透压调节能力,其中催乳素和皮质醇对渗透压调控起主要作用。史氏鲟经海水驯养后进行海水养殖是可行的。
关键词：
史氏鲟 激素 海水驯养
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王水莲 薛立群 贺建华 袁安文 唐红星 向建州
附植前后哺乳动物子宫和胚胎能分泌多种妊娠相关蛋白 ,这些蛋白对妊娠的建立与维持十分重要 .为了从生化角度进一步研究胚泡附植的机理 ,从分析附植前后兔子宫和胚胎总蛋白含量着手 ,探讨了非妊娠和受孕不同时期的子宫和胚胎总蛋白含量的变化 .结果表明 ,非妊娠兔比妊娠兔子宫冲洗液总蛋白含量低 .妊娠组中 ,胚泡附植前后随着妊娠时间的延长 ,子宫冲洗液中蛋白质含量逐渐增加 ,妊娠前 4 d,增加幅度不大 ,从第 4 d到第 6 d增加幅度较大 ,从妊娠第 6 d到第 9d,蛋白质增加特别明显 .对于妊娠第 9d胚泡液 ,大胚泡 (直径 1cm左右 )中胚泡液总蛋白含量高于小胚泡 (直径 0 .5 cm左...
关键词：
兔 附植 子宫 胚胎 蛋白质
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
檀新珠 吴晓晴 吕明其 王冠淞 李健 秦韬 黄一帆 马玉芳
将60只小鼠随机分为空白对照组,太子参茎叶多糖(RPSLP)低、中、高剂量组,每组15只.空白对照组小鼠灌服0.2m L·d(-1)蒸馏水,低、中、高剂量组小鼠分别灌服50、100和200 mg·kg(-1)·d(-1)RPSLP,14 d后检测各组小鼠的免疫器官指数和血清免疫球蛋白、补体含量,研究RPSLP对小鼠免疫功能的影响.结果表明:与空白对照组相比,高剂量组小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.05),胸腺指数显著降低(P<0.05);低、中剂量组小鼠的IgA含量显著提高(P<0.05),低剂量组小鼠的
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘莉 钱均祥 萧凤回 查应洪 段承俐 杨生超 肖丹 吴丽华 李智敏 张庭 潘俊 王翰墨 李晚谊
通过取样量、超声时间、浸提剂量、粒径等4个石斛多糖的超声提取影响因素的正交和单因素试验。结果表明,石斛多糖含量超声提取测定的最佳参数为25.0 mg的取样量、80目的粒径、40 min的超声时间、浸提试剂体积与取样量之比为220。该方法具有样品前期处理时间短,测定仪器操作简便,测定速度快、样品用量少的特点,能在较短时间内对大量单株个体进行检测鉴定,为石斛的品质育种提供了有效途径和手段。
关键词：
石斛 超声提取 多糖含量
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
胡青海 李刚 郑明球 蔡宝祥
采用苯酚－氯仿混合法，提取了鸭疫里氏杆菌（Ｒｉｅｍｅｒｅｌａａｎａｔｉｐｅｓｔｉｆｅｒ）血清１型Ｊｂ２株、Ｊｂ３株、未定型菌Ｔｂ１株以及鸭大肠杆菌Ｅ４株和大肠杆菌Ｋ１２株的基因组ＤＮＡ。用热变性法测得Ｊｂ２、Ｊｂ３、Ｔｂ１和Ｋ１２株的解链温度（Ｔｍ）分别为６８．５，６８．５，６９．０和７３．５℃（缓冲液为０．１×ＳＳＣ）。由计算可知Ｊｂ２、Ｊｂ３和Ｔｂ１株的Ｇ＋Ｃ含量分别为３５．６２％，３５．６２％和３６．６７％。应用ＤＮＡ－ＤＮＡ杂交技术（初始复性速率法）比较了１型鸭疫里氏杆菌Ｊｂ２与Ｊｂ３株之间以及Ｊｂ２与Ｔｂ１株、Ｅ４株之间的同源性。结果表明，Ｊｂ２与Ｊｂ３之间的ＤＮＡ同源值为６８．６３...
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